广东省自然科学基金(980466)
- 作品数：16 被引量：74H指数：5
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- 神经肽Y对人血管平滑肌细胞脂质代谢的调制作用被引量：4
- 2002年
- 为探讨神经肽Y在血管平滑肌细胞中对脂质代谢是否具有调制作用 ,以成人血管平滑肌细胞体外培养模型为研究对象 ,经不同浓度的神经肽Y作用后 ,运用激光扫描共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量观察神经肽Y对人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的影响。结果发现 ,对照组人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的平均荧光强度为 2 4 4 3± 1 89,而在浓度为 1 0 8mol L、1 0 7mol L、1 0 6mol L和 1 0 5mol L的神经肽Y作用下 ,各组的平均荧光强度分别为 2 0 1 5± 1 64、1 890± 1 4 5、1 841± 1 2 3和 1 786± 1 36 ,与对照组相比分别下降了1 7.49%、2 2 .62 %、2 4 .64 %和 2 6 .92 % (P <0 .0 1 ) ,且各浓度组之间多有显著差异 ,呈现一定的剂量依赖效应。结果提示 ,神经肽Y很可能通过下调人血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体的表达 ,从而影响血管平滑肌细胞的脂质代谢。
- 梁若斯刘建康胡必利
- 关键词：人血管平滑肌细胞脂质代谢调制作用动脉粥样硬化
- 神经肽Y剌激肾动脉平滑肌热休克蛋白表达的实验研究
- 2004年
- 目的 以热休克蛋白 70 (HSP 70 )作为神经肽Y (NPY )刺激肾动脉平滑肌细胞增殖活动为信号 ,探讨高血压肾动脉重塑中发挥的作用。方法 应用快速微量MTT比色法和荧光免疫组织化学定量技术观察神经肽Y作用下肾动脉平滑肌细胞 (VSCM )增殖活动中HSP70表达作用。结果 神经肽Y可刺激体外培养肾动脉平滑肌细胞的增殖 ,其增殖度 (MTT A值 )和细胞内因损伤产生的HSP 70表达明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 神经肽Y可影响肾动脉平滑肌细胞增殖 ,而HSP 70表达水平是肾动脉平滑肌细胞增殖的重要信号。
- 何慧婵钟惟德曾广翘刘建康黄少华陈敏生魏鸿蔼
- 关键词：热休克蛋白免疫组织化学
- 洛沙坦对血管平滑肌细胞增殖的干预作用及C-myc基因表达的影响
- 2000年
- 目的】探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂洛沙坦(losartan)在高血压病血管重塑过程中的作用及作用机制。【方法】①应用ACAS570共聚激光扫描显微系统,通过荧光免疫组化方法,对洛沙坦作用下体外培养的大鼠血管平滑肌细胞中的核细胞增殖抗原(PCNA)及与增殖相关的Cmyc基因表达产物进行定量检测。②测定洛沙坦作用下的体外培养的大鼠血管平滑肌细胞的增殖活性(MTT)值。【结果】洛沙坦作用下血管平滑肌细胞的增殖活性(MTT)降低;实验组和对照组分别为02045±00013,02239±00010(P<005)。PCNA及Cmyc的表达都明显降低;实验组和对照组PCNA分别为1338.56±232.56,154270±20004(P<001)。Cmyc分别为152803±12514,174035±20591(P<001)。【结论】洛沙坦通过影响血管平滑肌细胞的增殖活性而参与血管壁结构的改变。
- 黄少华陈敏生刘建康
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖
