国家自然科学基金(81071414)
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
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- 游离脂肪酸下调载脂蛋白M的表达及其机制被引量：1
- 2013年
- 游离脂肪酸（FFA）是构成人体的重要成分,参与血脂代谢.研究表明,FFA水平升高可导致外周胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗的个体载脂蛋白M（ApoM）水平下降[1].本研究旨在观察FFA水平升高是否会直接下调ApoM并探讨其机制.一、材料和方法大鼠血浆FFA浓度检测、肝脏组织中mRNA的提取、逆转录、实时定量聚合酶链反应和PCR芯片（Qiagen公司）反应严格参照试剂盒说明书操作.大鼠ApoM和内参照基因β-肌动蛋白的引物和探针由上海生工生物工程有限公司合成.统计学分析参照文献[2].
- 施媛萍冯悦华牟琴峰张俊于洋张晓膺徐宁罗光华
- 关键词：载脂蛋白M游离脂肪酸实时定量聚合酶链反应Β-肌动蛋白APOM大鼠血浆
- 载脂蛋白M基因敲除小鼠模型的构建和鉴定被引量：2
- 2013年
- 人载脂蛋白M（ApoM）由Xu等[1]于1999年发现,主要存在于具有抗动脉粥样硬化作用的高密度脂蛋白（HDL）中[2].研究显示,瘦素、胰岛素、高血糖以及多种细胞因子可调节ApoM的表达[3-4],也可能与肥胖、糖尿病、肝癌、结肠癌的发生发展相关[5-6],但其作用机制尚不明确,其功能有待进一步研究.本研究旨在构建ApoM基因敲除小鼠模型并建立分型ApoM基因敲除小鼠的方法.
- 翟占强罗光华张俊冯悦华徐之静徐宁张晓膺
- 关键词：载脂蛋白M抗动脉粥样硬化作用高密度脂蛋白APOM细胞因子胰岛素
- 过表达人载脂蛋白M基因对GK大鼠胰岛素敏感性的影响
- 2014年
- 目的 探讨过表达人载脂蛋白M（ApoM）基因是否改善Goto-Kakizaki （GK）大鼠胰岛素敏感性.方法 以慢病毒（LV）为载体,构建含人ApoM基因的重组慢病毒[LV4 （GFP）-ApoM].转染293T细胞24 h后,采用聚合酶链反应（PCR）芯片分析2型糖尿病相关基因;将10只GK大鼠随机分为ApoM阴性慢病毒组和ApoM阳性慢病毒组,每组5只.尾静脉注射5＆#215;108 TU慢病毒,用实时定量PCR（Real-time PCR）法检测ApoM mRNA水平,胰岛素耐量实验评价GK大鼠胰岛素敏感性.结果 （1）相较于ApoM阴性慢病毒组,293T细胞ApoM阳性慢病毒组ApoM mRNA水平增加79.43倍（P＜0.01）;同时,与胰岛素抵抗相关的基因丝裂原活化蛋白激酶8（MAPK8）下调了2.11倍（P＜0.05）,胰岛素样生长因子2（IGF2）下调1.23倍（P＜0.05）.（2）ApoM阳性慢病毒组GK大鼠肺组织中人ApoM mRNA表达较为明显;第14天GK大鼠空腹血糖水平和对照组之间的差异无统计学意义（P＞0.05）,但胰岛素耐量实验结果显示ApoM阳性慢病毒组GK大鼠血糖浓度下降50％的时间（60 min）明显早于ApoM阴性对照组（90 min）.结论 过表达ApoM基因有可能增强2型糖尿病个体的胰岛素敏感性.
- 冯悦华牟琴峰施媛萍张俊秦莉张晓膺徐宁罗光华
- 关键词：载脂蛋白M2型糖尿病胰岛素敏感性
- 棕榈酸下调载脂蛋白M表达及其机制研究
- 2014年
- 目的明确棕榈酸对载脂蛋白M（apolipoproteinM，ApoM）表达的影响及其机制。方法用不同浓度棕榈酸处理人肝癌细胞株（HepG2细胞），采用实时定量PCR及PCR芯片分析棕榈酸对ApoM表达的影响和可能的机制。分别用棕榈酸（1mmol／L）和（或）PI-3K抑制剂LY294002（LY，10μmol／L）、蛋白激酶C抑制剂GFl09203X（GFX，2μmol／L）以及PPARβ／δ的拮抗剂GSK3787（10μmoL／L）处理HepG2细胞，实时定量PCR检测ApoM相关基因表达水平。结果0、0．25、0．5及1mmol／L棕榈酸分别作用于HepG2细胞后，ApoMmRNA表达水平显著下降，且呈剂量依赖性（P〈0．01）。人胰岛素信号通路PCR芯片检测结果显示，棕榈酸通过其中的6条信号途径影响HepG2细胞的增殖。LY对HepG2细胞ApoMmRNA表达的影响差异无统计学意义（P〉0．05），且LY不能逆转棕榈酸下调HepG2细胞ApoMmRNA的表达。GFX明显降低ApoMmRNA的表达水平（P〈0．05），但GFX不影响棕榈酸降低ApoMmRNA的效应。1mmol／L棕榈酸显著升高HepG2细胞PPARp／8mRNA水平（P〈O．001）；PPARB／8拮抗剂GSK3787对ApoMmRNA表达的影响无统计学意义（P〉0．05）；但其能够显著抑制棕榈酸降低HepG2细胞ApoM mRNA的效应（P〈0．05）。结论棕榈酸通过PPARβ／δ途径下调HepG2细胞ApoM基因表达，详细机制还需进一步研究。
- 施媛萍冯悦华牟琴峰于洋张俊张晓膺徐宁罗光华
