国家自然科学基金(20905017)
- 作品数：20 被引量：109H指数：8
- 相关作者：王小如陈军辉史倩赵恒强郑立更多>>
- 相关机构：国家海洋局第一海洋研究所厦门大学中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学环境科学与工程生物学更多>>
- 高效液相色谱-紫外/质谱评价海洋天然产物体外抑制环氧合酶2活性方法研究被引量：2
- 2019年
- 目的建立基于高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)和高效液相色谱-多级离子阱质谱分析(HPLC-ITMS/MS)的海洋天然产物体外抑制COX-2酶的活性评价方法。方法采用Agilent Poroshell 120C18色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液为高效液相色谱流动相,二元等度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,检测波长210nm,进样量10μL;质谱条件下,流动相改为乙腈-0.05%乙酸水溶液,进样量为1μL,选用ESI离子源,负离子电离模式,喷雾气压35psi,干燥气(N2)流速12L·min^-1,干燥气温度350℃。结果建立的高效液相色谱-紫外和高效液相色谱-多级离子阱质谱法精密度和稳定性良好,对比两者测定酶底物花生四烯酸的适用性显示,基于HPLC-UV的评价方法适用极性较大的天然产物粗提物;HPLC-IT-MS/MS法则因其抗干扰能力强,适用于复杂体系中极性较弱的活性物质的检测。以建立的HPLC-UV和HPLC-IT-MS/MS方法对海洋天然产物的COX-2酶抑制活性进行评价,天然产物粗提物中黄海葵Anthopleura lanthogrammica Berkly乙醇粗提物和弯孢菌Curvularia lunata strain L2744发酵液粗提物对COX-2酶抑制作用较为明显,抑制率分别为70.1%和25.48%。结论建立的评价方法具有适用性强、结果可靠等优点,有望为天然产物粗提物中COX-2酶抑制剂体外筛选提供技术参考。
- 史倩陈军辉张大海郑立李先国
- 关键词：环氧合酶2抑制剂筛选
- 崂山酸枣叶茶中芦丁含量测定及芦丁利用研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨一种简单、准确测定酸枣叶茶中芦丁含量的HPLC法,并对崂山酸枣叶茶中芦丁的含量及其利用率进行了初步研究。方法在优化获得的最佳色谱分离条件下(选用高碳载量反相C18柱,特定比例乙腈-水为流动相),实现酸枣叶茶中芦丁及其异构体的基线分离。结果方法的线性范围为0.02μg^5.00μg,检测限达6.6 ng,能满足实际样品的检测要求。五个崂山酸枣叶茶样品中芦丁的含量在11.3 mg/g^17.9 mg/g范围内,表明崂山酸枣叶茶中芦丁含量较高;崂山酸枣叶茶用热水冲泡2~3次,芦丁的浸出率高达60%~70%,饮用2.0 g酸枣叶茶所摄取的芦丁即相当于服用1.2片复方芦丁片。结论饮用酸枣叶茶而摄入的芦丁量较高,对人体的多种保健作用不能忽略。
- 张茹潭陈军辉史倩李兆永郑立王小如
- 关键词：关键词酸枣叶芦丁高效液相色谱
- 非水反相高效液相色谱法测定海藻中3种叶黄素类化合物被引量：1
- 2012年