- 神经肽Y刺激肾动脉平滑肌热休克蛋白表达及Losartan的干预作用被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨以HSP70作为神经肽Y (NPY)和losartan间在肾动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活动相互作用为信号 ,在高血压肾动脉重塑中的作用。方法 应用快速微量MTT比色法和荧光免疫组织化学定量技术 ,观察神经肽Y作用下肾动脉VSMC增殖活动中热休克蛋白 (heatHSP)表达以及Losartan对NPY作用的干预作用。结果 神经肽Y刺激体外培养肾动脉平滑肌细胞的增殖度 (吸光度A值为 0 2 6 2 6± 0 0 0 2 5 )与细胞内因损伤产生的HSP70表达 (A值为 0 2 44 0±0 0 0 13)明显高于对照组 (A值为 0 2 2 3 9± 0 0 0 10 ) (P <0 0 1)。losartan可降低NPY对肾动脉平滑肌细胞的增殖度 (A值 )的刺激作用 ,减少细胞内HSP70的表达。结论 神经肽Y可影响肾动脉平滑肌细胞增殖引起高血压 ,而HSP70表达水平是肾动脉平滑肌细胞增殖的重要信号。
- 钟惟德曾广翘胡建波蔡岳斌刘建康黄少华陈敏生魏鸿蔼
- 关键词：热休克蛋白LOSARTAN干预作用免疫组织化学
- Losartan对神经肽Y诱导血管平滑肌细胞增殖的逆转作用被引量：4
- 2000年
- 目的 :观察神经肽Y(NPY)与血管紧张素受体拮抗剂losartan对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)中PCNA、PDGF、c -myc癌基因表达的影响 ,从分子生物学的角度探讨NPY在高血压、动脉粥样硬化发生中的作用和losartan的逆转作用。方法 :应用荧光免疫组化定量技术 (ACAS5 70共聚焦激光扫描显微细胞仪 )。结果 :NPY刺激VSMC增殖 ,使其PCNA、PDGF和c -myc癌基因的表达明显高于对照组 ;losartan则可逆转NPY对VSMC增殖的刺激作用 ,使PCNA、PDGF和c -myc癌基因表达的平均荧光值降低。结论 :NPY促进VSMC的增殖 ,其作用与高血压的发生有关 ;而losartan对高血压的治疗作用可能与拮抗NPY对VSMC增殖的刺激作用有关。
- 黄少华刘建康陈敏生
- 关键词：LOSARTAN血管平滑肌细胞高血压
- Ca^(2+)/CaM-CaN途径参与神经肽Y诱导的大鼠心肌细胞肥大被引量：1
- 2005年
- 目的 :探讨Ca2 + CaM依赖的钙调神经磷酸酶(CaN)途径在神经肽Y(NPY)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :用NPY (10、10 0nmol·L-1)刺激WISTAR乳鼠心肌细胞 ,并用CaN特异性抑制剂环胞霉素A加以干预。应用3 H Leu掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率 ,用免疫印迹 (Western blot)和组织化学法分别测定心肌细胞内CaN α蛋白表达和CaN酶的活性。结果 :较高浓度NPY(10 0nmol·L-1)可明显增加心肌细胞3 H Leu掺入量(P <0 .0 5 ) ,加入CsA可阻断上述效应 ;NPY(10 0nmol·L-1)还可明显增加心肌细胞内CaN酶比活性 (P <0 .0 5 ) ,并刺激心肌细胞CaN α蛋白表达(P <0 .0 5 )。结论 :NPY可活化大鼠心肌细胞Ca2 + CaM CaN途径 ,而CaN特异性抑制剂环胞霉素A可抑制NPY诱导的心肌肥大 ,说明Ca2 + CaM依赖的钙调神经磷酸酶 (CaN)途径参与神经肽Y诱导的心肌细胞肥大效应。
- 董颀陈敏生李晓云黄少华李荧辉张舒刘振秀
- 关键词：钙调神经磷酸酶心肌细胞肥大
- 神经肽Y对大鼠心肌细胞胞浆及核内游离钙浓度的影响被引量：6
- 2005年
- 目的:观察不同时限内神经肽Y(NPY)对心肌细胞胞浆及核内游离钙浓度的作用。方法:用Fluo3AM荧光标记细胞内游离钙离子,用NPY(100nmol/L)刺激WISTAR乳鼠心肌细胞,检测0min、5min、10min及24h内心肌细胞胞浆及核内钙离子浓度变化。结果:加入100nmol/LNPY即刻至10min内,心肌细胞胞浆及核内钙含量差异均无显著性。经100nmol/LNPY刺激24h后,心肌细胞胞浆钙含量(16.81±2.1)明显高于对照组(7.45±1.96)(P<0.01),核内钙含量(30.65±4.06)也显著高于对照组(15.64±2.16)(P<0.01)。结论:较长时间的NPY刺激可导致心肌细胞胞浆及核内钙浓度增加。
- 董颀陈敏生黄少华李晓云李荧辉
- 关键词：心肌细胞
- 神经肽Y影响人血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体表达被引量：10
- 2003年
