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电磁辐射对N9小胶质细胞STAT3核转位以及磷酸化水平的影响: 2011年; 目的研究STAT3信号分子是否参与电磁辐射诱导的小胶质细胞活化。方法Western-blot检测小胶质细胞STAT3蛋白质表达及磷酸化表达变化，凝胶迁移率实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）检测小胶质细胞STAT3的DNA结合活性的变化。结果电磁辐射后小胶质细胞STAT3磷酸化增强，STAT3核转位与DNA结合活性在辐照后6-24h增加，并以12h最为明显。结论STAT3信号分子参与了电磁辐射诱导的小胶质细胞活化过程。; 郝玉通杨学森陈纯海张广斌余争平; 关键词：电磁辐射磷酸化

微波辐照后N9小胶质细胞活化与JAKs的差别激活: 2009年; [目的]探讨微波辐照对小胶质细胞活化的影响及JAKs(janus activated kinase)家族蛋白质差别激活。[方法]90mW/cm2微波辐照离体培养的N9小胶质细胞,在辐照前、后不同时间采用细胞流式计数的方法观察N9细胞CD11b的表达情况,采用western blot检测JAKs家族蛋白质磷酸化水平的变化。[结果]微波辐照后3h阳性表达CD11b的小胶质细胞明显增加,6h达到高峰,并一直持续到辐照后24h(P均<0.05)。JAK1蛋白磷酸化水平于辐照后3h开始明显升高(P<0.05),一直持续到24h;JAK2在辐照后1～6h逐渐升高,并在6h达最高峰(P<0.01);JAK3在辐照后6h明显升高(P<0.01),到24h后仍然高于对照水平(P<0.05)。[结论]微波辐照可明显诱导小胶质细胞活化,使小胶质细胞JAK1、JAK2、JAK3出现差别激活。JAKs家族蛋白可能参与了微波辐照诱导的小胶质细胞活化。; 郝玉通陈纯海杨学森张广斌余争平; 关键词：微波小胶质细胞 JAKS 活化

电磁辐射后小胶质细胞活化状态和分泌功能的变化被引量：2: 2007年; 目的:一定量的电磁辐射可引起中枢神经系统神经元的损伤,但其对小胶质细胞的影响尚不清楚。实验观察电磁辐射对小胶质细胞活化状态以及分泌功能的影响,揭示电磁辐射对小胶质细胞及中枢神经损伤的效应关系。方法:实验于2006-08/2007-05在解放军第三军医大学电磁辐射医学防护教育部重点实验室完成。取体外培养的N9小胶质细胞接受X波段脉冲波,平均功率密度为90mW/cm2的电磁波,一次性照射20min,在辐照后0,1,3,6,12,24h等6个时相点观察活化的N9细胞形态学,采用免疫组化的方法观察OX-42的表达情况,用酶联兔疫吸附测定方法检测N9细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α的水平,采用硝酸还原酶法检测培养上清液中NO浓度。以未接受电磁波辐照的N9小胶质细胞为假辐照组进行对照。结果:①电磁辐射后3hN9小胶质细胞OX-42表达开始明显增强,并一直持续到辐照后24h,细胞形态由静息状态转变为激活状态;②NO的浓度在辐照后1h开始升高(P<0.05),到辐照后6h达到峰值(P<0.01),12h后趋于恢复,24h后再次明显升高(P<0.05)。③肿瘤坏死因子α水平辐照3h后显著升高(P<0.01),并一直持续到12h,到辐射后24h又再次升高,并达到峰值(P<0.01)。结论:电磁辐射辐照可明显诱导小胶质细胞激活,活化后的小胶质细胞分泌NO、肿瘤坏死因子α等细胞因子的功能增强,分泌大量细胞因子反馈调节引起辐射后期的小胶质细胞激活。; 郝玉通陈纯海杨学森张广斌余争平; 关键词：电磁辐射小胶质细胞活化分泌功能

