广州市科技计划项目(200523-E0381)
- 作品数：11 被引量：30H指数：3
- 相关作者：李雯夏金堂伍兆锋汪谦赵杰更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院中山大学附属第一医院中山大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞肝癌中环氧合酶-2与半胱氨酸蛋白酶-3的表达及意义被引量：2
- 2008年
- 目的探讨环氧合酶-2(Cox-2)与半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达和在HCC发生、发展中的作用及其关系。方法应用组织芯片技术和免疫组化SP法检测112例HCC组织、72例癌旁组织和30例正常肝组织中Cox-2和Caspase-3的表达。结果Cox-2在HCC组织(73.2%)和癌旁组织(65.3%)中的表达阳性率高于正常肝组织(20.0%),差异有统计学意义(P<0.01),与HCC组织分级有关(P<0.05)。Caspase-3在HCC组织中的表达阳性率(35.7%)低于癌旁组织(77.8%)和正常肝组织(80.0%),差异均具有统计学意义(P<0.01)。Caspase-3表达与HCC的组织分级和HBsAg表达显著相关(P<0.01,P<0.05)。在112例HCC组织中Cox-2表达与Caspase-3表达呈负相关(r=-0.391,P<0.001)。结论HCC组织中Cox-2的高表达与Caspase-3的低表达在HCC的发生、发展过程中均可能起重要作用。乙型肝炎感染与Caspase-3的低表达的相关性及其可能机制有待进一步探讨。
- 陈连周夏金堂李雯赵杰陈锡林汪谦
- 关键词：前列腺素内过氧化物合酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶芯片分析技术
- RNA干扰对肝癌细胞巨噬细胞移动抑制因子基因表达的抑制作用被引量：3
- 2008年
- 目的观察特异性小干扰RNA（siRNA）对肝癌细胞巨噬细胞移动抑制因子（MIF）基因表达的抑制作用。方法脂质体方法将siRNA转染肝癌细胞PLC、Hep3B。定量RT-PCR、Western blot检测MIF mRNA和蛋白、MAPK信号分子的表达。噻唑蓝（MTT）比色法、体外细胞侵袭实验检测细胞增殖和对重组基底膜（matrigel）穿透能力。结果100nmol／L的MIF siRNA使MIF mRNA表达下调81．3％和89．1％，蛋白水平降低69．50％、72．31％，与对照组比较其差异有统计学意义（P均〈0．01）。细胞增殖率下降16．79％和47．14％（P均〈0．05）。穿透matrigel的细胞数为51．00±11．27和18．56±4．72，与对照组比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。磷酸化MAPK下调。结论MIF siRNA有效抑制MIF表达及肝癌细胞增殖和迁移，可能部分通过抑制MAPK磷酸化起作用。
- 李雯夏金堂汪谦伍兆锋毕熲傅新晖
- 关键词：小干扰RNA基因表达
- 宫颈鳞状细胞癌巨噬细胞移动抑制因子血管内皮生长因子和p16蛋白表达与临床病理的关系被引量：16
- 2008年
- 目的研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、血管内皮生长因子（VEGF）和p16蛋白的表达，探讨其与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法及Westernblot，检测10例正常宫颈组织、18例宫颈上皮内瘤变（CIN）、31例宫颈鳞癌石蜡标本的组织芯片以及3例正常宫颈上皮、3例CIN（Ⅲ级）、6例宫颈鳞癌（Ⅰb、Ⅱb各3例）新鲜标本中MIF、p16和VEGF的表达情况。结果正常宫颈、CIN和宫颈鳞癌中，MIF表达率分别为0、72．2％和93．5％，p16蛋白表达率分别为20．0％、33．3％和71．0％，VEGF表达率分别为10．0％、44．4％和74．2％。MIF、p16蛋白和VEGF在宫颈鳞癌组的表达率及表达量均显著高于CIN组，差异有统计学意义。MIF在低分化宫颈鳞癌组（17例）中的表达率高于中、高分化组（14例，P=0．021），但与临床分期无关。VEGF在低分化、进展期鳞癌（17例）的表达率分别高于中、高分化和早期鳞癌组（14例；P=0．004，P=0．008）。p16蛋白表达与癌组织分化程度、临床分期均无关。Westernblot结果显示，宫颈鳞癌组织中，MIF、VEGF和p16蛋白表达水平均明显高于CIN和正常宫颈组织的表达。结论MIF、VEGF和p16蛋白过表达在CIN向宫颈鳞癌发生过程中均起作用，MIF高表达与癌组织分化程度有关，VEGF高表达与癌组织分化程度和临床分期均相关。
- 李雯何勉曾建芳夏金堂陈连周程杨刘军秀
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子血管内皮生长因子P16蛋白宫颈肿瘤
- 巨噬细胞移动抑制因子致肝癌作用的分子机制
- 2008年
- 许多研究表明巨噬细胞移动抑制因子（MIF）在肿瘤细胞中过度表达，通过多种方式及途径参与肿瘤的形成过程及进展。MIF复杂的分子作用机制至今尚未完全阐明，近年来有关MIF参与消化系肿瘤特别是肝癌的发生、发展的研究逐渐增多。
- 伍兆锋夏金堂李雯
- 关键词：巨噬细胞游走抑制因子肝肿瘤分子作用机制
