国家自然科学基金(81273284)
- 作品数：10 被引量：38H指数：4
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- 托法替尼治疗类风湿关节炎有效性和安全性研究进展被引量：10
- 2015年
- RA因对关节及周围组织造成不可逆的破坏，过去被称为“不死的癌症”。随着生物制剂等抗风湿药物的快速发展，多数RA的患者可获得快速、有效的临床缓解。近年来，随着对RA发病机制研究的不断深入，针对Janus激酶（JAK）-转录激活因子（STAT）、Wnt和NF-κB等信号通路的新药研发进展也非常快。
- 刘兴振范洁赵东宝
- 关键词：类风湿关节炎JANUS激酶托法转录激活因子抗风湿药物
- Dishevelled 2对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的 对RA成纤维样滑膜细胞（FLS）体外分离培养方法进行优化,观察Dishevelled 2 （Dvl 2）在RA-FLS中对血管内皮生长因子（VEGF）分泌的影响.方法 将行膝关节置换的RA患者滑膜剪碎,利用优化的组织块法进行RA-FLS体外分离培养.构建Dvl 2慢病毒过表达质粒,转染后利用Q-PCR及ELISA检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.然后再将转染后RA-FLS予TNF-α重组蛋白10 ng/ml刺激24h,再次检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.采用两独立样本t检验进行统计分析.结果 成功将RA-FLS分离并进行体外培养.当感染复数为30并配合使用适当浓度的polybrene促进转染即可满足实验要求,Dvl 2的mRNA较空病毒对照组升高79倍.与空病毒对照组相比,Dvl 2对RA-FLS分泌VEGF有轻度抑制作用;TNF-α刺激后,Dvl 2达表达组VEGF的mRNA[（2.15±0.10）倍,（2.92±0.47）倍,t=-3.924,P=0.003]及蛋白[（285±100） pg/ml,（155±61） pg/ml,t=-2.714,P=0.022]均低于空病毒对照组.结论 Dvl 2可抑制TNF-α对RA-FLS分泌VEGF的促进作用,具体机制有待进一步研究.
- 刘兴振綦柯范洁徐卫东施冶青张兰玲赵东宝
- 关键词：WNT通路滑膜细胞血管内皮生长因子DISHEVELLED
- 人成骨细胞分化及骨保护素分泌:R-脊椎蛋白1通过Wnt/β-catenin通路的作用被引量：1
- 2015年
- 背景:研究表明Wnt/β-catenin信号通路活性受抑是类风湿关节炎骨侵蚀的始动因素,增强该通路有望治疗类风湿关节炎关节破坏。R-脊椎蛋白1(RSpo1)可能是Wnt激活剂,尚无人成骨细胞相关研究。目的:验证R-脊椎蛋白1抑制DKK1促进该细胞的分化成熟。方法:给予S40转染人成骨细胞株h FOB 1.19 Wnt-3a、R-脊椎蛋白1及Wnt信号通路抑制剂DKK1不同刺激,通过检测细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨保护素水平,观察R-脊椎蛋白1在成骨细胞中的作用。结果与结论:R-脊椎蛋白1对hF OB 1.19细胞增殖无影响,Wnt-3a上调碱性磷酸酶活性,与R-脊椎蛋白1共刺激可增强该作用;R-脊椎蛋白1可减少DKK1对h FOB1.19细胞碱性磷酸酶活力的抑制作用。R-脊椎蛋白1可提高骨保护素质量浓度,但R-脊椎蛋白1对骨保护素的增强作用大于DKK1对其的抑制作用。提示R-脊椎蛋白1通过抑制DKK1,参与Wnt/β-catenin信号通路,促进成骨细胞分化成熟,分泌骨保护素。
- 吴思敏刘庆梅马彦云王久存赵东宝
- 关键词：骨保护素成骨细胞骨细胞DKK1
- 巢乱蛋白2在类风湿关节炎软骨中的表达及其对软骨破坏的影响被引量：2
- 2018年
- 目的 探讨巢乱蛋白2 （DVL2）在类风湿关节炎（RA）膝关节软骨中的表达及其对软骨破坏的影响.方法 Western blot检测类风湿关节炎（RA）和骨关节炎（OA）患者及胶原诱导关节炎（CIA）大鼠和健康大鼠膝关节软骨中DVL2蛋白表达.将DVL2过表达慢病毒转染入CIA大鼠膝关节后,观察其对CIA大鼠关节软骨的影响;将DVL2过表达慢病毒转染入RA患者膝关节软骨细胞后,实时定量-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测软骨细胞中细胞因子基因的表达.结果 RA患者膝关节软骨组织中DVL2蛋白表达高于OA患者（2.04±0.76比0.97±0.37,t=2.815,P=0.044）.CIA大鼠膝关节软骨中DVL2蛋白表达高于健康大鼠（2.18±0.68比0.92±0.05,t=2.921,P=0.042）.转染DVL2过表达慢病毒后对CIA大鼠膝关节软骨的破坏无显著影响（P=0.885）.转染DVL2过表达慢病毒后,可上调RA患者膝关节软骨细胞中环氧合酶2（COX-2）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-9mRNA表达,当加入肿瘤坏死因子α（TNFα）刺激后,COX-2、iNOS、MMP-2、MMP-3、MMP-9mRNA表达更为明显.结论 DVL2在RA患者关节软骨中处于高表达,并通过激活Wnt/β-catenin通路促进软骨细胞破坏相关基因表达,从而参与RA关节软骨的破坏.