JAK2/STAT3信号通路参与脂多糖诱导小胶质细胞活化的研究被引量：6: 2009年; 目的研究蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子与激活子3(Janus kinase signal transducers 2 and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信号通路参与脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(MG)活化的影响及其可能机制。方法用细胞免疫组织化学的方法观察小胶质细胞特异性标志物OX-42的变化,用ELISA方法检测LPS刺激后肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达变化。以及用Western blot方法检测JAK2和STAT3磷酸化变化水平。结果LPS刺激后OX-42阳性细胞数显著增强,分泌大量的细胞因子TNF-α,JAK2和STAT3磷酸化水平显著升高,并被抑制剂AG490有效抑制。结论JAK2-STAT3信号通路参与了LPS诱导的小胶质细胞活化。JAK2-STAT3通路激活与炎症因子分泌有关。; 郝玉通陈纯海杨学森余争平; 关键词：脂多糖小胶质细胞肿瘤坏死因子

一种基于ODYSSEY红外荧光染料的凝胶迁移滞后实验方法被引量：1: 2009年; 目的寻求一种新的凝胶迁移滞后实验(electrophoretic mobility shift assays,EMSA)方法。方法利用先进的ODDSEY红外荧光成像系统,把探针进行了红外荧光的标记,优化了EMSA实验的程序以及时间过程。结果寻找到了一种更加精确安全有效的EMSA方法。结论基于红外荧光染料的凝胶迁移滞后实验安全,方便,效率高,是一种值得推广的新的实验方法。; 郝玉通王虚步杨学森张伟余争平; 关键词：EMSA 红外

电磁辐照致大鼠海马神经元凋亡及JAKs磷酸化水平: 2008年; 目的探讨电磁辐照后JAK/STAT(janus activated kinase/signal transducers and activatorsof transcription)信号通路中JAK家族(JAKs)蛋白磷酸化水平的变化,以了解其在电磁辐照致神经系统损伤的作用。方法以90mW/cm2的电磁场(EMF)一次辐照大鼠20min,在照后不同时相点采用TUNEL法对海马脑区组织切片进行细胞凋亡原位检测;采用Western blot检测JAK/STAT信号通路上游分子JAKs在海马脑区蛋白磷酸化水平的变化。结果电磁辐照后,海马脑区神经细胞出现明显凋亡,并于辐照后3h至24h凋亡细胞显著增加,凋亡率分别为26.6%和32.6%,明显高于对照组(6.5%)(P<0.01)。辐照后大鼠海马脑区JAK1、JAK2、JAK3蛋白磷酸化水平都有所升高,JAK1于照后12h达峰值,为对照水平的1.41倍(P<0.01),而JAK2磷酸化水平在辐照后即刻即达峰值,为对照水平的1.36倍(P<0.01),且一直维持在较高水平,JAK3仅在辐照后即刻至3h明显升高,分别为对照水平的1.34和1.25倍(P<0.05)。但12h后差异无统计学意义。辐照后72h3个家族均恢复到正常水平。结论电磁辐照能明显诱导海马神经细胞凋亡,在其过程中海马脑区JAK/STAT信号转导系统的JAK1、JAK2、JAK3出现差别激活,3条JAK/STAT信号通路在电磁辐照致神经系统的损伤过程中可能发挥了不同作用。; 陈纯海郝玉通杨学森余争平张广斌; 关键词：JAK/STAT信号通路海马

