国家自然科学基金(39970170)
- 作品数：5 被引量：21H指数：2
- 相关作者：陈保生薛红曾武威鄢盛恺祝学卫更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院北京生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 汉族人载脂蛋白B基因EcoRⅠ MspⅠ多态性与冠心病的关系研究被引量：15
- 2003年
- 目的 探讨我国北方地区汉族人载脂蛋白B(apoB)基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性与冠心病的关系。方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,检测了 12 0名对照组和 137例冠心病组apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性基因型和等位基因频率分布。研究了apoB基因多态性对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响。结果 冠心病组与对照组apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性基因型和等位基因频率分布差异无显著性 ,且与性别、家族史、吸烟史、体重指数及冠脉病变程度无明显关系。两组间罕见的E -和M -等位基因存在连锁不平衡。冠心病组中E -等位基因携带者血清血清总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL C)明显高于仅含E +等位基因者。M -等位基因与各项血脂水平无明显相关性。结论 apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性对人群血脂水平有一定影响 ,但不是我国北方地区汉族人冠心病发生的独立危险因素。
- 鄢盛恺李秀玲薛红宋耀虹杨树德陈保生
- 关键词：汉族人载脂蛋白B基因多态性冠心病聚合酶链反应
- 组织因子功能的多样性被引量：1
- 2002年
- 组织因子(TF)是一个分子量为47kD的跨膜糖蛋白。作为凝血因子FⅦ/FⅦa的受体在引发凝血中起着非常重要的作用。近几年陆续发现TF还在肿瘤血管形成、肿瘤迁移、信号转导、炎症、动脉粥样硬化及胚胎发育等方面都有一定作用。但其机制仍知之甚少。有些是TF与凝血因子FⅦ/FⅦa结合后继发的效应,有些则是非Ⅶ依赖性的。本文就TF的这些功能做一综述,并初步探讨了其机制及相应的治疗策略。
- 白玲陈江曾武威吴刚陈保生
- 关键词：多样性糖蛋白
- 人载脂蛋白A-Ⅰ半胱氨酸突变体的二级结构和脂质结合能力的比较被引量：1
- 2005年
- 为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体,分别为apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),和apoA-Ⅰ(L195C).观察比较各种野生型及突变apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量和二级结构稳定性及其脂质结合能力.结果显示,野生型apoA-Ⅰ,apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),apoA-ⅠMilano和apoA-Ⅰ(L195C)的α螺旋含量分别为54±4%,49±4%,50±2%,51±6%,56±4%,52±3%,和54±1%,各种蛋白的α螺旋含量无显著性差异(P>0.05).野生型apoA-Ⅰ的变性标准自由能(ΔG0D)为10.5kJ/mol;apoA-Ⅰ(S52C)和apoA-ⅠMilano的ΔG0D比野生型低2.1kJ/mol;而apoA-Ⅰ(K129C)的ΔG0D比野生型apoA-Ⅰ高1.6kJ/mol.与野生型apoA-Ⅰ相比,apoA-Ⅰ(K129C)和apoA-Ⅰ(L195C)两个突变体与脂质结合能力明显下降(P<0.05),而其它半胱氨酸突变体(包括apoA-ⅠMilano)在脂质结合动力学方面与野生型apoA-Ⅰ无明显差异.以上结果提示,不同位点发生的半胱氨酸突变对apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量无明显影响,但对蛋白的二级结构稳定性和脂质结合能力影响不尽相同.
- 祝学卫吴刚曾武威薛红陈保生
- 汉族人载脂蛋白B基因3′端可变数目串联重复序列与冠心病的关系研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨汉族人载脂蛋白 (apo)B基因 3′端可变数目串联重复序列 (3′VNTR)多态性与冠心病的关系。方法 应用聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳技术检测了 137例冠心病患者和12 0例健康对照组apoB基因 3′VNTR多态性基因型 ,探讨了apoB基因多态性对血脂水平的影响。结果 冠心病组 3′VNTR B(大等位基因 )频率明显高于对照组 (10 95 %比 5 0 0 % ,P <0 0 5 ) ,且与性别、家族史、吸烟史、体重指数及冠状动脉病变程度无明显关系。冠心病组中 3′VNTR B等位基因携带者血清总胆固醇 (TC)明显高于不含 3′VNTR B等位基因者 ,而高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)明显低于不含 3′VNTR B等位基因者。Logistic回归分析显示 ,年龄、吸烟、家族史、3′VNTR、TC、甘油三酯 (TG)和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)是冠心病发生的独立危险因素。结论 apoB基因 3′VNTR多态性对人群血脂水平有影响 ,3′VNTR B等位基因可能与汉族人冠心病的发生相关联。
- 鄢盛恺杜珙薛红严晓伟朱文玲陈保生
- 关键词：汉族载脂蛋白B基因串联重复序列冠心病
- 人载脂蛋白A-I的原核表达及二级结构和功能鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的为获得高产量并具有正常结构和生物学活性的原核表达人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)。方法利用DNA重组技术对人apoA-Ⅰ的前8个氨基酸引入沉默突变,以pET-30b(+)为原核表达载体,在apoA-Ⅰ多肽链C-末端引入6×组氨酸标签,采用镍亲和层析对表达蛋白进行纯化。分别使用圆二色分析、浊度澄清试验和胆固醇外流试验对重组apoA-Ⅰ的α螺旋含量、脂质结合动力学及促细胞胆固醇外流能力进行评价。结果获得高表达产量的重组apoA-Ⅰ(12 mg纯化apoA-Ⅰ蛋白/L菌液);重组蛋白的α螺旋含量为(54±4)%,脂质结合动力学速率常数k1/2为0.059±0.002 min-1,胆固醇外流百分比为(16.68±1.77)%。结论可获得高产量并具有生物学活性的重组人apoA-Ⅰ;为构建apoA-Ⅰ其他突变体提供模式。
- 祝学卫吴钢曾武威薛红陈保生
- 关键词：原核表达
