国家科技重大专项(2008ZX08007-001)
- 作品数：7 被引量：10H指数：1
- 相关作者：丁方荣戴蕴平朱士恩李松赵志辉更多>>
- 相关机构：中国农业大学河北农业大学吉林大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- HCG对同期发情青年受体牛的可利用率和胚胎移植妊娠率的影响
- 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是一种糖蛋白激素,它通过抑制卵巢黄体消退,并产生孕酮,在妊娠的维持中发挥重要作用。分别对胚胎移植前1d,2d的同期发情受体牛,分别肌肉注射1500 U HCG,结果发现,HCG处理可明显提高受...
- 黄金明王洪王长法李建斌王泽英杨岳李荣玲仲跻峰
- 关键词：人绒毛膜促性腺激素青年牛妊娠率胚胎移植
- 文献传递
- 转基因奶牛与普通奶牛超数排卵效果的比较分析
- 2014年
- 本文对20头转基因母牛与20头普通母牛超数排卵效果进行了比较分析。在20头超排转基因奶牛中,16头有超排反应,4头无超排反应,超排成功率为80%(16/20),平均获胚/卵总数为6.15±4.43枚,可用胚数为3.94±2.62枚,未受精卵数为1.50±2.19枚,退化胚胎数为0.69±0.78枚;20头对照组普通奶牛中,17头有超排反应,3头无超排反应,超排成功率为85%(17/20),平均获胚/卵总数为8.65±5.70枚,可用胚数为4.18±3.11枚,未受精卵数为1.47±1.12枚,退化胚胎数为3.00±4.24枚。统计分析表明,转基因奶牛的获胚/卵总数、可用胚数、未受精卵数与普通奶牛均无显著差异(P>0.05),转基因奶牛的退化胚胎数显著低于普通奶牛(P<0.05)。本试验结果说明转入改变乳成分的外源基因不影响奶牛的超数排卵效果。
- 朱玉林吕小青李艳华孙凤俊杨超戴蕴平王彦平赵凤茹丁方荣薛建华
- 关键词：转基因奶牛超数排卵胚胎
- 低氧对牛体细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 本研究通过比较常氧(20%)和低氧(5%)环境下培养牛体细胞的生长效果,进而探讨低氧对牛体细胞体外增殖的影响。选用牛的3种常用核移植供体细胞(胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞、卵丘颗粒细胞)分别在常氧和低氧2种培养环境下进行连续传代培养和细胞克隆培养,并对其倍增水平和细胞克隆形成效率作比较分析。结果显示,5%的低氧环境对这3种细胞的体外增殖均有促进效果,而且各细胞的增殖水平(50.61±2.47、16.35±0.43、43.38±0.84)均显著高于常氧组(27.42±0.23、12.14±0.83、32.76±1.53,P<0.01)。以500个·皿-1(直径100mm)的细胞浓度接种培养的情况下,低氧培养的胎儿输卵管上皮细胞的克隆形成效率((53.05±4.62)%)显著高于常氧组((36.68±5.68)%)(P<0.01),而低氧组胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞获得的细胞克隆数只是略多于常氧组,差异并不显著(P>0.05)。当以1个.孔-1的细胞浓度接种于96孔板培养时,低氧组各类细胞的单细胞克隆形成效率((21.60±2.37)%、(22.29±5.42)%、(27.92±3.69)%)显著高于常氧组((12.01±1.42)%、(7.92±2.86)%、(10.49±3.07)%)(P<0.01或P<0.05)。将体外培养条件的常氧含量(20%)调减至更接近体内生理状况的低氧含量(5%)可以延长牛体细胞增殖寿命和提高单细胞克隆形成效率,对细胞生长有很好的促进作用。
- 李松丁方荣王海萍王莉莉李京郑敏王美利王超戴蕴平朱士恩
- 关键词：低氧牛体细胞体外增殖
- 有效避免干扰素反应的RNA聚合酶Ⅱ启动子驱动表达长dsRNA的RNAi载体的设计、构建及初步验证
- 目的本研究欲使RNA聚合酶Ⅱ启动子表达的RNA停在细胞核内,为将来应用组织特异性RNA聚合酶Ⅱ启动子表达长dsRNA而有效避免干扰素反应生产组织和发育阶段特异性沉默特定不利基因的家畜品种奠定基础。方法以pCDNA3.1(...
- 孙朕樊宝良
- 关键词：核酶
- 文献传递
- 人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA克隆及测序
- 2011年
- 试验利用PCR技术扩增并获得了人IL-3、GM-CSF和人溶菌酶(human lysozyme,Hly)基因组基因编码区序列,人IL-3和GM-CSF基因PCR产物与pMD19-T连接,Hly基因PCR产物同pEASY-Blunt载体连接,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,蓝白斑筛选后经PCR及酶切鉴定,选取测序正确的克隆连接到pIRESneo载体中构建相关真核表达载体,分别用这些基因的表达载体转染PK15细胞,48 h后提取转染细胞的总RNA,并采用RT-PCR方法获得了人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA,结果发现,所获得的cDNA序列同NCBI登录的序列完全同源。
- 孙英民孙朕樊宝良
- 关键词：GM-CSF基因CDNA克隆测序
- 乳腺特异表达载体缺失片段的鉴定与修复
- 2010年
- 通过对pBC1中的乳腺特异表达启动子成分进行分析,鉴定了位于β酪蛋白启动子上游两个EcoRⅠ位点(-89^-94和-120^-125)之间的缺失片段,31bp的缺失使得该载体中的一个乳控盒元件(-112^-141)和一个乳腺因子识别序列(-92^-102)遭到破坏,并使得位于TATA框上游的所有启动子成分发生了位置改变。通过与山羊β酪蛋白启动子序列进行比较,设计并合成了缺失片段,经一系列的酶切和连接处理,使得该缺失得到了修复,修复后的载体具有所有乳蛋白表达需要的启动子调控原件。本试验结果为利用修复后的乳腺特异高效表达载体进行乳腺生物反应器的研究奠定了分子生物学基础。
- 房希碧刘晶刘一诺卢春燕赵志辉
- 关键词：启动子
- 草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状关联性分析被引量：1
- 2012年
- 为研究草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状相关性,采用PCR-RFLP方法检测κ-酪蛋白基因外显子5的遗传多态性。结果检测到TT、TC和CC三种基因型,统计分析表明,此多态位点与草原红牛乳蛋白和乳糖呈显著相关,乳蛋白:CC基因型极显著高于CT基因型和TT基因型(P<0.01),而CT基因型也极显著高于TT基因型(P<0.01)。乳糖:TT基因型和TC基因型极显著高于CC基因型(P<0.01),而TT和TC基因型之间差异不显著(P>0.01)。其他泌乳性状的基因型间差异不显著(P>0.01)。结果表明,κ-CN基因对草原红牛乳蛋白和乳糖具有较大的遗传效应,可初步推断κ-CN是控制这一性状的众多基因之一,是影响草原红牛乳蛋白和乳糖的一个主效基因或与主效基因相连锁,可作为选育草原红牛高乳蛋白及低乳糖奶牛的分子标记,用于标记辅助选择意义重大。
- 申瑞雪郭将马倩赵衍铜李传民邱峥艳高妍张国梁赵志辉张永宏
- 关键词：草原红牛Κ-酪蛋白基因PCR-RFLP泌乳性状
