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基于LC-LITMS/MS法分析白头翁皂苷B7在大鼠体内的代谢产物被引量：3: 2014年; 目的鉴定白头翁中齐墩果酸3-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(B7)在大鼠粪便的代谢产物。方法采用超高效液相色谱-三重四级杆线性离子肼复合质谱法(LC-LITMS/MS)检测大鼠灌胃B7后粪便中的代谢产物。使用Waters-SunFire C18柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离,并与线性离子阱联用。选择增强型母离子扫描(EMS)和预测离子对扫描模式(pMRM)进行质谱扫描,采用Analyst 1.5软件进行数据处理、鉴定代谢产物的化学结构。结果在大鼠粪便检测到原型M0(B7)及M1(B7去甲基葡萄糖醛酸化产物)、M2(齐墩果酸-3-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M3(鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M4(齐墩果酸-3-α-L-吡喃阿拉伯糖)和M5(齐墩果酸)等5个代谢产物。结论 B7在大鼠体内以脱糖代谢和葡萄糖醛酸化代谢为主。; 欧阳辉郭宜城何明珍梁起栋饶小勇简晖冯育林杨世林; 关键词：齐墩果酸 MS 代谢产物

白头翁皂苷调节Bel-7402人肝癌异体移植瘤裸鼠能量代谢的研究被引量：16: 2014年; 目的考察白头翁Pulsatilla chinensis皂苷对人肝癌Bel-7402荷瘤裸鼠异体移植瘤的抑制作用,并从能量代谢角度探讨其作用机制。方法制备人肝癌Bel-7402裸鼠异体移植瘤模型,通过肿瘤体积、抑瘤率观察白头翁皂苷的体内抗肿瘤活性;生物化学法检测瘤块组织乳酸及ATP的量以观察白头翁皂苷对能量代谢的调节作用;ELISA法检测白头翁皂苷对能量代谢相关酶变化的影响;Western blotting法检测白头翁皂苷对能量代谢调控蛋白缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。结果白头翁皂苷能较好地抑制肝癌荷瘤裸鼠异体移植瘤的生长,可明显减小肿瘤体积,白头翁皂苷400、200、100 mg/kg抑瘤率依次为42.8%、31.5%、14.9%,呈剂量依赖关系,且对血液白细胞(WBC)无明显影响;白头翁皂苷能明显降低瘤块组织中乳酸和ATP的量;白头翁皂苷可降低糖酵解关键酶己糖激酶-II(HK-II)、磷酸果糖激酶(PFK)及丙酮酸激酶(PK)的量,提高三羧酸循环关键酶琥珀酸脱氢酶(SDH)的量;Western blotting检测结果显示白头翁皂苷可明显降低瘤块组织HIF-1α蛋白的表达。结论白头翁皂苷具有较好的体内抗肿瘤作用,其可能通过HIF-1α通路调节肿瘤细胞能量代谢,来达到抑制肿瘤生长的作用。; 罗颖颖陈兰英简晖崔亚茹谢欣序刘鹏杨世林郭建生; 关键词：抗肿瘤能量代谢糖酵解

UPLC-Q-trap-MS鉴定白头翁皂苷D在大鼠离体肠道菌群中的代谢产物被引量：14: 2014年; 目的鉴定白头翁皂苷D在大鼠离体肠道菌群体外代谢产物。方法运用超高效液相色谱-三重四级杆线性离子肼复合质谱(UPLC-Q-trap-MS)分析白头翁皂苷D体外肠道菌群孵育样品,采用Analyst 1.5软件进行数据处理,根据保留时间和各色谱峰质谱裂解规律,比较确定白头翁皂苷D在体外肠道菌群中代谢产物,同时根据质谱二级裂解规律对代谢产物结构进行推测。结果在大鼠离体肠道菌群孵育样品中鉴定了白头翁皂苷D(M0)原型及常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(M1)、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(M2)、常春藤皂苷元(M3)、白头翁皂苷D羟基化(M4)、白头翁皂苷D甲基化产物(M5、M6)、白头翁皂苷D脱氢产物(M7)等7个代谢产物。结论白头翁皂苷D能够在大鼠离体肠道菌群中发生广泛的代谢。; 欧阳辉郭宜城何明珍梁起栋饶小勇冯育林简晖杨世林; 关键词：肠道菌群代谢产物

HPLC测定白头翁皂苷D的油水分配系数及平衡溶解度被引量：13: 2014年; 目的:测定白头翁皂苷D的油水分配系数及其在不同溶剂中的平衡溶解度。方法:采用摇瓶法与高效液相色谱法相结合测定白头翁皂苷D的油水分配系数,采用高效液相色谱法测定白头翁皂苷D在6种有机溶剂及不同pH缓冲液中的平衡溶解度。结果:白头翁皂苷D在不同pH条件下油水分配系数大于零,随着pH升高白头翁皂苷D的平衡溶解度逐渐增加,在不同溶剂中白头翁皂苷D的平衡溶解度以甲醇最大(达到255.89 g·L-1),乙腈中最小(0.20 g·L-1)。结论:在胃肠生理条件下,白头翁皂苷D以分子状态形式存在,由lgPapp可知其吸收性较好,但水溶性较差,提示增加白头翁皂苷D的溶解度可能有利于提高其生物利用度。; 饶小勇尹姗张国松罗晓健简晖冯育林杨世林; 关键词：HPLC 油水分配系数平衡溶解度

