河北省医学科学研究重点课题(08258)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：河北医科大学河北省儿童医院河北大学更多>>
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- 柯萨奇病毒B3 VP1蛋白、rAd/VP1和pcDNA3/VP1的免疫效果比较被引量：2
- 2011年
- 目的 观察柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）衣壳蛋白VP1、表达VP1蛋白的重组腺病毒rAd/VP1和重组质粒pcDNA3/VP1的免疫效果.方法 用原核细胞表达VP1蛋白并纯化、扩增重组腺病毒rAd/VP1,扩增并提取真核表达质粒pcDNA3/VP1.BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别在股四头肌注射VP1蛋白、rAd/VP1、pcDNA3/VP1和PBS.VP1蛋白组和pcDNA3/VP1组免疫3次,间隔3周;rAd/VP1组免疫2次,间隔2周.VP1蛋白、pcDNA3/VP1和rAd/VP1每次每只注射剂量分别为50μg、100μg和1.2×107PFU.用ELISA法和微量中和试验法检测各次免疫后血清CVB3特异性IgG抗体和中和抗体滴度;末次免疫后3周,CCK-8法检测脾脏淋巴细胞的CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察动物的存活情况.结果 VP1蛋白组血清特异性IgG抗体和中和抗体滴度明显高于其他实验组（P＜0.05）,而脾脏淋巴细胞CTL杀伤活性低于rAd/VP1组（P＜0.05）;致死量病毒攻击后,VP1蛋白组血中病毒滴度低于pcDNA3/VP1和rAd/VP1组（P＜0.05）,生存率明显高于这两组（P＜0.05）.结论 VP1蛋白疫苗能诱导较高水平的体液免疫应答,对动物有明显的免疫保护作用,免疫效果优于质粒pcDNA3/VP1和重组腺病毒rAd/VP1.
- 蓝佳明高志云李嘉金玉怀温婵李伟闫立景刘贵霞谢立新王永祥
- 关键词：柯萨奇病毒B3腺病毒载体疫苗蛋白疫苗
- CVB3腺病毒载体疫苗Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果被引量：6
- 2009年
- 目的构建重组腺病毒Ad／MDC—VP1，观察Ad／MDC-VPl与DNA疫苗联合应用的免疫效果。方法构建、包装重组腺病毒Ad／MDC—VP1并检测目的蛋白的表达。BALB／c小鼠随机分为Ad／MDC—VPl、pcDNA3／MDC—VP1、pcDNA3／MDC-VP1＋Ad／MDC—VP1和PBS4组，肌肉注射免疫小鼠。用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3（CVB3）VP1 IgG和中和抗体滴度；CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性；用致死量CVB3攻击小鼠后，检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率。结果成功构建并包装了重组腺病毒Ad／MDC-VPI，检测到目的蛋白的表达。pcDNA3／MDC．VP1＋Ad／MDC—VP1组血清CVB3VP1IgG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤酒生和对小鼠的保护率明显高于其他各组（P〈0．05），血清病毒滴度低于其他各组（P〈0．05）。结论Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答。
- 闫立景李剑温婵李嘉蓝佳明揣侠高志云张永红金玉怀王永祥
- 关键词：柯萨奇病毒B3腺病毒载体疫苗DNA疫苗
- CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1的构建及免疫效果研究被引量：4
- 2009年
- 目的:构建巨噬细胞源趋化因子(Macrophage-derived chemokine,MDC)与柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1,并观察对小鼠的免疫效果。方法:利用AdEasy-1系统构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1及腺病毒Ad,并检测融合蛋白MDC-VP1的表达。BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组18只,分别肌肉注射Ad/MDC-VP1和Ad,免疫2次,间隔2周。分别用ELISA法和微量中和试验法检测血清CVB3VP1特异性IgG抗体和中和抗体;末次免疫后3周,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击后检测小鼠血中病毒滴度并观察保护率。结果:Ad/MDC-VP1和Ad构建成功,并检测到MDC-VP1融合蛋白的表达。Ad/MDC-VP1组血清CVB3特异性VP1IgG、中和抗体水平、特异性CTL活性较对照组明显增强(P<0.01);病毒攻击后实验组血中病毒滴度明显降低,生存率明显高于对照组(P<0.01)。结论:Ad/MDC-VP1能提高小鼠细胞和体液免疫水平,增加病毒攻击后的保护率。
- 闫立景高志云蓝佳明揣侠李剑金玉怀谢立新王永祥
- 关键词：柯萨奇病毒B3腺病毒载体疫苗