- 建立了非水反相高效液相色谱测定不同种类海藻中3种叶黄素类化合物的方法。采用超声波辅助提取海藻中的叶黄素类化合物,选用Alltima C18色谱柱分离,以甲醇-乙腈-丙酮为流动相系统,梯度洗脱分离,检测波长445 nm。结果表明,在选定的色谱条件下,待分析的3种叶黄素类化合物与其他化合物分离良好,在一定浓度范围内线性关系良好(紫黄素:6.24～624μg/L,环氧玉米黄素:4.56～456μg/L,玉米黄素:5.60～560μg/L)。该方法适用于不同海洋藻类中3种叶黄素类化合物的定量分析。
- 张茹潭陈军辉史倩李鑫陈晨王帅王小如
- 关键词：海洋藻类
- 色谱及其联用技术在海洋药用生物核苷类化合物筛选排重方面的应用被引量：1
- 2014年
- 为了解决天然产物化学研究中核苷类化合物重复提取、分离、纯化和表征等问题,避免人力物力的大量消耗并提高新化合物的发现效率,对已知核苷类化合物的快速鉴别、排重显得尤为重要。本文以笔者所在课题组取得的研究成果为例,从高效液相色谱、高效液相色谱-质谱联用、毛细管电泳和毛细管电泳-质谱联用等4种色谱及其联用技术,对海洋生物中核苷类化合物快速鉴别、排重方法进行了系统介绍。上述方法可以实现对海洋药用生物粗提物中常见核苷类化合物的快速筛选、排重,避免对已知成分繁杂的分离纯化、结构鉴定过程,为海洋天然产物化学研究提供了1种新思路。
- 史倩陈军辉张茹潭李鑫李先国王小如
- 浒苔叶绿素铜钠盐的制备研究初探被引量：3
- 2012年
- 目的对浒苔为原料制备叶绿素铜钠盐的可行性进行了初步研究,为浒苔天然叶绿素的开发提供实验依据。方法采用先皂化后铜代的工艺制备浒苔叶绿素铜钠盐,通过紫外-可见吸收光谱及红外光谱对制备的叶绿素铜钠盐进行鉴定,并考察热、光、酸、碱等条件对叶绿素铜钠盐溶液稳定性的影响。结果制备得到的浒苔叶绿素铜钠盐为带金属光泽的墨绿色粉末状物,易溶于水,微溶于甲醇、乙醇和氯仿;在90℃以下热稳定性较好,在一定的酸、碱性条件下稳定性良好,但其耐光性较差。结论浒苔有望成为叶绿素铜钠着色剂开发的良好原料。
- 陈晨陈军辉程红艳李鑫史倩郑立王小如
- 关键词：浒苔叶绿素天然色素
- 高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱鉴别柄海鞘中的多种化合物及其特征图谱被引量：10
- 2010年
- 本文建立了高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(HPLC-ESI-TOF/MS)联用技术用于海洋天然药物柄海鞘多种化学成分快速鉴定及其特征图谱研究的方法。对柄海鞘药材进行超声波辅助提取,采用HPLC-ESI-TOF/MS对柄海鞘水提物中多种化合物进行分析,鉴定出柄海鞘水提物中的10种化合物;在化合物鉴定的基础上,建立了柄海鞘药材的HPLC特征图谱,并发现不同批次柄海鞘的质量存在差异。结果表明,本方法可用于柄海鞘药材有效成分的快速鉴定及质量控制。
- 程红艳陈军辉杨黄浩赵恒强张道来王小如
- 关键词：柄海鞘
- 反相高效液相色谱-电喷雾质谱法测定浒苔中的叶黄素被引量：12
- 2010年
- 建立反相高效液相色谱-电喷雾电离质谱法(RP-HPLC-DAD-ESI-MS)定性、定量测定绿潮藻浒苔中叶黄素的新方法。浒苔样品经超声辅助提取后,采用RP-HPLC-DAD-ESI-MS联用技术对其进行分离鉴定,HPLC采用Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以含0.2%乙酸的甲醇溶液-水为流动相,线性梯度洗脱,检测波长450nm。在选定的最佳仪器条件下,叶黄素与浒苔中的其他化合物分离良好,叶黄素在0.10～20.0mg/L质量浓度范围内具有良好的线性关系(R2=0.9994),能对浒苔提取液中的叶黄素进行准确定量;采用电喷雾质谱联用分析能快速获得叶黄素的分子量信息,可为浒苔中叶黄素的快速鉴别提供依据。
