国家自然科学基金(81071812)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
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- 相关机构：重庆市肿瘤研究所重庆医科大学更多>>
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- 卵巢癌紫杉醇耐药细胞耐药性和髓样分化因子88关系的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究卵巢癌亲本A2780细胞与卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol生物学特性及与髓样分化因子(Myeloid dif-ferentiation factor 88,MyD88)的关系。方法:应用CCK-8法检测A2780细胞和A2780/Taxol细胞的耐药性和耐药指数,采用流式细胞法检测A2780和A2780/Taxol细胞的细胞周期。应用罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)排出实验测定P-糖蛋白(P-gly-coprotein,P-gp)表达。应用Western blot检测A2780和A2780/Taxol细胞中P-gp的表达情况。应用细胞免疫化学检测A2780和A2780/Taxol细胞中MyD88、P-gp的表达情况。结果:A2780与A2780/Taxol相比,A2780/Taxol生长缓慢,呈G1期阻滞;CCK-8结果显示A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50为(36.81±2.05)μg/ml,A2780细胞对紫杉醇的IC50为(1.40±0.18)μg/ml;两者的耐药指数(Resistance index,RI)为26.35。Rh123排出实验显示A2780/Taxol平均荧光强度显著降低。Western blot检测发现A2780/Taxol的P-gp表达比A2780明显升高(P<0.05)。细胞免疫化学检测发现A2780/Taxol中的P-gp和MyD88表达明显高于A2780细胞。结论:A2780/Taxol细胞株具有明确的耐药性,紫杉醇耐药与MyD88的表达密切相关,该细胞株可用于卵巢癌紫杉醇耐药的基础研究。
- 袁犁周琦徐发良李少林邹冬玲
- 关键词：紫杉醇耐药卵巢癌P-糖蛋白髓样分化因子88
- 髓样分化因子88与人卵巢癌紫杉醇耐药细胞系A2780/Taxol耐药性相关
- 2013年
- 目的本研究希望通过外源改变MyD88的表达,明确其与紫杉醇耐药的相关性,检测MyD88对细胞生物学活性的影响。方法通过在A2780/Taxol细胞中敲低和过表达MyD88后,利用real-time PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测MyD88的表达变化;CCK-8法检测细胞转染前后对紫杉醇耐药性的变化,流式技术检测MyD88对细胞周期和凋亡的影响。结果敲低MyD88表达水平,耐药细胞系A2780/Taxol对紫杉醇的耐药性明显降低(P<0.01),抗凋亡能力减弱(P<0.01);过表达MyD88后,细胞对紫杉醇耐药性增加(P<0.05)。结论抑制卵巢癌细胞中MyD88的表达,能促进耐药细胞系对紫杉醇的敏感性,为临床卵巢癌耐药患者以MyD88为靶向的基因治疗提供了新思路和手段。
- 邹冬玲李少林袁梨周琦
- 关键词：卵巢癌紫杉醇耐药MYD88
- PI3K特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株逆转作用的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:研究磷脂酰肌醇-3-激酶(P13K)特异性抑制剂LY294002对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株(A2780/Taxo1)多药耐药逆转的影响。方法:将P13K特异性抑制剂LY294002处理卵巢癌紫杉醇耐药细胞24 h后,用CCK-8(Cell CountingKit-8)法检测细胞的增殖速度、对紫杉醇敏感性的分析;采用流式细胞技术检测细胞周期和凋亡。应用Western blot检测细胞中P-glycoprotein(P-gP)、Akt和p-Akt蛋白的表达情况。结果:用LY294002处理A2780/Taxol细胞后细胞增殖速度变慢、对紫杉醇的半数抑制浓度(IC_(50))降低。实验组和对照组细胞的凋亡率分别是(2.64±0.90)%和(10.98±1.16)%(P<0.05)。LY294002处理后的Go/G,期细胞增加,S期明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。LY294002处理后的细胞与对照组相比P-gP和p-Akt的蛋白表达降低。结论:LY294002能够有效的逆转卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol产生的多药耐药。
- 袁犁周琦徐发良李少林甘霖邹冬玲
- 关键词：LY294002P-GLYCOPROTEIN卵巢癌紫杉醇
- 髓样分化因子促进卵巢癌细胞耐药性的机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)参与调节卵巢癌细胞耐药性的具体机制。方法在卵巢癌耐药细胞株A2780/Taxol中采用特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)抑制MyD88的表达,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况以及细胞在紫杉醇处理后的存活情况。Western blot检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)以及多药耐药蛋白(multidrug resistance 1,MDR1)的表达情况。进一步在A2780/Taxol细胞中通过LY294002抑制PKB/Akt信号通路,通过小干扰RNA抑制MDR1的表达,CCK-8试剂盒检测细胞在紫杉醇处理后的存活情况。结果在A2780/Taxol细胞株中抑制MyD88的表达,细胞的增殖速度明显低于对照组(P<0.05)。A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性也明显降低,半数抑制浓度(IC50)降低至对照组的50%(P<0.01),且p-Akt、XIAP和MDR1在药物刺激下的升高也被明显抑制。同时抑制p-Akt通路的活性或抑制MDR1的表达后A2780/Taxol细胞的耐药性也出现明显下降,IC50分别降低至对照组的80%和50%,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MyD88蛋白通过调节PKB/Akt信号通路、XIAP抗凋亡蛋白以及MDR1的表达参与卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性。通过抑制MyD88可望改善卵巢癌治疗中的耐药现状。
- 邹冬玲王冬徐发良周琦
- 关键词：卵巢癌蛋白激酶B多药耐药蛋白
