国家自然科学基金(30470386)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 泉古菌Sulfolobus tokodaii RadA同系物stRad55B与RadA的共表达及其对RadA重组活性的抑制
- 2008年
- ST0838(定义为stRad55B)是超嗜热古菌(Sulfolobus tokodaii)编码的4个RadA的同系物(或Rad55同源蛋白)之一.研究发现,它能够被紫外线(UV)辐射损伤诱导,可能参与了细胞内的DNA损伤修复过程,然而利用常规方法,该蛋白不能体外可溶性地表达.通过和RadA共表达,得到了具有热稳定性的可溶stRad55B蛋白,并对其活性进行了初步检测.stRad55B优先结合单链DNA,并且具有不依赖DNA的ATP酶活性.另外,DNA链交换实验发现stRad55B能够明显抑制RadA催化的链重组活性,表现出一个重组修复系统抑制蛋白的特征.实验结果为进一步研究古菌中RadA同系蛋白的功能以及相互作用机制,揭示古菌DNA同源重组修复机理提供了依据.
- 盛多红李铭峰焦建东倪金凤申玉龙
- 关键词：古菌RADA共表达
- 超嗜热古菌Sulfolobus tokodaii RadA蛋白的克隆表达及其辐射可诱导性被引量：3
- 2008年
- RecA/Rad51/RadA家族蛋白是细胞内重要的重组修复蛋白,在功能上非常保守。研究发现在细菌、真核生物、甲烷古菌和嗜盐古菌细胞内RecA/Rad51/RadA均可以受紫外线辐射诱导转录。而对极端嗜热古菌中的RadA辐射可诱导性仍存在争议。通过体外表达极端嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的RadA蛋白,制备抗体,利用免疫学方法并结合RT-PCR分析,对嗜热古菌S.tokodaii中RadA的辐射诱导进行了研究。经过100J/m2和200J/m2UV辐照处理,radA基因的转录分别上调了2倍和3倍,同时RadA蛋白的表达分别上升了1.5倍和1倍。实验结果表明S.tokodaii中RadA可以被紫外线辐射诱导表达,证实了极端嗜热古菌S.tokodaii细胞中存在DNA损伤诱导反应的观点。
- 盛多红朱珊珊李铭峰焦建东倪金凤申玉龙
- 关键词：嗜热古菌RADADNA修复
