国家自然科学基金(50703016)
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- 荧光分光光度法研究酶在非水相体系中的转酯化反应活性
- 2009年
- 以4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂二唑肼为荧光底物,乙烯基羧酸酯、伯醇为转酯化反应底物,通过荧光分光光度法比较了几种能以固体聚合物为底物的商品化酶制剂在有机溶剂中催化转酯化反应的性质。该方法使用微量溶剂和底物进行反应,测定快捷,具有很高的直观性。实验所用4种酶制剂均可在异辛烷、甲苯和乙腈中催化转酯化反应,催化能力是脂肪酶LPL-3>蛋白酶Alcalase 3.0 T>蛋白酶subtilisin Carlsberg>蛋白酶bacillolysin,但有机溶剂的疏水性对转酯化反应影响较大,疏水性高的有机溶剂比较适合做酶催化转酯化反应的溶剂。和月桂酸乙烯酯相比,小分子的丙酸乙烯酯更有利于酶催化转酯化反应的进行。
- 谷家栋范雪荣王树根张颖
- 关键词：转酯化有机溶剂荧光分光光度法
- 非水相体系中枯草杆菌蛋白酶-表面活性剂离子对的形成条件
- 2009年
- 枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率的影响。采用120r/min磁力搅拌使两相混合能得到较好的酶转移率,作用时间为6h。水相初始pH值5.0有利于离子对的形成及酶蛋白的转移。水相中CaCl2的加入有利于消除两相混合过程中的乳化;但是过高的CaCl2浓度会减弱酶分子与AOT间的静电引力,不利于酶分子与AOT的结合。水相中酶浓度不变,随着有机相中AOT初始浓度的增加,酶的转移率呈现增长趋势。固定异辛烷中AOT浓度,随着水相中初始酶浓度的增加,转移至有机相中酶量先增加后减少。进入异辛烷的酶分子仍旧保持活性,能催化转酯化反应的进行,但随着反应时间的延长,酶的催化效率出现下降。
- 王树根谷家栋张颖范雪荣
- 关键词：枯草杆菌蛋白酶非水相表面活性剂