- 巨噬细胞移动抑制因子和细胞周期蛋白D1的表达与胰腺肿瘤临床病理特征的关系及意义
- 2009年
- 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期蛋白D1（cyclinD1）的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系及意义。方法免疫组化方法检测胰腺肿瘤和正常胰腺组织中MIF和CyclinD1的表达，分析其表达与胰腺肿瘤临床病理特征的关系。结果89例胰腺癌组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为88．8％和50．6％。临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病例中MIF表达率分别为69．2％、94．7％、96．4％、100％，Ⅰ期与各期之间表达率的差异均有统计学意义（P〈0．05）；CyclinD1表达率分别为30．8％、47．4％、33．3％、68．8％。Ⅰ期表达率与Ⅲ、Ⅳ期之间的差异均有统计学意义（P〈0．05），与Ⅱ期之间差异无统计学意义。MIF表达与CyclinD1表达呈正相关（P〈0．05）。伴淋巴结转移病例中MIF和CyclinD1阳性表达率（97．5％和62．5％）均高于无淋巴结转移的胰腺肿瘤组织（81．6％和40．8％），差异均有统计学意义（P〈0．05）。发生肝转移的胰腺肿瘤组织中MIF表达率高于无肝转移组织（100％：85．9％，P〉0．05），CyclinD1表达率显著高于无肝转移组织（66．7％：46．5％，P〈0．05）。高、中、低分化组胰腺肿瘤组织中MIF和CyclinD1阳性表达率分别为61．9％、73．8％、96．2％和28．6％、45．2％、76．9％，3组之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MIF和CyclinD1过表达与胰腺肿瘤的临床分期、淋巴结和肝转移及组织分化密切相关。
- 赵杰夏金堂李雯张珑涓王花伍兆锋滕元徐晨
- 关键词：胰腺肿瘤巨噬细胞游走抑制因子细胞周期蛋白D1肿瘤转移
- 超声微泡造影剂增强TRAIL基因转染肝癌细胞的实验研究
- 2008年
- 目的 探讨采用超声辐照联合微泡造影剂增强重组表达质粒pIRES—EGFP—sTRAIL转染肝癌细胞的有效性。方法 构建携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（TRAIL）基因及绿色荧光蛋白（GFP）的真核表达质粒pIRES—EGFP—sTRAIL，转染肝癌细胞HepG2，分为超声辐照联合微泡造影剂转染组、脂质体转染组、单纯微泡造影剂转染组及对照组。荧光显微镜检测GFP以评价转染效率，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测细胞生长抑制率，Hoechst33258荧光染色观察细胞形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，Westernblot检测TRAIL凋亡途径中关键凋亡分子caspase-8和caspase-3的蛋白变化。结果 超声辐照联合微泡造影剂可增强pIRES—EGFP—sTRAIL有效转染HepG2细胞，其转染效率与脂质体转染组、单纯微泡造影剂组及对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；携带sTRAIL基因的表达质粒能够激活caspase通路，促进肝癌细胞凋亡，有效抑制肝癌细胞生长。结论 构建的真核表达载体pIRES-EGFP—sTRAIL在肝癌细胞中能有效表达，联合超声微泡造影剂及低强度超声，可显著增强sTRAIL对肝癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。
- 夏金堂蔡文松徐波伍兆锋翁杰锋李雯
- 关键词：微气泡造影剂肿瘤坏死因子类
- 巨噬细胞移动抑制因子小干扰RNA对肝癌细胞表达血管内皮生长因子的抑制效应
- 2009年
- 目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）小干扰RNA（siRNA）对肝癌细胞表达血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法Western blot检测MIF和VEGF在肝癌和癌旁组织的表达情况；人工化学合成MIFsiRNA和对照siRNA，将其转染PLC、HepG2肝癌细胞株，定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot检测MIF和VEGFmRNA及其蛋白的表达。结果MIF、VEGFmRNA和蛋白在肝癌组织中高表达。MIFsiRNA（50、100nmol／L）转染肝癌细胞株后，PLC细胞MIF和VEGFmRNA水平分别下调（78．8±7．2）％、（90．4±2．9）％和（60．6±2．6）％、（79．8±1．2）％；HepG2细胞MIF和VEGFmRNA水平分别下调（74．3±8．9）％、（88．4±4．6）％和（65．6±4．6）％、（80．7±2．2）％。MIF蛋白分别下调（57．3±3．4）％、（78．7±1．2）％和（54．8±6．8）％、（77．9±2．3）％，并呈剂量依赖关系；伴随MIFmRNA和蛋白的表达下调VEGF蛋白分别下调（52．6±12．9）％、（87．4±2．3）％和（52．4±11．1）％、（68．5±2．8）％，亦呈剂量依赖关系，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），两干预组间的差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论MIFsiRNA能特异性阻断PLC及HepG2细胞MIFmRNA和MIF蛋白的表达，并且同时有效下调VEGFmRNA及其蛋白的表达，MIF可能通过调控VEGF基因和蛋白的表达，参与肿瘤血管的生成和促进肿瘤细胞的转移。