- 关键词：载脂蛋白M棕榈酸实时定量PCR
- 油酸通过蛋白激酶C通路上调载脂蛋白M的表达被引量：2
- 2012年
- 载脂蛋白M（ApoM）是Xu等发现的1种新型载脂蛋白，属于Lipocalin蛋白超家族成员，主要存在于高密度脂蛋白（HDL）中。ApoM在调节脂质代谢，特别是在胆固醇的逆转运以及预防动脉粥样硬化方面起着重要作用。本研究旨在观察油酸通过蛋白激酶C（PKC）通路调节人肝癌细胞ApoM的表达。
- 赵鹏张晓膺罗光华施媛萍魏江于洋徐宁
- 关键词：载脂蛋白M蛋白激酶C油酸高密度脂蛋白APOM人肝癌细胞
- 高糖输注及罗格列酮干预对大鼠载脂蛋白M表达的影响
- 2014年
- 目的观察高浓度葡萄糖输注对大鼠载脂蛋白M（apoM）mRNA的表达的影响及罗格列酮干预的作用，并探讨相关机制。方法雄性SD大鼠随机分为5％葡萄糖组（对照组）、25％葡萄糖组（H组）、罗格列酮＋5％葡萄糖组（RN组）、罗格列酮＋25％葡萄糖组（RH组）4组。分两批独立的实验完成，一批应用高胰岛素．正常血糖钳夹（HEC）实验评价葡萄糖输注率（GIR），一批直接取肝脏提取总RNA，检测apoMmRNA表达水平及肝X受体途径（LXR）基因和PPAR-β/δ基因表达情况。结果葡萄糖和罗格列酮对GIR均有影响（均为P〈0．01），并且两者的交互作用差异有统计学意义（P〈0．01）。25％葡萄糖下调大鼠肝脏apoMmRNA表达（P〈0．05），而罗格列酮明显增高大鼠肝脏apoMmRNA的表达（P〈0．0001），但两者的交互作用差异无统计学意义（P〉0．05）。25％葡萄糖显著抑制大鼠肝脏LXR-β（P〈0．01）、SHP1（P〈0．01）、LRH1（P〈0．01）、ABCA1（P〈0．01）、PPAR．13／8（P〈0．01）基因的表达；而罗格列酮仅降低SHP1（P〈0．01）及ABCA1（P〈O．05）基因的表达。罗格列酮显著抑制正常大鼠肝脏ABCA1mRNA的表达（P〈0．05），但在高血糖状态下，罗格列酮则明显升高大鼠肝脏ABCA1mRNA水平（P〈0．01）。双因素方差分析表明罗格列酮和25％葡萄糖对大鼠肝脏ABCA1mRNA影响的交互作用差异有统计学意义（P〈0．01）。结论高浓度葡萄糖和罗格列酮对apoM的调节作用是相对独立的，高浓度葡萄糖有可能主要通过LRH1和（或）ABCA1途径下调apoM基因的表达。
- 张俊施媛萍冯悦华潘丽莉牟琴峰张晓膺罗光华
- 关键词：罗格列酮载脂蛋白M
- 清醒大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术的建立和应用被引量：1
- 2014年
- 目的建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹模型,并探讨短期输注脂肪乳对清醒状态下大鼠葡萄糖输注率(GIR)的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠10只,随机数字表法分为2组,每组5只。采用颈动、静脉插管技术,分别经颈静脉给予SD大鼠输注20%脂肪乳(脂肪乳组)和5%葡萄糖6 h(对照组),行高胰岛素-正血糖钳夹实验测定血浆游离脂肪酸(FFA)和GIR。结果与葡萄糖输注的对照组比较,脂肪乳组大鼠输注20%脂肪乳6 h后,血浆FFA水平升高到对照组的17.6倍(P<0.01),GIR下降了27%(P<0.001),胰岛素抵抗非常明显。结论成功建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术,给大鼠输注脂肪乳可导致明显的胰岛素抵抗。
- 冯悦华罗光华陈立新
- 关键词：高胰岛素血症脂肪酸类非酯化胰岛素抗药性脂肪酸胰岛素抵抗
- 瘦素对大鼠肝脏载脂蛋白M、载脂蛋白AI、载脂蛋白B和低密度脂蛋白受体表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察瘦素对正常SD大鼠肝脏载脂蛋白M（ApoM）、载脂蛋白AI（ApoAI）、载脂蛋白B（ApoB）和低密度脂蛋白受体（LDL—R）表达的影响。方法通过给健康SD大鼠尾静脉置管，微量注射泵持续泵入瘦素的方法建立高瘦素模型，对照组泵人生理盐水。6h后检测大鼠肝脏ApoM表达的变化，以及血清ApoM、脂蛋白的变化。通过建立离体肝灌注模型，检测肝脏ApoM mRNA的变化。结果在尾静脉实验中，瘦素组较生理盐水组血糖增加了14．68％（P〈0．01），胰岛素水平下降了68．82％（P〈0．05），大鼠肝脏ApoM、ApoB和LDL—RmRNA水平分别下降了55．15％（P〈0．05）、48．60％（P〈0．01）及40．43％（P〈0．05），而ApoAI表达增加了149．00％（P〈0．01）。但在离体肝灌注模型中，瘦素对ApoM、ApoAI、ApoB和LDL—R的表达无明显影响（P〉0．05）。结论瘦素对大鼠肝脏脂蛋白和LDL—R表达的影响可能通过其他信使介导，具体机制还需进一步研究。
- 狄冬梅张晓膺罗光华郑璐蒋波Peter Nilsson-Ehle徐宁
- 关键词：载脂蛋白M瘦素载脂蛋白B低密度脂蛋白受体