- 刘兴振高颖綦柯赵东宝
- 关键词：类风湿WNT信号通路软骨细胞
- 抗磷脂综合征患者脑脊液单纯疱疹1型病毒和巨细胞病毒抗体阳性病例分析
- 2015年
- 目的:报道4例与抗磷脂综合征(APS)患者脑脊液有关病毒抗体的阳性结果。方法:检测4例确诊APS患者脑脊液中单纯疱疹1型病毒(HSV-1)和巨细胞病毒(CMV)抗体,结合临床及影像学资料,分析其与APS发病的关系。结果:4例患者脑脊液HSV-1-IgG、CMV-IgG均为阳性,HSV-1-IgM、CMV-IgM均为阴性;例1、例2血清HSV-1-IgG、CMV-IgG阳性,例3、例4阴性;例1、2、3抗心磷脂抗体(aCL)血清水平>12RU/ml;例4检出抗β2糖蛋白1(β2GP1)抗体。结论:初步提示HSV-1和CMV感染与APS可能存在相关性。
- 夏婷朱琴张菊高洁赵东宝
- 关键词：脑脊液
- 类风湿关节炎合并2型糖尿病患者代谢特点分析被引量：5
- 2016年
- 目的通过对比分析RA合并2型糖尿病患者的临床资料，探讨这类患者代谢方面的特点，为心血管危险因素的管理提供更多的理论依据。方法将104例RA合并2型糖尿病患者作为研究对象，另选择年龄、性别相匹配的100名健康体检者作为对照组。对比2组代谢指标并总结分析研究组代谢异常的比例。统计学方法采用t检验和x2检验。结果RA与2型糖尿病的平均病程分别为（8±6）年、（10±5）年；55．8％（58／104）的患者CRP〉10mg／L，72．1％（75／104）的患者ESR〉30mm／1h；RF阳性率为76％。RA组BMI（23．3±3．1）kg／m2，对照组（23．4±2．8）kg／m2，2组BMI差异无统计学意义（P=0．991）；RA合并2型糖尿病组的收缩压、舒张压均显著高于对照组（P〈0．01）；RA组血尿酸（0．27±0．11）mmol／L，对照组（0．27±0．12）mmol／L，2组血尿酸差异无统计学意义（P=0．957）；脂代谢方面，除2组TC差异无统计学意义外[RA组（4．6±1．0）mmol／L，对照组（4．5±0．5）mmol／L，P=0．547]，TG[RA组（1．4±0．8）mmol／L，对照组（1．1±0．3）mmol／L]、HDL—C[RA组（1．1±0．3）mmol／L，对照组（1．5±0．4）mmol／L]、LDL-C[RA组（2．6±0．8）mmol／L，对照组（2．4±0．4）mmol/L]，差异均有统计学意义（t=2．871，P=0．005；t=-7．064，P〈0．01；t=2．003，P=0．047）。高血压比例为36．5％（38／104），糖化血红蛋白（HbA1C）≥7％的比例为45．1％（14／31）；TC升高的比例为17．3％（18／104），TG升高的比例为30．7％（32／104），HDL-C降低比例为26．9％（28／104），LDL-C升高的比例为27．8％（29／104）。结论高血压发生率较高，血糖控制欠佳，高发的脂代谢紊乱是RA合并2型糖尿病患者的突出代谢特点。临床医生特别是风湿科医生需要对上述几个方面给予足够的重视。
- 刘兴振范洁赵东宝
- 关键词：关节炎类风湿2型糖尿病代谢紊乱
- 类风湿性关节炎患者血清中MMP家族的表达及其临床价值被引量：4
- 2014年
- 目的:研究类风湿性关节炎(RA)患者血清中基质金属蛋白酶(MMP)家族的表达情况及其临床价值。方法:将我院收治的类风湿性关节炎患者纳入观察组,同期在我院体检的健康者纳入对照组,采集两组受试者的外周血检测MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9的mRNA含量和蛋白含量,并对RA患者的关节压痛指数、关节肿胀指数、功能指数、疾病活动性评分进行评价。结果:观察组血清中MMP-2、MMP-3的mRNA含量和蛋白含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-1、MMP-9的mRNA含量和蛋白含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);血清MMP-2、MMP-3蛋白含量与RA患者的关节压痛指数、关节肿胀指数、功能指数、疾病活动性评分呈正相关。结论:类风湿性关节炎患者血清中MMP-2、MMP-3呈高表达,且与主观指标具有良好的相关性,是判断RA患者病情理想的客观指标。
