江苏省环境监测科研基金(0714)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏省环境监测科研基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学医药卫生更多>>
- 酵母CYC1启动子TATA框对ERE调控的报告基因的影响被引量：1
- 2011年
- 人工合成两条雌激素效应元件(ERE)重复的核苷酸序列,并在5′和3′端设计HindⅢand SphⅠ黏性末端。将两条互补的ERE溶液加热至95℃,然后冷却至室温使其形成双股DNA,将双股ERE插入到pERE-CYC-yEGFP载体的细胞色素C(CYC1)启动子相应的酶切位点,生成pERE-CYC-αyEGFP载体。pERE-CYC-yEGFP和pERE-CYC-αyEGFP载体的不同之处是ERE位于CYC1启动子的位置,前者ERE下游的CYC1启动子含有α和β-TATA框,而后只含有-αTATA框。将两者分别转化于可表达人雌激素受体的酵母细胞,构建成两种受雌激素调控的重组酵母细胞。将该重组酵母细胞经6种不同的雌激素化合物作用4 h,发现重组pERE-CYC-αyEGFP的酵母细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达量与受试物间剂量效应关系较差,而含有pERE-CYC-yEGFP载体重组酵母细胞,与受试物具有明显的剂量效应关系。因此,在用于快速、高通量筛选雌激素类化合物生物评价中,其CYC1基本启动子中的α和-βTATA框是必须的。
- 谭明典罗方妮葛宜枝李晶晶徐海荣李湘鸣
- 关键词：酵母细胞绿色荧光蛋白生物评价
- 高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系被引量：7
- 2008年
- 以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系,用于快速筛选雌激素类化合物。在表达载体中,用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动α人雌激素受体基因(hERα)的表达;在报告载体中,用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中,构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞。该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后,发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系。与其他环境雌激素酵母评价体系相比,该重组酵母评价细胞,在应用时不需要破坏细胞壁,也不需要底物和相关试剂,可直接在96孔板中操作完成,具有快速、高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点。
- 李湘鸣罗方妮汪霄贾平张娟祝娉婷张惟立
- 关键词：环境雌激素酵母细胞雌激素受体绿色荧光蛋白
- 汞对斜生栅藻的急性毒性研究被引量：3
- 2010年
- 为研究水体中汞对斜生栅藻生长的影响,将斜生栅藻在含有不同浓度汞的培养液中培养,分别在24h、48h和96h测650nm的吸光度值,并对斜生栅藻中的汞浓度做了检测。结果表明,培养液中汞的存在对斜生栅藻生长均有抑制作用,并随浓度的递增,抑制作用增强,同时表明斜生栅藻对汞具有一定的富集作用。经Logist回归分析,求得24h、48h和96h汞抑制斜生栅藻生长的半数抑制浓度(IC50),分别为9.4471×10-6、8.8156×10-6和7.4648×10-6mol/L。
- 曹维维王恒李湘鸣罗方妮
- 关键词：斜生栅藻急性毒性
- 评价环境雄激素类化合物重组Lac Z报告基因酵母细胞的建立
- 2013年
- 目的建立环境雄激素内分泌干扰物酵母评价体系。方法以载体双表达的方式构建该重组基因酵母细胞。在表达载体中,用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动雄激素受体基因(AR)的表达,并使其与V5抗原表位相融合;在报告载体中,用雄激素效应元件(ERE)调控的Lac Z作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中,构建成雄激素调控的重组Lac Z基因酵母细胞。用不同浓度的雄激素[去氢表雄酮(DHT)和丙酸睾酮(TP)]和雌激素(雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇),对重组基因酵母细胞分别进行敏感度和特异度研究。结果去氢表雄酮和丙酸睾酮与该重组基因酵母细胞有明显的剂量效应关系,说明其具有良好的特异度,而与雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇5种雌激素化合物均无明显的剂量效应关系,说明其具有较强的特异性。结论该重组基因酵母细胞可用于对环境雄激素类化合物的筛选。
- 戴卫星杨晨罗方妮李姗姗黄仁华谢阳梅薛飞玥李湘鸣
- 关键词：酵母细胞雄激素受体
