国家自然科学基金(39970240)
- 作品数：10 被引量：17H指数：3
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- 大鼠面部慢性炎症痛导致三叉神经节表达P2X3神经元表型的转变被引量：1
- 2006年
- 目的研究大鼠面部慢性炎症痛与三叉神经节内表达P2X3受体亚型神经元细胞大小和表型变化之间的关系。方法参照Neumann(1996)报道的研究方法,采用大鼠面部皮下注射松节油建立慢性炎症痛模型,用热测痛的方法测定面部皮肤的痛阈值,每天一次,连续测15d。用免疫组织化学技术观察大鼠面部慢性炎症后第5d三叉神经节内感觉神经元P2X3受体的表达。采用体视学的方法测量表达P2X3神经节细胞大小及表型的变化。结果炎症侧大鼠面部痛阈值与对照组相比明显降低,在第5d达到最低值,以后逐渐恢复,第13d开始痛阈恢复正常水平。炎症侧三叉神经节内表达P2X3神经元的平均细胞表面积(721±12μm2)与对照组(616±8μm2)相比明显增大(P<0·01)。进一步观察发现表达P2X3小细胞群(<950μm2)的表面积由炎症前的537±13μm2增加到炎症后的582±15μm2(P<0·05)而且小细胞占总细胞的数量比例由炎症前的42·2±3·2%增加到炎症后的51·8±3·5%(P<0·05);而表达P2X3受体的大细胞(>950μm2)的数量比例由炎症前的6·5±1·9%增加到炎症后的12·8±2·2%(P<0·05)。结论面部慢性炎症痛时,其三叉神经节内表达P2X3受体神经元的表型可发生改变,这可能与面部痛觉过敏和触诱发痛的形成有密切关系。
- 刘羊殷光甫胡道松林传友戴甲培
- 关键词：痛觉过敏触诱发痛P2X3受体三叉神经节
- 非洲爪蟾卵母细胞P2X受体存在的证明
- 2007年
- 目的D1中除有P2Y受体介导的成分外,可能还有P2X受体介导的电流参与。本研究的目的在于进一步证实D1电流中是否有P2X受体介导电流的存在。方法采用双电极电压钳记录方法。结果Zn2+对不依赖于G蛋白之IATP(D1)具有增强作用;重复施加ATPD1电流逐步减小,而D2电流则逐步增大。在仅有D2之IATP(D2)情况下,重复加ATP后D2电流不但不增大反而有所下降。结论非洲爪蟾卵母细胞上存在P2X受体。
- 余帮兴李之望
- 关键词：非洲爪蟾卵母细胞P2X受体
- 大鼠初级感觉神经元P2X3受体的表达及其与SP的关系被引量：6
- 2006年
- 目的研究在大鼠初级感觉神经元细胞上P2X3受体的表达情况及其与P物质的关系。方法取SD大鼠背根神经节(DRG)和三叉神经节(TG)固定后切片;用抗P2X3受体抗体和抗SP抗体进行免疫组织化学反应,并通过两种不同的显色方法同时进行P2X3受体和SP的双标。结果P2X3免疫反应阳性细胞主要集中在小细胞和中等细胞(其中在TG,P2X3-ir阳性神经元约占整个细胞的24.8%;在DRG约31.7%的神经元是P2X3-ir阳性),并且在DRG和TG细胞上均存在有P2X3受体和SP共存(TG上的双标细胞占P2X3-ir阳性细胞总数的36.26%,DRG上占46.81%)。结论由于ATP门控阳离子通道受体P2X3本身就与伤害性感受的初级传入有关,而它与SP的共存可提示当组织中的ATP释放时可以通过P2X3受体作用于含SP的伤害性感觉神经末梢上,促使SP释放引起痛觉过敏。
- 赵士洁殷光甫谷远征李之望胡道松林传友戴甲培
- 关键词：P2X3受体P物质背根神经节三叉神经节
- SKF38393抑制大鼠DRG分离神经元ATP-激活电流
- 2003年