- 刘虹宏赵东宝
- 关键词：细胞外基质自身免疫性疾病
- 骨关节炎与骨质疏松症关系的再认识被引量：1
- 2014年
- 骨关节炎（osteoarthritis,OA）是一种极其常见的慢性关节疾病。该病以软骨改变为主要特征,进而造成软骨下骨坏死、囊性变、骨密度增加和伴发骨赘形成的一种非特异性炎症,其发生主要与衰老、肥胖、炎症、创伤、关节过度使用、代谢障碍及遗传等因素有关。我国学者的流行病学调查结果显示,OA在中老年人中具有较高的发病率,北京地区老年女性有症状的OA患病率甚至达到15.4%。
- 赵东宝高颖贺玲玲
- 关键词：骨关节炎骨质疏松症骨密度脆性骨折
- R脊椎蛋白1协同Wnt3A通过Wnt／β-联蛋白信号通路促进成骨细胞分化被引量：4
- 2016年
- 目的探究R脊椎蛋白1（RSPO1）在成骨分化中的作用及机制。方法利用xCELLigence系统研究RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力的影响。通过磷酸酶检测试剂盒检测ALP活性，ELISA法检测护骨因子的表达，通过双荧光素酶报告基因检测系统，利用TOPflash T细胞因子（TCF）报告质粒检测Wnt/β-联蛋白（β-catenin）信号通路活性。利用蛋白印迹法检测β-catenin蛋白累积情况。采用t检验进行统计学分析。结果RSPO1对C2C12细胞增殖及细胞活力无影响。RSPO1单独处理上调ALP活力（2.85±0.08和1.74±0.21，t=3.014，P〈0.05）及护骨因子表达能力（1.29±0.13和1.0±0.21，t=3.348，P〈0.05）较弱，而RSPO1及Wnt3A协同处理可显著增强ALP活力（81.37±5.08和1.74±0.21，t=31.31，P〈0.01）并上调护骨因子表达（5.26±0.60和1.00±0.21，t=6.99，P〈0.01）。RSPO1协同Wnt3A激活TCF活性并诱导β-catenin蛋白积累（3.28±0.18和1.00±0.21，t=10.94，P〈0.05）。但是，单独RSPO1对TCF的活性及β-catenin积累无影响（1.25±0.08和1.0±0.21，t=2.225，P〉0.05）。结论RSPO1可协同Wnt3A激活Wnt/β-catenin信号通路，诱导细胞成骨分化，提示RSPO1有望应用于RA的治疗。
- 彭杨茜子刘庆梅马彦云贺玲玲赵东宝
- 关键词：成骨细胞WNT信号通路
- 巢乱蛋白2及JAK-STAT通路对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响被引量：8
- 2018年
- 目的探讨巢乱蛋白（DVL）是否通过JAK-STAT通路来调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）的凋亡。方法将DVL2过表达慢病毒转染入RA-FLS后通过流式细胞仪检测细胞的凋亡率；通过RNA-seq检测DVL2对RA-FLS信号通路的影响，并利用RT-PCR对通路上的重点基因和下游的抗凋亡基因进行验证。结果与空载慢病毒对照组（Control）相比，DVL2可以明显增加MH7A细胞的凋亡率（3.2%±2.2%及25.7%±4.5%）。RNA-seq结果显示，DVL2可以下调JAK-STAT通路中的相关基因，利用RT-PCR进一步验证发现DVL2可以抑制JAK2、Stat1和Stat2基因的表达，加入肿瘤坏死因子（TNF）-α刺激后DVL2可以明显抑制JAK2和Stat2基因的表达但对Stat1的抑制作用不明显；DVL2可以抑制Bcl-xL基因的表达，加入TNF-α刺激后对Bcl-2和Bcl-xL均有明显抑制作用。结论DVL2可以抑制JAK-STAT通路及其下游的抗凋亡基因的表达促进RA-FLS的凋亡。
- 刘兴振高颖祝春华綦柯徐霞赵东宝
- 关键词：类风湿关节炎DISHEVELLED成纤维样滑膜细胞凋亡JAK-STAT通路
