国家自然科学基金(81071464)
- 作品数：6 被引量：27H指数：4
- 相关作者：唐康来许建中杨广华马林陈万更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学兰州军区兰州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同牵伸载荷对体外培养人肌腱细胞纤维型肌动蛋白的影响被引量：7
- 2011年
- 目的探讨不同牵伸载荷条件对体外人肌腱细胞纤维型肌动蛋白（F—actin）的影响，分析不同载荷条件与人肌腱细胞F-actin的变化关系。方法取5～7代人肌腱细胞加载不同牵伸载荷，其中牵伸强度分别为4％、8％、12％；时间：2、4、8、12、24h；频率：0．5H、1．0Hz。采用罗丹明标记的鬼笔环肽（rhodamine—phalloidin）及DAPI免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察F．actin的变化、细胞核固缩及凋亡小体形成；图像分析软件测定单个细胞平均荧光强度并进行单因素方差分析。结果设定牵伸频率为0．5Hz、牵伸强度4％，牵伸时间2h时，人肌腱细胞微丝排列紊乱、模糊；牵伸时间4h时，微丝增粗、减少，出现断裂呈细颗粒状。设定牵伸频率为0．5Hz、牵伸时间4h时，牵伸强度8％微丝解聚、断裂明显，F-actin总体分布减少；牵伸强度12％胞质微丝全部断裂，仅有部分胞膜微丝完整。设定牵伸频率为1．0Hz，牵伸强度为12％，加载时间分别为2、4、8、12、24h时，微丝断裂呈递增趋势，牵伸24h肌动蛋白微丝全部断裂。空白对照组细胞微丝完整荧光强度整体水平最高。牵伸频率固定时，随着牵伸强度递增，微丝的荧光强度呈梯度降低（P〈0．05），且差异有统计学意义；牵伸时间为8h时，各实验组微丝荧光强度增加，但低于对照组，随着时间的延长，F—actin表达量逐渐降低，24h时最低，其中，牵伸频率为0．5Hz、牵伸强度4％、牵伸时间4h时，细胞核固缩最明显，凋亡小体形成。结论不同牵伸载荷条件可引起体外培养的人肌腱细胞F—actin发生断裂、解聚，F-actin的断裂、解聚与载荷时间及应力强度呈正相关，F—actin的断裂、解聚诱导了人肌腱细胞生物学行为的改变。
- 邓银栓唐康来谢美明曹洪辉陈磊常德海董世武陶旭李辉杨会峰许建中
- 关键词：肌动蛋白类应力
- 大鼠跟腱来源肌腱干细胞的分离培养及鉴定被引量：12
- 2013年
- 目的从大鼠跟腱标本中分离培养肌腱干细胞(tendon stem/progenitor cells,TSCs)并加以鉴定。方法大鼠跟腱经消化后,获取的有核细胞按不同密度在37℃,5%CO2条件下培养,原代为P0代,P1～P3代用于实验研究。观察其克隆形成和增殖能力,用流式细胞仪和免疫组化染色方法对其干细胞标志物予以鉴定,以不同的全成分诱导分化液诱导,观察其多向分化潜能。结果大鼠跟腱来源肌腱干细胞具有克隆生长特性,表面标记物表达为CD44h(+)、CD90(+)、CD34(-)、CD106(-),免疫荧光染色显示SSEA4、Nucleostemin及Ⅰ型胶原蛋白表达均为阳性。经诱导后能够向成骨、成脂肪、成软骨多向分化。结论大鼠跟腱来源肌腱干细胞具有干细胞特性,不同条件下可能向不同方向分化。
- 胡超唐康来陈万马林杨广华
- 关键词：跟腱
- 高龄患者下肢深静脉血栓超声诊断的Logistic回归分析被引量：2
- 2013年
- 目的:应用Logistic回归筛选高龄患者下肢深静脉血栓灰阶及彩色多普勒超声诊断特征。方法:对我院150例主动要求下肢深静脉血栓灰阶及彩色多普勒超声检查的高龄患者,应用超声检查观察血管管径、管腔内回声及血流动力学等特征,进行Logistic回归分析,筛选超声诊断特征,对Logistic回归模型预测诊断绘制受试者工作曲线图(ROC),评估模型效果。结果:150例超声检查高龄患者,发生下肢深静脉栓塞129例,占86.00%。Logistic回归筛选,血管管径、管腔内回声、管壁内壁、血流信号改变4个变量进入回归模型,Logistic回归模型预测超声检出的ROC曲线下面积为0.903,灵敏度为90.3%,特异度为93.8%。结论:以高龄患者下肢深静脉血栓超声特征建立的Logistic回归模型对该病具有较好的预测诊断价值。
- 徐毅胡娟李霞胡永胜许建中
- 关键词：下肢深静脉静脉血栓形成LOGISTIC回归
