广东省自然科学基金(7001624)
- 作品数：5 被引量：34H指数：3
- 相关作者：李建国李依群颛孙永勋莫晓能张炜更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院广州医学院第一附属医院广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的建立一种从小鼠骨髓中分离培养间充质干细胞(MSCs)的高效方法。方法采取贴壁细胞分离法分离和纯化小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs),检测mMSCs在不同诱导条件下向成骨细胞及脂肪细胞分化能力,用流式细胞术及显微镜分别检测mMSCs纯度和形态特征。结果mMSCs贴壁生长后形态较均一,细胞形态呈成纤维细胞样,流式细胞术检测:CD45、CD11b、CD44及CD29分别为(3.34)%、(2.41)%、(98.46)%及(99.36)%。第4代mMSCs经诱导后可向成骨细胞和脂肪细胞分化。结论通过贴壁培养可以从小鼠骨髓中分离培养出高纯度mMSCs,该方法效率高,稳定性好。
- 李建国颛孙永勋冉丕鑫张炜莫晓能吴浩李依群
- 关键词：骨髓间充质干细胞小鼠细胞培养
- 骨髓间充质干细胞对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及气道炎症的影响被引量：16
- 2008年
- 背景:CD4+CD25+调节性T细胞功能降低、数量下降已被公认为是哮喘患者免疫失调的重要表现。间充质干细胞具有免疫调节功能,可上调CD4+CD25+调节性T细胞,抑制淋巴细胞增殖,并已在许多免疫性疾病方面成功应用。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对哮喘小鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞及气道炎症的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/2008-05在中山大学附属第二医院中心实验室完成。材料:SPF级BALB/c小鼠34只,其中3～4周龄雄鼠4只,用于制备骨髓间充质干细胞;6周龄雌鼠30只,随机分为正常对照组、模型对照组、细胞移植组,10只/组。方法:模型对照组、细胞移植组以500mg/L卵白蛋白溶液0.2mL腹腔注射致敏,以50g/L卵白蛋白溶液雾化吸入激发建立小鼠哮喘模型。正常对照组以生理盐水代替卵白蛋白溶液,细胞移植组在诱导哮喘的第10天经尾静脉注入体外分离培养的小鼠骨髓间充质干细胞。主要观察指标:流式细胞仪检测小鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例,并检测小鼠支气管肺泡灌洗液中的炎症细胞总数,计数嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞,结合病理切片分析气道炎症情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组外周血CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例明显降低(t=7.742,P<0.05);与模型对照组比较,细胞移植组该比例明显升高(t=7.455,P<0.05)。3组小鼠支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数比较差异显著(P均<0.05);两两比较,模型对照组支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数高于正常对照组(P<0.05),细胞移植组支气管肺泡灌洗液炎症细胞总数低于模型对照组(P<0.05)。正常对照组小鼠气道无明显炎症改变;模型对照组小鼠支气管、血管粘膜下和周围肺组织有明显炎症细胞浸润、气道上皮增生、气道黏液增多、气�
- 李建国颛孙永勋冉丕鑫张炜莫晓能吴浩李依群
- 关键词：骨髓间充质干细胞调节性T细胞哮喘免疫调节
- 肺癌患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞检测的临床意义被引量：10
- 2009年
- 目的:探讨肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的比例变化及其在肿瘤发生发展中的作用。方法:应用流式细胞术检测78例肺癌患者和30例健康者CD4+CD25+Treg比例,分析其与肺癌的临床分期、病理类型、组织学分化程度及手术的关系。结果:肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg比例与健康对照组比较,差异有统计学意义,t=2.316,P=0.04。Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者Treg比例显著高于Ⅰ+Ⅱ期患者,t值分别为2.205和2.207,P值均为0.04。鳞癌、腺癌、小细胞肺癌高、中和低分化肺癌患者Treg比例显著高于对照组,P<0.05。手术后的肺癌患者Treg比例为(14.38±3.82)%,显著低于手术前的(20.16±5.24)%,t=1.823,P=0.05。结论:肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg水平明显升高,且与肺癌的进展密切相关,越晚期水平越高;手术后肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg水平明显下调。
- 冯素玲李建国罗泽如王敏李依群
- 关键词：肺肿瘤T淋巴细胞流式细胞术
- 哮喘小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞与气道炎症反应的关系被引量：1
- 2009年
- 目的观察哮喘小鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量的改变及其与气道炎症反应的关系。方法健康6周龄SPF级BALB/c小鼠20只,随机分为2组:正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组),B组以卵白蛋白(OVA)致敏激发方法建立小鼠哮喘模型;流式细胞术检测小鼠外周血CD4+CD25+Treg占淋巴细胞的比例;检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞数;BALF炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞数分别与外周血CD4+CD25+Treg作相关分析。结果A组、B组小鼠外周血CD4+CD25+Treg占淋巴细胞比例分别为(5.81±0.76)%、(3.21±0.74)%,差异有统计学意义(P<0.05)。BALF炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞数与外周血CD4+CD25+Treg呈负相关,相关系数分别为-0.929和-0.920,差异有统计学意义(P<0.001)。结论哮喘小鼠外周血CD4+CD25+Treg占淋巴细胞比例较正常对照组显著减少,且与哮喘小鼠气道炎症反应密切相关。
- 颛孙永勋李建国冉丕鑫张炜莫晓能吴浩李依群
- 关键词：调节性T细胞哮喘小鼠
- 肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测及意义被引量：2
- 2009年
- 目的研究肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的比例变化，探讨其与肺癌的临床分期、病理类型及组织学分化程度的相关性。方法采用流式细胞术检测78例肺癌患者（肺癌组）和30例健康对照者（健康对照组）外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果肺癌组外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4’T细胞的比例为（21．07±5．26）％，与健康对照组（10．04±2．75）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（22．46±4．35）％、（24．35±6．20）％，显著高于Ⅰ期＋Ⅱ期肺癌患者（12．89±3．19）％及健康对照组（10．04±2．75）％相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；鳞癌、腺癌、小细胞肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（20．75±4．85）％、（21．52±5．26）％、（19．20±6．41）％，与健康对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），但不同病理类型的肺癌患者间外周血CD4^＋CD25^＋Treg比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；高分化、中分化、低分化肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例分别为（20．36±3．12）％、（21．11±4．67）％、（21．30±5．75）％，显著高于对照组（P〈0．05），但不同分化程度的各肺癌者间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg水平明显升高，且与肺癌的进展密切相关，但与病理类型、组织学分化程度无关。
- 冯素玲李建国罗泽如颛孙永勋李依群
- 关键词：肺癌调节性T细胞生物学检测