- 程红艳陈军辉赵恒强史倩王小如臧家业
- 关键词：浒苔叶黄素
- 基于精确质量数筛选的亲水作用色谱-高分辨质谱法快速鉴别赤潮藻中的麻痹性贝毒素被引量：4
- 2013年
- 采用亲水作用色谱-高分辨电喷雾质谱联用技术(HILIC-HR-ESI/MS)结合麻痹性贝毒素(PSP)精确质量数数据库,建立快速筛查、定性识别赤潮藻中各种常见PSP的方法。产毒藻细胞破碎后经0.1 mol/L乙酸溶液提取,通过HILIC-HR-ESI/MS正负离子模式全扫描分析,得到产毒藻粗提物中PSP化合物准分子离子及主要碎片离子精确质量数,结合PSP数据库筛查并辅以商品化软件数据分析,实现产毒藻所含PSP的快速定性识别。所建数据库包含25种常见PSP化合物精确分子质量及碎片离子信息,所发展的HILIC-HR-ESI/MS方法分离度高、灵敏度好,所考察的10种常见PSP化合物检测限在10～80 nmol/L范围内,能满足产毒藻实际样品的分析要求。3种产毒藻实际样品筛查、分析结果良好,说明本方法是赤潮藻中麻痹性贝毒素快速筛选、定性识别的有效方法。
- 李兆永陈军辉李鑫张茹潭陈晨史倩王帅郑立王小如
- 关键词：赤潮麻痹性贝毒素亲水作用色谱高分辨质谱
- 基于固定化酶的乙酰胆碱酯酶抑制剂体外筛选模型的建立被引量：1
- 2013年
- 以可重复使用的固定化酶代替游离态酶,建立一种基于比色分析的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂体外筛选新模型.采用以氨基化硅胶为载体固定的AChE优化了实验条件,用AChE抑制剂阳性对照物他克林和毒扁豆碱对该模型进行验证,还对模型技术参数进行评价,并将新模型用于单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制活性评价.结果表明,最佳实验条件为:固定化酶用量55μL,底物浓度5 mmol/L,甲醇、乙醇及体积分数不高于6%的二甲基亚砜水溶液均可作为样品溶剂;模型验证及模型技术参数评价结果良好,该模型对AChE抑制剂筛选有较好的特异性和灵敏度,可用于筛选AChE抑制剂.该模型具有适用性强、固定化酶可重复使用及结果可靠等优点,是单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制剂活性评价的有效方法.
- 陈晨史倩陈军辉张茹潭李鑫郑立王小如
- 关键词：固定化酶乙酰胆碱酯酶抑制剂
- 反相高效液相色谱法同时测定罗氏海盘车中的7种核苷化合物被引量：9
- 2010年
- 建立了罗氏海盘车中7种核苷化合物的反相高效液相色谱分析测定方法。采用超声波辅助提取,选用两根不同的C18色谱柱串联,以甲醇和0.2%(体积分数)乙酸/水溶液为流动相梯度洗脱分离。优化的色谱条件为:柱温为室温,检测波长为260nm,流速为0.8mL/min,进样量为20μL。结果表明,7种核苷化合物在一定的浓度范围内线性关系良好,次黄嘌呤和胸苷的线性范围为0.65～40mg/L,尿苷、黄嘌呤和肌苷的线性范围为0.80～40mg/L,胸腺嘧啶的线性范围为1.15～40mg/L,鸟苷的线性范围为0.50～40mg/L。样品中7种核苷化合物的加标回收率为90.00%～105.00%,相对标准偏差为0.72%～3.23%。该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,回收率高,适用于罗氏海盘车中7种核苷类成分的同时分析,也可用于罗氏海盘车的质量控制和综合评价。
- 张道来陈军辉周明史倩赵恒强程红艳杨黄浩王小如
- 关键词：反相高效液相色谱核苷罗氏海盘车
