国家自然科学基金(30670890)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 不同来源基质细胞对骨髓瘤KM3细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察人脐血基质细胞及骨髓瘤患者骨髓基质细胞对骨髓瘤KM3细胞生物学特性的作用。方法体外分离培养骨髓瘤骨髓基质细胞和人脐血源基质细胞,与骨髓瘤KM3细胞共培养。采用扫描电镜观察共培养后基质细胞和KM3细胞的位相关系;应用CCK-8、PI染色流式细胞仪和AnnexinV/PI双标法检测不同培养条件下KM3细胞的增殖、细胞周期和凋亡率。结果人脐血基质细胞比骨髓瘤患者骨髓基质细胞有更强的抑制KM细胞增殖的作用;共培养后骨髓瘤患者骨髓基质细胞使KM3细胞阻滞于G0/G1期[(59.70±1.28)%],人脐血基质细胞使S期的KM3细胞比例增高[(46.07±2.46)%];KM3/MM-BMSCs组KM3细胞凋亡率为(3.26±0.12)%明显低于KM3/hUCBDSCs组KM3细胞凋亡率(4.76±0.12)%(P<0.01);KM3/MM-BMSCs组KM3细胞BaxmRNA的表达较KM3/hUCBDSCs组明显下降(P<0.01);KM3/hUCBDSCs组KM3细胞Bcl-2mRNA的表达较KM3细胞悬浮培养组下降(P<0.05),KM3/MM-BMSCs组KM3细胞Bcl-2mRNA的表达则明显升高,为悬浮培养组的1.982倍(P<0.01)。结论骨髓瘤基质细胞微环境抑制骨髓瘤细胞凋亡和死亡;而人脐血源基质细胞有更强的抑制骨髓瘤细胞增殖的作用,并促进其凋亡。
- 高力张曦高蕾陈幸华
- 关键词：多发性骨髓瘤人脐血基质细胞骨髓基质细胞
- 多发性骨髓瘤骨髓基质细胞IL-6和TNF-α的表达及其临床意义被引量：5
- 2009年
- 目的研究骨髓瘤骨髓基质细胞(BMSCs)分泌的白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在多发性骨髓瘤(MM)进展中的变化和意义以及人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)分泌IL-6和TNF-α的水平。方法用ELISA法检测单独培养的hUCBDSCs和骨髓瘤BMSCs以及它们与KM3细胞共培养后IL-6、TNF-α在培养上清液中的浓度。结果(1)单独培养和共培养时骨髓瘤BMSCs分泌IL-6和TNF-α的水平高于hUCBDSCs;(2)共培养后骨髓瘤BMSCs和hUCBDSCs分泌IL-6和TNF-α的水平明显高于共培养前;(3)Ⅲ期患者BMSCs分泌IL-6的水平高于Ⅰ期和Ⅱ期患者,但是TNF-α水平无变化。结论IL-6与MM的进展有关;hUCBDSCs表达IL-6和TNF-α的水平较骨髓瘤BMSCs低。
- 高力高蕾张曦陈幸华
- 关键词：多发性骨髓瘤人脐血源基质细胞骨髓基质细胞白介素-6肿瘤坏死因子Α
- 残留耐药Jurkat细胞培养及耐药机制的初步探讨被引量：1
- 2009年
- 目的培养残留耐柔红霉素(DNR)的Jurkat细胞,并对其耐药机制进行初步探讨。方法体外分离培养初发急性淋巴细胞白血病患者骨髓基质细胞(BMSCs)以模拟骨髓造血微环境,在与Jurkat细胞长期共培养的过程中选用含50ng/ml DNR的培养液进行培养,随着培养时间的延长,绝大部分Jurkat细胞漂浮死亡。残留的Jurkat细胞逐渐恢复增殖活力,并逐渐获得抗药能力,可以在DNR终浓度为50ng/ml的培养液中存活、增殖,将该细胞记为Jurkat/DNR。绘制Jurkat细胞和Jurkat/DNR细胞的增殖曲线,并检测其细胞周期分布、对多种化疗药物的耐药系数、DNR摄药量以及MDR1、bcl-2、bax和MRP mRNA的表达。结果嵌合于基质细胞层中的Jurkat细胞在DNR的持续刺激作用下逐步产生耐药性,获得残留耐DNR的Jurkat细胞。与Jurkat细胞相比,Jur-kat/DNR细胞中处于静止期的细胞比例增高、增殖速度缓慢、对多种化疗药物产生不同程度的耐药性、DNR摄药量减少,可以检测到MDR1基因表达,bax基因表达无显著差异,bcl-2及MRP基因表达水平升高。结论骨髓基质细胞滋养层是残留白血病细胞生存和再生长的微环境,可增强白血病细胞的抗药能力;通过改造白血病患者造血微环境有可能抑制残留白血病的形成及减少复发。
- 梁雪陈幸华张曦孔佩艳彭贤贵曾东风高蕾张诚王庆余
- 关键词：骨髓基质细胞JURKAT细胞柔红霉素
- 不同明胶浓度及淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响被引量：3
- 2008年
- 本研究观察不同明胶浓度及淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响。采用3%及6%明胶浓度沉降脐血红细胞并观察分离效果;应用Ficoll及Percoll淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,观察其对人脐血源黏附细胞48小时贴壁率、细胞开始伸展时间、细胞培养成功率的影响,倒置显微镜观察细胞形态及生长状况,用细胞化学、免疫细胞化学进行细胞鉴定。结果显示,6%明胶浓度对红细胞沉降效果明显好于3%的明胶。无论是48小时贴壁率、细胞开始伸展时间、黏附细胞集落开始形成时间、集落数达最高的时间及细胞融合时间,还是细胞培养成功率,Percoll明显优于Ficoll;两种方法分离培养的人脐血源黏附细胞的形态、细胞化学染色及免疫细胞化学染色等生物学特征无差异。结论:6%明胶联合Percoll细胞分离液是理想的人脐血源黏附细胞原代培养分离方法,本研究为人脐血源黏附细胞在临床的早日应用提供了基础信息。
- 张诚陈幸华张曦高蕾孔佩艳刘红梁雪彭贤贵王庆余
- 关键词：明胶淋巴细胞分离液
