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树状高聚物介导寡聚核苷酸转染人脑胶质瘤细胞的体外研究被引量：3: 2007年; 目的评价聚酰胺-胺型树枝状高聚物（PAMAM-dendrimer，PAMAM-D）作为靶向表皮生长因子受体（EGFR）的荧光标记反义寡核苷酸（ASODN）转染人脑恶性胶质瘤体外细胞系U251的可行性及优化方案。方法应用电泳结合实验筛选PAMAM-D与反义EGFR寡核苷酸最佳结合N／P比值，通过荧光显微镜动态观察、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）评价PAMAM-D转染相同剂量ASODN至人脑恶性胶质瘤体外细胞系U251的效果，噻唑蓝（MTT）染色法间接反映各转染试剂的细胞毒性。结果（1）电泳结合实验显示电荷比（N／P）大于16：1时ODN才能与PAMAM完全结合。（2）动态荧光显微镜观察发现PAMAM-D-ASODN呈颗粒状分布在细胞质内，而oligofectamin-ASODN形态均匀。（3）RT-PCR结果显示PAMAM-D和oligofectamin介导的靶向EGFR的ASODN转染的U251细胞的EGFR表达明显下调；MTT法分析证明PAMAM的细胞毒性与oligofectamin的基本相当（P〉0．05），PAMAM-D-ODN的毒性随电荷比的增大而增大。结论PAMAM-D可以作为寡聚核苷酸的投递载体成功转染人脑胶质瘤细胞。; 李菲康春生原续波浦佩玉王广秀盛京; 关键词：胶质瘤

聚酰胺-胺介导反义寡核苷酸转染增强脑胶质瘤细胞化疗敏感性被引量：1: 2008年; 以树形大分子聚酰胺-胺(PAMAM)为载体,与靶向表皮生长因子受体(EGFR)的反义寡核苷酸(ASODN)静电复合形成平均粒径为51 nm的复合体,以U251胶质瘤细胞为肿瘤细胞模型,研究了PAMAM介导ASODN体外瘤细胞转染效果.荧光倒置显微镜观察表明,纳米复合物可以被胶质瘤细胞吞噬.RT-PCR和免疫荧光结果表明,ASODN在瘤细胞内高效转染,使EGFR表达下调至9.04%,显著低于对照组92.32%.但是,EGFR表达下调只能使胶质瘤细胞有限凋亡.以ASODN/PAMAM预先处理胶质瘤细胞,再与卡氮芥联用,可明显增强BCNU对胶质瘤细胞的抑制效果,在同等瘤细胞抑制条件下,卡氮芥用量可降低5倍.; 原续波康春生李菲浦佩玉钟跃盛京; 关键词：聚酰胺-胺寡核苷酸胶质瘤转染化疗增敏

叶酸修饰后PAMAM介导反义寡聚核苷酸抑制C6鼠脑胶质瘤细胞EGFR表达的体外研究: ＜正＞在癌症的基因治疗中安全有效地基因载体的选择是至关重要的,非病毒载体以其安全性、其对运载的基因尺寸无限制、多次施药后宿主的免疫原性较小、具有靶向性、便于储存和大量制备成为了首选的基因载体。非病毒载体可以分为两类：阳离...; 康春生李菲张安玲原续波浦佩玉王广秀盛京; 文献传递

胆固醇疏水改性葡聚糖聚醛的pH响应性自组装被引量：2: 2006年; 由于双亲性聚合物的自组装行为受环境因素的控制，以胆固醇3-半琥珀酸酰氯与氧化葡聚糖反应，得到胆固醇疏水改性葡聚糖聚醛（CMDA），通过改变环境pH值，控制氧化葡聚糖醛基与烯醇基的转变，从而改变CMDA分子间相互作用，以荧光光谱、表面张力和浊度等方法研究分子间作用力的改变对双亲性聚合物自聚集行为的影响．结果表明，CMDA在水中自组装形成纳米自聚集体，在pH=4．0和pH=10．83溶液中CMDA的临界聚集量浓度值分别为0．002mg／mL和0．005mg／mL，比中性环境中的临界聚集量浓度（0．02mg／mL）低了1个数量级．3种pH条件下自聚集体溶液表面张力具有共同的变化趋势，但在酸性与碱性条件下具有更好的表面活性．在很宽的pH范围内（4．4～10．5）溶液浊度保持稳定，而当pH小于4．0时浊度快速增大，并在4．0时达到最高值，动态光散射粒径测试验证了浊度测试结果．; 原续波张志华张玉新顾鸣岐张鹏赵维盛京; 关键词：自聚集 PH值

反义miR-21增加U251脑胶质瘤细胞对5-氟尿嘧啶化疗敏感性的研究被引量：8: 2010年; 目的探讨as—miR-21增加U251脑胶质瘤细胞对5-FU化疗敏感性的效果。方法透析法制备5-FU／PAMAM载体，透射电镜观察形态，紫外分光光度计检测载药率和包封率；流式细胞仪检测转染效率并分析细胞凋亡比例；MTT法检测共转染后细胞生长抑制效果；免疫荧光检测Ki67和Bcl-2蛋白表达；Transwell检测细胞侵袭能力变化。结果纳米微粒形态规整；平均包封率为66．21％，平均载药量为31．77％；PAMAM转染效率为70．53％；共转染组细胞生长显著抑制（F=273．345，P=0．000）；凋亡比例升高（F=43．21，P=0．000），Ki67、Bcl-2表达均下调；细胞侵袭能力显著下降。结论PAMAM可以有效同载as—miR-21和5-FU，且更加有效地抑制U251脑胶质瘤细胞的体外生长并增加对5-FU的化疗敏感性。; 任玉周旋原续波许鹏王广秀贾志凡张安玲韩磊浦佩玉康春生; 关键词：PAMAM

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国家自然科学基金(50573056)