- 机械牵伸对体外大鼠肌腱干细胞RhoA/Rho相关蛋白激酶分子表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨不同机械牵伸条件对大鼠肌腱干细胞（tendon stem cells，TSCs）RhoA/ Rho相关蛋白激酶（Rho associated protein kinases，ROCK）分子表达的影响。 方法取2～3月龄雄性SD大鼠（体重200～250 g）跟腱组织，采用酶消化法分离培养TSCs。取第2～3代细胞接种于微沟槽培养皿中，分别以牵伸应变量4%、8%（4%牵伸组、8%牵伸组），牵伸频率1 Hz，牵伸时间4 h/d进行机械牵伸，倒置相差显微镜下观察细胞生长情况；牵伸1、2、3 d后收集细胞，采用实时定量 PCR、Western blot检测RhoA、ROCK基因及蛋白表达情况，应用细胞计数试剂盒8检测牵伸后细胞增殖情况。以未牵伸的TSCs作为对照组。 结果第2代TSCs形态呈鹅卵石样，聚集生长；接种于微沟槽培养皿后呈杂乱生长；牵伸后细胞贴壁良好，无脱落，并沿受力方向排列。各时间点TSCs中RhoA、ROCK基因相对表达量随牵伸应变量的增加呈递增趋势，组间比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05）。牵伸1 d时，4%、8%牵伸组与对照组相比RhoA、ROCK蛋白表达水平相似（P 〉 0.05）；2、3 d时，4%、8%牵伸组表达水平显著高于对照组，且随牵伸应变量增加呈递增趋势，组间比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05）；各时间点，8%牵伸组细胞增殖显著低于4%牵伸组及对照组（P 〈 0.05）；4%牵伸组与对照组比较，差异无统计学意义（P 〉 0.05）。 结论大鼠TSCs中RhoA、ROCK分子表达水平随牵伸应变量的增加而增加，RhoA/ROCK分子可能是TSCs机械牵伸后的重要效应分子。
- 马林唐康来周兵华杨广华陈万穆米多袁成松
- 关键词：肌腱病RHOA
- 伸肌腱止点清理带线锚钉修复治疗顽固性网球肘的近期疗效被引量：7
- 2013年
- 目的探讨伸肌腱止点清理带线锚钉修复桡侧腕短伸肌(extensor carpi radialis brevis,ECRB)、指伸肌(extensor digitorum communis,EDC)治疗顽固性网球肘的近期疗效。方法 2009年3月-2011年5月,采用伸肌腱止点清理带线锚钉修复ECRB及EDC治疗单侧顽固性网球肘患者10例。男6例,女4例;年龄36～57岁,平均45.4岁。优势肘8例,非优势肘2例;重体力劳动者4例,普通工作者6例。病程8～24个月,平均12.3个月。患者均有肱骨外上髁部疼痛,局部肿胀压痛,Mill征(+)。肘关节活动范围:伸直0～30°,平均11.3°;屈曲120～145°,平均132.5°。MRI提示均为肱骨外髁炎。结果术后切口均Ⅰ期愈合,无感染、关节液外漏及肘关节强直等并发症发生。10例均获随访,随访时间4～23个月,平均12个月;其中7例随访12个月及以上者均未复发。重体力劳动者术后(3.75±0.95)个月恢复原工作,与普通工作者(2.91±0.20)个月比较,差异无统计学意义(t=1.715,P=0.180)。术后1、3个月及末次随访时疼痛视觉模拟评分(VAS)均较术前显著下降(P<0.05),Mayo评分均较术前显著提高(P<0.05);优势侧及非优势侧握力均较术前显著提高(P<0.05),末次随访时与非手术侧握力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。末次随访时肘关节活动范围:伸直0～—10°,平均—1.5°;屈曲140～160°,平均150.5°。结论伸肌腱止点清理带线锚钉修复ECRB及EDC治疗顽固性网球肘,能有效防止前臂伸肌力量潜在丢失,且创伤小,疼痛缓解显著,握力恢复接近正常,近期疗效较好。
- 邓银栓唐康来李辉张吉强谢美明曹洪辉陈艳陈磊周兵华谭晓康许建中
- 关键词：顽固性网球肘带线锚钉
- 不同牵伸强度对体外人肌腱细胞磷脂酶A2／环氧合酶表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨不同循环牵伸强度对体外人肌腱细胞磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）和环氧合酶（cyclooxygenase，COX）表达的影响。方法取4～6代人肌腱细胞在0．5Hz、4h条件下施加不同牵伸强度（4％、8％、12％），未牵伸组设为对照组。静置4h后，用RT—PCR、Western blot检测胞浆性PLA2（cytosolic PLA2，cPLA2）、COX1、COX2的表达，ELISA测定分泌性PLA2（secretory PLA2，sPLA2）的表达。结果对照组、4％、8％、12％牵伸组ePLA2、COX1、COX2基因表达随牵伸强度增加呈递增趋势，4％牵伸组cPLA2、COX1蛋白表达与对照组比较增加均不明显，差异无统计学意义（P〉0．05）；8％和12％牵伸组cPLA2及COX1蛋白表达与对照组比较明显增加，差异有统计学意义（P〈0．01）。4％、8％、12％牵伸组COX2与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），且随牵伸强度增加而逐渐增加。sPLA2在4％牵伸组分泌量和对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），8％和12％牵伸组增加明显（P〈0．01）。结论体外人肌腱细胞PLA2、COX1、COX2的表达与牵伸强度呈正相关，PLA2／COX调节系统可能成为防治肌腱病的新分子靶标。
- 谢美明唐康来邓银栓李辉周建波谭晓康陈磊许建中
- 关键词：肌腱病磷脂酶A2环氧合酶机械拉伸