- 夏金堂李瑜元汪谦伍兆锋赵杰王花李雯
- 关键词：肝癌细胞巨噬细胞移动抑制因子RNA干扰血管内皮生长因子
- VEGF—C及VEGFR-3在肝细胞癌中的表达
- 2008年
- 目的探讨VEGF—C、VEGFR-3、微血管密度（MVD）、微淋巴管密度（LVD）及肝细胞癌临床病理特征之间的关系。方法取肝细胞癌组织标本60例，正常肝组织标本20例。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法分析其中VEGF—C及VEGFR-3mRNA的表达，以免疫组织化学法检测肝癌MVD及LVD，并分析四者与肝癌临床病理特点之间的关系。结果肝癌组织VEGF—C、VEGFR-3mRNA表达、MVD及LVD高于正常肝组织（P〈0．01）；肝癌组织中，VEGF—C与VEGFR-3表达、MVD及LVD均呈正相关（P〈0．01），VEGF—C及VEGFR-3表达与肝癌肝内转移、门静脉癌栓形成及淋巴转移相关（P〈0．01），MVD与肝癌肝内转移、门静脉癌栓形成相关（P〈0．01），LVD与淋巴转移相关（P〈0．01）。结论肝细胞癌组织中VEGF—C及VEGFR-3表达增多，可能通过参与血管、淋巴管生成促进肿瘤的侵袭、转移。
- 夏金堂蔡文松徐波伍兆锋李雯
- 关键词：血管内皮生长因子-C血管内皮生长因子受体-3
- 小干扰RNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞p27表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期调控因子p27在肝细胞癌中表达的相互关系，探讨小干扰RNA（siRNA）沉默MIF基因对肝癌细胞p27表达的影响。方法免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测MIF、p27的蛋白和mRNA在肝癌及其癌旁组织中的表达情况。化学合成MIF siRNA和对照siRNA，脂质体法转染肝癌细胞PLC和Hep3B，荧光定量PCR法检测MIF和p27 mRNA在实验组及对照组中的表达情况。根据不同资料分别采用x。检验、Logistic回归分析或单因素方差分析。结果MIF蛋白及其mRNA在肝癌组织中过表达，在癌旁组织中低表达；p27蛋白及其mRNA在癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达。Logistic回归分析提示MIF为肝癌发生的危险因素，p27为保护因素。MIF mRNA在肝癌细胞株中过表达（F=61．036，P〈0．01），p27 mRNA在正常肝细胞L02中高表达（F=529．853，P〈0．01）。经MIFsiRNA转染后，MIF mRNA在PLC及Hep3B中的表达水平降低，并且呈剂量依赖关系（F值分别为320．1和201．2，尸值均〈0．01）；p27 mRNA伴随MIFmRNA的降低而增加（F值分别为419．4和459．9，P值均〈0．01）。结论MIF在肝细胞癌中过表达，MIF siRNA能特异性抑制其在肝癌细胞中的表达；MIF可能参与了p27基因表达的调控。
- 夏金堂李雯伍兆锋赵杰王花李瑜元
- 关键词：周期素依赖激酶抑制剂P27巨噬细胞移动抑制因子
- 巨噬细胞移动抑制因子在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其临床意义被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨膀胱尿路上皮癌组织中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色方法,研究110例膀胱尿路上皮癌和10例正常膀胱黏膜组织中MIF的表达,并分析其与临床病理特征及预后的关系.结果 MIF在正常膀胱黏膜组织中无或弱表达.110例膀胱尿路上皮癌组织肿瘤细胞浆内MIF阳性表达率为65.5%（72/110）,其中27例（24.5%）在细胞核中也有表达.非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌中MIF表达水平高于肌层浸润性膀胱尿路上皮癌（P=0.001）.肿瘤细胞核内MIF表达与肿瘤病理分级（P=0.034）、临床病理分期（P=0.028）和肿瘤大小（P=0.002）均呈负相关.细胞核内MIF表达水平与患者无瘤生存明显相关（P=0.042）,MIF阳性组患者有较长的无瘤生存时间.结论 非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌中MIF表达水平高于肌层浸润性膀胱尿路上皮癌,细胞核内MIF表达可能预示膀胱尿路上皮癌患者预后良好.
- 郭永顺戴宇平李雯刘鲁东
- 关键词：膀胱肿瘤巨噬细胞移动抑制因子基因表达预后
