河南省教育厅自然科学基金(2011B180060)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李成伟张怡陆亚杰高丹罗祥更多>>
- 相关机构：周口师范学院周口市农业科学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金转基因生物新品种培育专项博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大豆胞囊线虫VIGS载体的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 拟克隆大豆胞囊线虫肌钙蛋白(Hg-tnc)和酰胺样多肽(Hg-flp)基因的部分片段,构建胞囊线虫的病毒诱导基因沉默体系(VIGS),以期为大豆抗胞囊线虫抗性品种的培育及胞囊线虫基因功能验证的研究奠定理论基础。利用RT-PCR方法从大豆胞囊线虫中克隆出目的基因,电泳检测表明,克隆的Hg-tnc基因和Hg-flp基因部分片段分别约为1 000 bp和700 bp。将目的基因连接到烟草脆裂病毒载体pYY13上,转化大肠杆菌,利用PCR进行初步鉴定后进行序列测定。结果表明,大豆胞囊线虫Hg-tnc基因和Hg-flp基因已插入到pYY13载体上,VIGS载体构建成功。
- 张怡阮九霄马晓萌傅露露乔月娥段素娟孟娉李成伟
- 关键词：胞囊线虫肌钙蛋白烟草脆裂病毒
- 大豆整体子叶节再生体系的建立及应用于农杆菌介导遗传转化初探被引量：3
- 2012年
- 以中黄20、周豆02005、周豆11和周豆18整体子叶节为材料,以MSB为基本培养基,通过L9(34)正交设计研究了6-BA、IBA和KT 9种浓度组合对大豆整体子叶节丛生芽再生的影响;并将大豆的整体子叶节应用于农杆菌介导的遗传转化研究。结果表明:9种激素组合中以MSB+3.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1IBA+0.5 mg.L-1KT最适合周豆02005丛生芽的诱导,而MSB+3.5 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1IBA+0.2 mg.L-1KT最适宜周豆11、周豆18和中黄20的丛生芽诱导;4个大豆基因型中,以中黄20的丛生芽数最多;丛生芽用于诱导生根时,IBA为0.8 mg.L-1、NAA为0.8～1.0 mg.L-1时较适合大豆生根,其中以中黄20生根数最多。以中黄20整体子叶节为材料,进行了农杆菌介导的遗传转化研究。PCR分析和GUS染色初步表明,外源基因转入了大豆的基因组中,转化率为7.8%,得到转基因植株的周期为35～42 d。
- 张福丽舒文涛张怡高丹张丽陆亚杰罗祥李成伟
- 关键词：大豆农杆菌介导