- 目的 :探讨多巴胺D1受体的选择性激动剂SKF3 83 93HCl对ATP -激活电流的作用。方法 :在大鼠新鲜分离的DRG神经元标本上应用全细胞膜片钳技术 ,记录SKF3 83 93对ATP -激活电流的作用。结果 :大部分受检细胞 ( 87.5% ,77/ 88)对ATP敏感 ,10 - 6 ～ 10 - 3 mol/LATP可引起剂量依赖性呈明显去敏感的内向电流。在此77个细胞中 ,预加SKF3 83 93可引起三类反应 :①外向电流 ( 7.8% ,6/ 77) ;②内向电流 ( 2 6.0 % ,2 0 / 77) ;③无反应( 66.2 % ,51/ 77)。与ATP -激活电流相比 ,SKF3 83 93 -激活电流幅值小 ,无明显去敏感现象。预加SKF3 83 93 3 0～ 60s对ATP -激活电流的影响如下 :在 74.0 % ( 57/ 77)的细胞产生抑制作用 ,15.6% ( 12 / 77)的细胞产生增强作用 ,其余的无明显作用 ( 10 .4% ,8/ 77) ,本文主要针对此抑制作用进行探讨。此种抑制作用与SKF3 83 93本身是否引起或引起的是内向或外向电流无关。在浓度 10 - 9～ 10 - 4mol/L范围SKF3 83 93对 10 - 4mol/LATP -激活电流的抑制作用依赖于SKF3 83 93的浓度。胞内透析H 7上述抑制作用可完全被取消 ,而胞内透析H9此抑制作用依旧存在。结论 :SKF3 83 93对ATP -激活电流的抑制作用可能是由于D1受体激活后经G蛋白偶联及PKC途径使ATP受体磷酸化所致。
- 李国华王新均何华琼郑先科李之望
- 关键词：DRG神经元
- 鼠脑神经递质受体在卵母细胞上的表达
- 2001年
- 把提取的鼠脑 m RNA注射到卵母细胞内 ,在卵母细胞上以双电极电压钳技术研究某些递质的诱导电流。实验发现除卵母细胞本身所具有的 muscarine受体外 ,还有多种受体明显地在卵母细胞上表达。卵母细胞膜上的表达受体的反应可分平滑型、振荡型、复合型三类。其反应类型与所开启的通道及通透离子有关。平滑型反应的受体与离子通道为一复合体 ,激动剂开启其自身离子通道。而振荡型反应是递质通过第二信使的介导 ,引起胞内 Ca2 +库中的 Ca2 +释放 ,开启卵母细胞膜本身的 Cl-通道 ,产生 Ca2 +依赖的 Cl-电流 ,构成振荡型电流反应的主要成分。
- 王钦文常岚王凤杨季清李之望
- 关键词：MRNA卵母细胞神经递质
- 多巴胺对大鼠脊髓背根神经节神经元ATP—激活电流的调制作用被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究多巴胺 (DA)对ATP -激活电流 (IATP)的调制作用。方法 :在大鼠新鲜分离的DRG神经元标本上应用全细胞膜片钳技术 ,记录DA对IATP的影响。结果 :大部分受检细胞 (89.5 % ,77/86 )对ATP敏感 ,10 -6～ 10 -3 mol/LATP可引起剂量依赖性呈明显去敏感的内向电流。在此 77个细胞中 ,预加DA对IATP的影响如下 :在 5 0 .6 % (39/77)的细胞产生抑制作用 ,2 8.6 % (2 2 /77)的细胞产生增强作用 ,其余的无明显作用 (2 0 .8% ,16 /77)。在浓度 10 -7～ 10 -3 mol/L范围DA对IATP的抑制或增强作用依赖于多巴胺的浓度。胞内透析GDP - β -s上述抑制或增强作用可完全被取消。结论 :DA对IATP的抑制作用可能是由于多巴胺受体激活后经G蛋白偶联使ATP(P2X)
- 李国华郭锐冯桂香李莉唐核心李之望
- 关键词：多巴胺脊髓背根神经节调制作用
- 非洲爪蟾卵母细胞内源性及表达的P2型嘌呤受体介导的膜电流记录方法被引量：1
- 2003年
- 目的 记录和区分卵母细胞内源性 P2型嘌呤受体及表达的外源性 P2型嘌呤受体介导的膜电流。方法 应用双电极电压钳技术分别在带滤泡膜及去滤泡膜后注入 RNA并经孵育的卵母细胞记录膜电流。结果 根据所用卵母细胞标本的制备 (是否去滤泡膜及是否注入 RNA并孵育 )以及电流的形式及幅值 ,可将内源性 P2型嘌呤受体和表达的外源性 P2型嘌呤受体介导的膜电流区分开来。结论 应用以上方法可区分两种不同的三磷酸腺苷 ( adenosinetriphosphate,ATP)
