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湖南省科技计划项目(05Fj3073)

作品数:2 被引量:3H指数:1
相关作者:罗红胡冬煦陈平更多>>
相关机构:中南大学湘雅二医院更多>>
发文基金:湖南省科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇氧化酶
  • 2篇细胞
  • 2篇环氧化酶
  • 2篇环氧化酶2
  • 2篇A549细胞
  • 2篇COX-2表...
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇SIRNAS

机构

  • 2篇中南大学湘雅...

作者

  • 2篇陈平
  • 2篇胡冬煦
  • 2篇罗红

传媒

  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇中南大学学报...

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
D-siRNAs抑制A549细胞COX-2表达
2008年
目的长片段双链COX-2RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA(D-siRNAs)抑制A549细胞COX-2的表达。方法(1)IL-1β5 g/L干预A549细胞,Western blot法观察其COX-2蛋白表达的时间依赖性。(2)Trizol法抽提A549细胞总RNA,RT-PCR扩增COX-2基因。(3)设计两端带T7 promoter,SP6 promoter的COX-2cDNA的PCR引物,通过PCR方法,获得两端带T7及SP6 promoter的COX-2DNA。(4)用RiboMAX Large Scale RNA Produc-tion Systems-SP6 and T7试剂盒体外将COX-2DNA转录为RNA。(5)长片段COX-2RNA经Dicer酶消化为小RNA(D-siRNAs)。(6)用TransMessenger Transfection Reagent将D-siRNAs转染A549细胞。(7)COX-2mRNA表达用RT-PCR检测,细胞培养上清液中PGE2含量用ELISA测定。结果(1)IL-1β干预A549细胞9 h后COX-2表达到高峰。(2)在体外,长片段COX-2dsRNAs经Dicer酶消化获得D-siRNAs。(3)D-siRNAs可有效抑制A549细胞COX-2的表达并降低PGE2的分泌。结论长片段双链COX-2RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA可有效抑制A549细胞COX-2的表达。
罗红胡冬煦陈平
关键词:环氧化酶2A549细胞RNA干扰
抑制A549细胞COX-2表达的D-siRNAs的合成被引量:3
2007年
目的:利用长片段双链RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA(D-siRNAs)的方法合成抑制A549细胞COX-2表达的siRNAs,以期获得治疗气道炎症和肿瘤的一种新思路。方法:用RiboMAX Large Scale RNA Production Systems-SP6 and T7试剂盒体外将COX-2DNA转录为RNA。长片段COX-2RNA经Dicer酶消化为小RNA,纯化并获取小RNA(D-siRNAs)。结果:在体外,长片段双链A549细胞COX-2的RNA经Dicer酶消化后可成功获得抑制A549细胞COX-2表达的小RNA。结论:在体外,长片段dsRNAs经Dicer酶消化可成功获得21~23个碱基的小RNA。
罗红胡冬煦陈平
关键词:环氧化酶2A549细胞
共1页<1>
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