北京市自然科学基金(7082034)
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 相关作者：杨晓葵王树玉张玉祥宋蕊周莹更多>>
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- p53依赖的X-连锁凋亡抑制蛋白调节与卵巢癌顺铂耐药的关系被引量：4
- 2009年
- 目的本研究旨在探讨X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法应用RT-PCR、Western Blot、流式细胞仪等检测卵巢癌顺铂敏感细胞株OV2008、A2780s和耐药株C13*、A2780cp中XIAP表达和卵巢癌细胞的凋亡率,并将反义XIAP寡核苷酸(XIAP As-ODN)、正义XIAP寡核苷酸(XIAP s-ODN)和随机对照链导入顺铂耐药细胞C13*(p53野生型)和A2780cp(p53突变型)中,比较转染前、后耐药细胞Caspase-3活性和顺铂耐药性的改变。结果卵巢癌顺铂敏感细胞和耐药细胞中XIAP在mRNA水平的表达无明显差异(P>0.05)。顺铂可以引起OV2008和A2780s中XIAP蛋白表达明显下降(P<0.05),而对C13*和A2780cp的XIAP蛋白含量无明显影响(P>0.05)。转染XIAP As-ODN可降调p53野生型耐药细胞C13*中XIAP的表达,并显著增加Caspase-3活性和对顺铂敏感性(P<0.05),而XIAP As-ODN对p53突变型耐药细胞A2780cp无此作用。结论卵巢癌细胞对顺铂产生耐药可能与XIAP蛋白相对高表达有关,反义XIAP可在一定程度上逆转卵巢癌顺铂耐药,该作用与卵巢癌细胞的p53表型有关。
- 兰永连任国庆贾婵维宋蕊张玉祥杨晓葵王树玉
- 关键词：X-连锁凋亡抑制蛋白P53化疗耐药卵巢癌
- 蛋白激酶B与卵巢癌化疗耐药性研究进展被引量：1
- 2008年
- 蛋白激酶B(Akt/PKB)是卵巢癌化疗敏感性的关键调控因子,可促进细胞周期运行,血管形成及细胞的生长,抑制细胞凋亡。其过度表达和活化在卵巢癌化疗耐药性的产生中起着重要作用。Akt通过影响p53功能、线粒体凋亡及JNK/p38信号传导等多种途径抑制化疗药物诱导的卵巢癌细胞凋亡,同时还可通过调节抑癌基因PTEN及X-连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)导致化疗耐药的产生。因此,加深对Akt的研究有助于进一步明确卵巢癌化疗耐药产生的机制,并使之成为卵巢癌化疗的有效作用靶点。
- 宋蕊杨晓葵王树玉
- 关键词：蛋白激酶BP53卵巢癌化疗耐药
- 蛋白激酶B调控的p53蛋白直接线粒体转移与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系被引量：4
- 2011年
- 目的探讨蛋白激酶B（PKB，又称Akt）调控的p53蛋白直接线粒体转移在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用及与卵巢癌顺铂耐药的关系。方法应用Western blot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞0V2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13^＊、A2780cp中线粒体和全细胞中p53含量。分离纯化线粒体，检测卵巢癌敏感细胞与耐药细胞p53直接线粒体作用的差异；应用Hoechst染色法检测卵巢癌细胞的凋亡率，将Aktl／2siRNA导入耐药细胞C13^＊细胞中，观察p53线粒体转移作用和细胞凋亡率的改变。结果顺铂能引起p53进入0V2008和A2780s细胞的线粒体中，但不能进入C13^＊和A2780cp细胞的线粒体。过度表达活化的Akt2能抑制p53进入A2780s细胞的线粒体；下调Akt后，可使p53进人C13^＊细胞的线粒体，同时C13^＊细胞对顺铂的敏感性增加。结论顺铂能引起卵巢癌敏感细胞中p53转移至线粒体，Akt导致的卵巢癌化疗耐药在一定程度上是Akt对p53直接线粒体作用的抑制。下调Akt的表达能使卵巢癌化疗耐药细胞的p53直接线粒体作用增强，耐药性得到一定程度的逆转。
- 周莹王树玉杨晓葵王红梅
- 关键词：蛋白激酶BP53蛋白卵巢肿瘤
- 磷酸化修饰对p53线粒体作用的影响以及与卵巢癌顺铂耐药的关系
- 2010年
- 目的探讨磷酸化修饰对p53直接线粒体转移的影响以及在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用以及与卵巢癌顺铂耐药的关系。方法应用Western Blot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13*、A2780cp的线粒体和细胞浆中Smac蛋白含量以及线粒体和全细胞中磷酸化p53(P-p53)的含量,并应用Hoechst染色法检测卵巢癌细胞的凋亡率。结果顺铂能引起卵巢癌敏感细胞OV2008、A2780s线粒体释放Smac至胞浆并引起细胞凋亡,但在C13*和A2780cp中无此反应。顺铂处理后进入卵巢癌敏感细胞线粒体中的p53蛋白为磷酸化的p53。结论顺铂能引起p53转移至线粒体并导致卵巢癌敏感细胞线粒体释放Smac至胞浆,促进卵巢癌细胞的凋亡,并且磷酸化修饰作用可以影响p53的直接线粒体功能,与卵巢癌化疗耐药有关。
- 周莹任丽萍张爱军王红梅王树玉杨晓葵
- 关键词：P53磷酸化SMAC卵巢癌化疗耐药
- 蛋白激酶B抑制线粒体Smac释放与卵巢癌顺铂耐药的关系被引量：4
- 2008年
- 目的探讨蛋白激酶B（Akt）和线粒体促凋亡蛋白（Smac）在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的关系及Akt在卵巢癌顺铂耐药中的分子机制。方法应用Westernblot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13^＊、A2780cp中Smac含量。将Smac siRNA和Smac N7多肽分别导入0V2008和C13^＊细胞中，应用流式细胞仪测定细胞的凋亡率，观察稳定转染Akt2的A2780s（A2780s-AAkt2）细胞和转染Akt1／2siRNA的C13^＊细胞对顺铂耐药性的改变。结果顺铂能导致OV2008、A2780s细胞线粒体释放Smac，并引起细胞凋亡（P〈0．05）；但在C13^＊和A2780cp细胞中无此反应（P〉0．05）。转染Smac siRNA后的0V2008细胞，其Smac表达降低，对顺铂的耐药性增加；转染SmacN7多肽能增加C13^＊细胞对顺铂的敏感性；Akt2过度表达可抑制A2780s细胞Smac释放，并对顺铂产生了耐药性；应用Akt1／2siRNA后可下调C13‘细胞中Akt1／2的表达，使C13^＊细胞对顺铂的敏感性增加。结论顺铂对卵巢癌细胞的杀伤在一定程度上是通过线粒体释放Smac所致；Akt抑制了线粒体Smac释放与卵巢癌化疗耐药部分相关。
- 杨晓葵王建东王树玉张玉祥
- 关键词：SMAC卵巢肿瘤化疗耐药RNA干扰