- 冷明彭碧文谢辉李之望
- 关键词：卵母细胞电压钳
- 慢性炎症痛引起DRG感觉神经元P2X3受体表达的改变被引量：4
- 2009年
- 目的探讨脊髓背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)P2X3受体参与大鼠足底慢性炎症痛相关的热痛觉过敏机制。方法1)用行为学的研究方法,以大鼠右侧后脚掌注射松节油加石蜡(各占50%)0.1ml建立后脚掌慢性痛模型,用热测痛的方法测量后脚掌皮下注射松节油后的痛阈,每天1次,连续测15d。2)用免疫组织化学技术观察大鼠后脚掌慢性炎症后第2天和第7天,炎症侧脊髓背根神经节(L4-6)神经元中P2X_3受体阳性细胞类型的分布变化;以及正常脊髓背根神经节(L4-6)神经元中P2X_3受体阳性细胞类型的分布作为对照。结果1)炎症后大鼠后脚掌侧痛阈出现降低,在第2天痛阈达到最低,后逐渐恢复,14d后恢复正常痛阈值。2)正常大鼠P2X_3主要表达于DRG的中小神经元上,炎症后DRG(L4-6),中小型P2X_3受体阳性细胞数比对照组明显增加。细胞平均面积增大。结论后脚掌慢性炎症痛可以引起大鼠对伤害性热刺激的痛觉过敏,并导致脊髓背根神经节(L4-6)神经元中P2X_3受体阳性细胞数目增加,表明P2X_3在DRG的中小神经元的改变可能对松节油引起脚掌炎症痛时热痛觉过敏的形成与维持起重要作用。
- 杨友华杨荣黄丹夏保芦殷光甫
- 关键词：脊髓背根神经节痛觉过敏
- D_1及α_2受体激动剂对卵母细胞表达的GABA_A受体的抑制被引量：1
- 2001年
- 目的 :研究SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体的调制作用 ,并与新鲜分离细胞相比较。方法 :实验在注射鼠DRG神经元mRNA的卵母细胞上进行 ,以双电极电压钳技术进行研究。结果 :①SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体有明显的抑制作用 ,其作用呈浓度依赖性。②SKF38393及Clonidine的诱导电流之间有相互抑制作用。③SKF38393及Clonidine对GABAA 受体的抑制作用是非竞争性抑制 ,并且为非电压依赖性。结论 :实验结果提示SKF38393及Clonidine可通过胞内转导 ,由第二信使介导GABAA 受体的磷酸化而抑制GABAA
- 王钦文王秀清王凤李之望
- 关键词：卵母细胞背根神经节GABAA受体Α2受体激动剂
- 大鼠三叉神经节神经元膜P2X嘌呤受体的特征被引量：5
- 2006年
- 采用全细胞膜片钳技术研究了大鼠三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)神经元膜P2X嘌呤受体的特征。结果发现: 大部分受检细胞(78．9％,142／180)对ATP敏感,ATP-激活电流有明显的浓度依赖性。少数细胞无反应(21．1％,38／180)。在对ATP敏感的142个细胞中,绝大部分引起一内向电流(95．1％,135／142),少数为外向电流(2．1％,3／142),另有部分细胞出现双相电流(2．8％,4／142)。引起的内向电流在小直径细胞(<30μm)上多表现为快去敏感电流,对vanilloid高度敏感;在中等大小的细胞(30-40 μm)上多表现为慢去敏感电流,对vanilloid不敏感;绝大多数大细胞(>40 μm)对ATP和vanilloid均不敏感。此外,电流的波形与细胞直径密切相关。无论小细胞还是中等细胞其I-V曲线均表现出明显的内向整流趋势。我们还研究了ATP-激活电流的动力学特征,并观察了P2嘌呤受体激动剂、拮抗剂的效应。结果提示:不同类型的ATP受体- 离子通道在不同类型的TG神经元上的表达具有不同的特点。
- 谷远征殷光甫关兵才李之望
- 关键词：腺苷三磷酸嘌呤受体膜片钳技术