HPLC-ELSD法测定白头翁中白头翁皂苷D的含量被引量：2: 2013年; 目的：建立高效液相色谱-蒸发光检测法测定白头翁皂苷D含量的方法。方法 Hyperisil ODS2 C18柱（250 mm ×4．6 mm ，5μm），柱温30℃；流动相：甲醇-水-甲酸（72∶28∶0．1）；流速1 mL · min-1；Altech ELSD 3300检测器，雾化气流速1．3 L · min-1，漂移管温度为55℃。结果该方法的线性范围为0．1046～1．0460 mg · mL -1（r＝0．9992），平均回收率（n＝6）为101．0％（RSD＝1．6％），不同产地药材白头翁皂苷D差异性较大。结论该方法专属性强、准确、灵敏度高、重复性好，可用于白头翁中白头翁皂苷D的测定，对白头翁规范性种植具有指导意义。; 饶小勇尹姗龚明罗晓健张尧冯育林杨世林; 关键词：HPLC-ELSD法白头翁

白头翁皂苷D与不同血浆蛋白的结合率测定被引量：5: 2014年; 目的:研究白头翁皂苷D与不同血浆蛋白的结合率。方法:采用HPLC与平衡透析法相结合的方法测定白头翁皂苷D与牛血清、人血浆及大鼠血浆中蛋白的结合率,COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-甲酸(80∶20∶0.02),检测波长203 nm。结果:白头翁皂苷D质量浓度为0.06,0.11,0.25 g·L-1时与牛血清白蛋白的结合率分别为(78.45±0.89)%,(77.61±1.14)%,(77.16±0.29)%,与人血浆蛋白的结合率分别为(68.91±0.54)%,(67.68±0.87)%,(67.88±0.71)%,与大鼠血浆蛋白的结合率分别为(78.15±0.76)%,(78.61±0.97)%,(78.24±0.93)%。结论:建立的白头翁皂苷D蛋白结合率测定方法简便、稳定、可靠。白头翁皂苷D是一种中等程度的蛋白结合药物,结合率不具有质量浓度依赖性。; 饶小勇尹姗张尧罗晓健龚明冯育林杨世林; 关键词：蛋白结合率高效液相色谱法平衡透析法

白头翁皂苷D在大鼠肠道的吸收行为研究被引量：8: 2013年; 目的考察白头翁皂苷D在大鼠肠道的吸收特性。方法采用大鼠在体单向肠灌流模型考察白头翁皂苷D在大鼠肠道的吸收情况,HPLC法测定肠灌流液中的白头翁皂苷D,以白头翁皂苷D的吸收速率常数(Ka)和表观渗透系数(Papp)为指标,考察吸收部位、药物浓度、pH值和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对白头翁皂苷D吸收的影响。结果白头翁皂苷D灌流液在各肠段的Ka和Papp值为结肠>回肠>空肠>十二指肠,且各肠段之间存在显著差异(P<0.05);随着pH值不断增加,Ka和Papp值也随之增加,且Ka和Papp均存在显著差异(P<0.05);不同质量浓度(0.30、0.15、0.08 mg/mL)的灌流液在结肠的吸收无显著差异;灌流液中含P-gp抑制剂与不含P-gp抑制剂的白头翁皂苷D的肠吸收存在显著差异(P<0.05)。结论白头翁皂苷D在大鼠各肠段均能较好地被吸收,吸收窗主要在结肠;一定范围内的药物质量浓度对白头翁皂苷D的Ka和Papp无明显影响,初步确定其吸收机制为被动扩散;白头翁皂苷D是P-gp的底物,且存在转运蛋白饱和现象。; 饶小勇龚明尹姗罗晓健简晖冯育林杨世林; 关键词：肠吸收 P-糖蛋白

UV法测定白头翁提取物中总皂苷含量的不确定评定被引量：5: 2015年; 目的建立紫外分光光度(UV)法测定白头翁提取物中总皂苷的方法,并对结果进行不确定度评定。方法采用UV法,进行方法学验证并测定总皂苷,对测定结果进行不确定度评定,分别对来自对照品溶液配制、供试品溶液配制、样品重复性、标准曲线拟合及回收率等因素所引入的不确定度进行评估,由此计算合成不确定度,最终给出测量结果。结果白头翁提取物中总皂苷经不确定度评定表明其含量测定结果在95%置信区间下的扩展不确定度为(75.27±5.42)mg·g-1。结论建立的不确定度评定法能为紫外分光光度法测定中药有效成分的不确定分析提供参考。; 邓中华俞冰荟李新南杨世林冯育林饶毅魏惠珍; 关键词：总皂苷紫外-可见分光光度法不确定度评定

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江西省优势科技创新团队计划项目(2010DQB01700)

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