- 通过观察神经肽Y对人血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体表达的影响 ,以探讨神经体液因素在动脉粥样硬化发生中的重要作用。将体外培养的人血管平滑肌细胞分成对照组和不同浓度神经肽Y组 (浓度分别为 1 0 8mol L、1 0 7mol L、1 0 6 mol L和 1 0 5mol L) ,各组分别培养 6h、1 2h、2 4h和 4 8h ,然后经免疫荧光组织化学染色 ,在激光扫描共聚焦显微镜下定量检测神经肽Y对人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的影响。结果发现 ,对照组低密度脂蛋白受体表达的平均荧光值在 2 4 2 8～ 2 5 2 7之间 ,且不同培养时间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。而各神经肽Y组低密度脂蛋白受体表达的平均荧光值与对照组之间有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ,在不同的培养时间中 ,1 0 8mol L神经肽Y组平均荧光值在 1 798～ 2 4 0 8之间 ;1 0 7mol L神经肽Y组在 1 783～ 2 332之间 ;1 0 6 mol L神经肽Y组在 1 72 2～ 2 2 81之间 ;1 0 5mol L神经肽Y组在 1 5 90～ 2 0 1 0之间。与对照组相比 ,分别平均下降 1 5 .5 9%、1 9.78%、2 1 .91 %和 2 6 .83% ,且不同浓度神经肽Y组之间多有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,神经肽Y对成人血管平滑肌细胞的低密度脂蛋白受体表达的下调作用呈现一定的剂量和时间依赖效应。结果提示 ,
- 梁若斯刘建康胡必利
- 关键词：生理学血管平滑肌细胞低密度脂蛋白受体
- 神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达与细胞内液pH变化的关系被引量：5
- 2001年
- 为探讨细胞内液pH在神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中的变化 ,以体外培养血管平滑肌细胞模型为研究对象 ,运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量和动态观察研究神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达与细胞内液pH变化之间的关系。结果发现 ,在神经肽Y作用下 ,体外培养的血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达的平均荧光值分别为 134 9.6 7± 10 8.2 8和 1397.5 0± 10 4.43,与对照组的 986 .6 4± 91.2 2和 10 6 0 .44± 10 7.5 4相比 ,差异明显 (P <0 .0 1) ,bax与bcl 2两者平均荧光值之比为 1.0 4;神经肽Y还可降低血管平滑肌细胞内液pH的平均荧光值 ,使细胞浆酸化。此结果提示 ,神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因的表达与神经肽Y降低细胞内液酸碱度、细胞浆酸化有关。
- 刘建康胡必利梁若斯陈敏生黄少华
- 关键词：细胞内液酸化凋亡血管平滑肌
- 成人动脉平滑肌细胞体外培养模型的建立被引量：22
- 2002年
- 目的 :建立成人动脉血管平滑肌细胞 (hVSMC)体外培养模型 ,并保持体外传代培养过程中hVSMC生物学特性的稳定。方法 :运用改良的植块贴壁法 ,在植块贴壁过程、培养基选取、换液时间及培养液用量等多个关键环节进行改进 ,成功建立了成人hVSMC体外培养模型 ,并用光镜和透射电镜对培养细胞进鉴定和形态学观察。结果 :培养的细胞生长良好 ,光镜下呈长梭形及“峰与谷”样生长。透射电镜下可见肌丝、密斑及密体 ,具有典型的hVSMC特征。经传代培养至 35代 ,细胞生长特性未见异常改变。结论 :改良植块贴壁法能使hVSMC原代培养的时间明显缩短 ,传代后hVSMC生物学特征的稳定性好 ,细胞扩增量大 ,且培养与纯化能同步进步。
- 梁若斯陈德
- 关键词：成人动脉平滑肌细胞体外培养模型动脉粥样硬化
