国家自然科学基金(30670687)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：马端罗心平沈伟施海明林伊凤更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 兔股动脉粥样硬化斑块模型中TF及TFPI的变化被引量：2
- 2008年
- 目的:观察兔股动脉粥样硬化斑块发展过程中斑块内组织因子(TF)及组织因子途经抑制物-1(TFPI-1)、组织因子途经抑制物-2(TFPI-2)的变化。方法:新西兰雄兔通过高脂饲养合并股动脉球囊损伤建立动脉粥样硬化斑块模型。在建模8周、10周和12周,分别截取球囊损伤处股动脉标本,检测斑块组织内TF、TF-PI-1和TFPI-2的蛋白表达;并测定斑块内TF、TFPI-1和TFPI-2的mRNA水平。结果:自8周、10周到12周,血管斑块中TF、TFPI-1和TFPI-2的观测区域内阳性染色面积均逐渐增加。自8周、10周到12周,血管斑块中TF的mRNA水平和TFPI-1的mRNA水平均逐渐增加;TFPI-2mRNA表现为前期无明显变化,12周时显著下调。结论:在兔股动脉粥样硬化斑块的形成过程中,随着斑块内TF基因及蛋白表达的增加,TFPI-1和TFPI-2反应性表达增加,但其表达水平未能完全抑制斑块的进展。
- 黄成磊罗心平李剑梁旺林伊凤金波沈伟施海明马端
- 关键词：动脉硬化
- 组织因子途径抑制物-2的时间分辨荧光免疫测定方法的建立及评价被引量：1
- 2011年
- 目的建立测定血液中组织因子途径抑制物-2（tissue factor pathway-2,TFPI-2）含量的时间分辨荧光免疫测定方法（time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA）。方法以兔抗人TFPI-2多克隆抗体作为固相抗体,单克隆抗体3C8作为第一抗体,原核表达的人TFPI-2作为标准品,Eu3＋标记的羊抗鼠单克隆抗体作为检测抗体,采用双抗体夹心法建立TFPI-2 TRFIA分析系统,并与酶联免疫吸附法（ELISA）进行比较。结果自制TFPI-2 TRFIA试剂标准曲线的线性范围为0.1~50 ng/mL,灵敏度为0.048 ng/mL,批内和批间变异系数均≤8.39%。应用该方法测定56例冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease,CHD）患者及24例正常体检者血浆中的TFPI-2分别为（10.58±7.12）和（8.53±2.32）ng/mL。结论我们建立的TFPI-2 TRFIA分析方法与ELISA相比灵敏度更好,定量检测结果能够敏感准确地反映血液内TFPI-2的浓度变化,特异性和稳定性均符合要求。
- 蒋芳林刘静王慧君张进罗心平马端
- 关键词：组织因子途径抑制物-2酶联免疫吸附法冠状动脉粥样硬化性心脏病
- 组织因子途径抑制物-1血管条件性基因敲除小鼠表型和功能分析
- 目的:组织因子途径抑制物-1(TFPI-1)主要由微血管内皮细胞表达,其基本生理功能是能阻断TF启动的凝血途径。此外,在肿瘤转移、炎症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病及弥漫性血管内皮凝血中扮演重要角色。但是,由于传统敲除TF...
- 温丹萍王际平王慧君张进梁菲杨晓费俭王铸钢马端
- 关键词：凋亡血管内皮细胞平滑肌细胞
- 文献传递
- 基因沉默技术在斑马鱼研究中的应用
- 2009年
- 模式生物斑马鱼主要应用于探索遗传学、发育生物学和分子生物学等研究领域的分子机制，常用的研究策略是DNA诱变和基于RNA的基因沉默。但化学诱变技术和传统反义核酸技术存在缺陷，目前在应用中已受到很大限制。反义morpholino技术具有稳定、方便的特点，广泛应用于斑马鱼基因功能的研究。新兴的锌指核酶基因敲除技术不依赖于胚胎干细胞使其前景更为广阔。
- 张艳丽马端
- 关键词：斑马鱼基因沉默转基因技术反义技术
- 锌指核酶技术的原理及应用被引量：1
- 2010年
- 锌指核酶（zinc fingernueleases，ZFNs）是将锌指蛋白的DNA识别域和非特异性核酸内切酶Fok I人工连接而构成的一种核酶。1对ZFNs能在DNA上产生双链断裂（double—strand breaks，DSB），诱导细胞发生同源重组（homology recombination，HR）或非同源末端连接（nonhomologous end joining，NHEJ）。最近锌指核酶技术在基因功能的研究中受到重视。作者就ZFNs的作用原理、关键技术及其应用领域进行介绍。
- 邓珊珊王颖芝马端
- 关键词：基因沉默基因治疗