微波辐照致大鼠小胶质细胞活化与JAKs磷酸化被引量：4: 2008年; 目的探讨微波辐照后Janus激酶/信号转导与转录激活子途径(JAK/STAT)信号通路中JAK家族(JAKs)蛋白磷酸化水平的变化与小胶质细胞活化之间的关系。方法以90 mW/cm2的微波一次辐照大鼠20 min,在辐照后不同时相点采用免疫组化方法检测海马脑区小胶质细胞同工凝聚素(GSA-IB4)的表达情况,采用蛋白印迹Westernr blot方法检测JAK/STAT信号通路上游分子JAKs在海马脑区蛋白磷酸化水平的变化。结果微波辐照后3 h和24 h大鼠海马脑区小胶质细胞GSA-IB4表达明显增高:Jak1、Jak2、Jak3蛋白磷酸化水平在微波辐照后都有所升高,Jak1于辐照后即刻开始升高,12 h达到峰值,而Jak2磷酸化水平在辐照后即刻就达到峰值,并且24 h内都维持在较高水平,Jak3仅在辐照后3 h以内明显升高,72 h后所有Jak家族成员蛋白磷酸化水平恢复至正常。结论微波辐照可明显诱导海马脑区小胶质细胞活化,JAK/STAT信号转导系统的Jak1,Jak2,Jak3磷酸化水平出现不同形式的升高,表现为差别激活,3条SAK/STAT信号通路在微波辐照致小胶质细胞活化过程可能具有不同作用。; 杨学森陈纯海郝玉通余争平张广斌; 关键词：JAK/STAT信号通路小胶质细胞

电磁辐射对海马小胶质细胞及JAKs活化的影响被引量：1: 2008年; 目的探讨电磁辐射后JAK/STAT信号通路中JAK家族(JAKs)蛋白磷酸化水平的变化与小胶质细胞活化之间的关系。方法以90mW/cm2的电磁波一次辐照大鼠20min,采用免疫组化方法检测海马脑区小胶质细胞GSA-IB4的表达情况,采用westernblot检测JAKs家族蛋白质在海马脑区磷酸化水平的变化。结果电磁辐射后3h至24h大鼠海马脑区小胶质细胞GSA-IB4表达明显增高;Jak1、Jak2、Jak3蛋白磷酸化水平在电磁辐射后都有所升高,Jak1于辐照后即刻开始升高,12h达到峰值,而Jak2磷酸化水平在辐照后即刻就达到峰值,并且24h内都维持在较高水平,Jak3仅在辐照后3h以内明显升高,72h后所有Jak家族成员蛋白磷酸化水平恢复至正常。结论电磁辐射可明显诱导海马脑区小胶质细胞活化,JAK/STAT信号转导系统的Jak1,Jak2,Jak3磷酸化水平出现不同形式的升高,表现为差别激活,三条JAK/STAT信号通路在电磁辐射致小胶质细胞活化过程可能具有不同作用。; 陈纯海杨学森郝玉通张广斌余争平; 关键词：电磁辐射 JAK/STAT信号通路海马小胶质细胞

微波诱导小胶质细胞的促炎症反应被引量：3: 2010年; 目的探讨微波与小胶质细胞促炎症反应之间的关系，揭示小胶质细胞在微波致中枢神经损伤中的作用。方法离体培养的N9小胶质细胞接受90mW／cm^2微波辐照，在辅照后0、1、3、6、12、24h采用细胞流式计数的方法观察CD11b的表达情况，用酶联免疫吸附（ELISA）方法检测N9细胞培养上清液中FNF—α的浓度，采用反转录－聚合酶链反位（RT-PCR）检洲N9小胶质细胞一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达，采用硝酸还原酶法检测培养上清液中NO含量。结果微波辐照后3h阳性表达CD11b的小胶质细胞明显增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），一直持续到辐照后24h，并在辐照后6h达到高峰．TNF—α含量在辐射后1h明显升高[（657．8±25．9）pg／ml]，并一直持续到24h，在辐照后3h达到峰值[（762．1±61．5）pg／ml]，与对照组[（258．9±81．7）pg／ml]比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。NO的含量在辐照后1h开始升高[（4．48±0．59）μmol／1．1，与对照组[（2．65±0．14）μmol／L]的差异有统计学意义（P〈0．05），并随时间的延长逐渐增加。iNOSmRNA表达在辐照后1h开始明显升高，6h升高约2倍，此后表达有所下降，但24h内均高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05或心0．01）。结论微波辐照可明显诱导小胶质细胞活化，活化的小胶质细胞可通过分泌大量TNF—α，释放NO等产生促炎症反应。; 杨学森郝玉通何根林陈纯海王源张广斌余争平; 关键词：小神经胶质细胞肿瘤坏死因子一氧化氮

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国家自然科学基金(30470418)

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