国家教育部博士点基金(20090142110076)
- 作品数：16 被引量：27H指数：3
- 相关作者：方峰刘兴楼舒赛男李革刘玲玲更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-21在滤泡辅助性T细胞分化发育及功能中的作用被引量：3
- 2010年
- 抗原刺激B细胞产生抗体需要T细胞辅助，近年来人们逐渐认识到一个命名为滤泡辅助性T细胞（Tfh）的CD4^＋T细胞亚群在B细胞诱导的免疫应答中具有重要作用。Tfh细胞的主要特征包括表达趋化因子受体与（CXCR5），迁移定位于B细胞滤泡辅助B细胞产生抗体。Tfh细胞产生的细胞因子IL-21能够促进B细胞分化为抗体形成细胞，这种辅助性细胞因子在Tfh细胞的分化发育、效应发挥及Tfh细胞功能失调相关的疾病中具有重要意义。
- 李旭芳方峰
- 关键词：IL-21B细胞
- 成人Still病的淋巴结病理诊断及临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的观察成人Still病(AOSD)的淋巴结病理形态特点,探讨其在AOSD诊断中的临床意义。方法对浙江省桐乡市中医医院病理科收治的4例AOSD患者的临床资料进行回顾性分析,并对其淋巴结活检及免疫组化标记结果进行观察分析。结果患者主要表现为体温升高、皮疹及关节痛等临床症状,肝脾及淋巴结肿大,外周血白细胞较正常水平升高,EB病毒,HIV及抗RNP抗体正常。患者淋巴结部分结构保存,副皮质区增宽,淋巴结主要呈增生性改变,增生细胞主要是免疫母细胞及Langerhans细胞,可见小淋巴细胞及组织细胞等散在分布,增生细胞核分裂象较多见,且异型性明显。免疫组化标记结果显示,免疫母细胞表达CD20及CD79α或表达CD3及CD45RO,Langerhans细胞胞质及胞核、高尔基区,CD1a和vementin胞质阳性,活化的淋巴细胞表达CD30,组织细胞表达CD68,CD15及ALK等均无表达。结论 AOSD临床诊断不依赖于淋巴结活检,但淋巴结活检对AOSD的诊断具有重要的辅助价值,且肿大的淋巴结的免疫反应特点对AOSD的鉴别诊断也具有重要意义。
- 付海英裴再军方峰
- 关键词：成人STILL病淋巴结病理诊断
- 脂氧素受体激动剂对巨细胞病毒感染巨噬细胞的免疫负调节被引量：5
- 2013年
- 背景:脂氧素可以抑制炎症细胞、内皮细胞、小鼠脾脏树突状细胞等合成细胞因子,还可以抑制炎性细胞因子对细胞的生物效应。目的:分析脂氧素受体激动剂BML-111对人巨细胞病毒感染THP-1源巨噬细胞的免疫调节作用。方法:用人巨细胞病毒AD169毒株感染THP-1源巨噬细胞(MOI=0.5),细胞培养后设立对照组、人巨细胞病毒感染组及人巨细胞病毒+BML-111组。在感染后0,1,2,4,12,24,48,72h收集各组细胞培养上清液,以ELISA检测各组细胞因子的表达水平;RT-PCR检测各指标mRNA的表达强度;Western blot检测感染4h的细胞核内p65亚基蛋白表达。结果与结论:与对照组相比,其他两组各细胞因子蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05)。与人巨细胞病毒感染组相比,人巨细胞病毒+BML-111组白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α显著降低,转化生长因子β显著升高(P<0.05),白细胞介素10差异无显著性意义(P>0.05);人巨细胞病毒+BML-111组各细胞因子mRNA均明显降低(P<0.05)。与对照组相比,其他两组细胞核内NF-κBp65亚基蛋白浓度明显升高(P<0.05);人巨细胞病毒+BML-111组显著低于人巨细胞病毒感染组(P<0.05)。说明BML-111可能通过抑制NF-κB的p65亚基核转位,减少白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的表达,促进转化生长因子β的表达,从而对人巨细胞病毒感染的THP-1源巨噬细胞发挥其免疫负调节作用。
- 陈晓红舒赛男刘兴楼王慧张菊杜小弋李革方峰
- 关键词：器官移植巨细胞病毒巨噬细胞脂氧素
- 巨细胞病毒的模式识别受体研究进展被引量：2
- 2012年
- 人类巨细胞病毒（HCMV）属疱疹病毒B亚科，为线状双链DNA病毒，在世界范围内普遍感染。在免疫正常的个体，CMV感染大多表现为无症状或亚临床型感染，但在一些免疫低下或免疫抑制人群如胎儿、婴儿、免疫功能不全或缺陷个体则可引起严重疾病。病毒入侵机体，天然免疫应答在第一时间做出反应。天然免疫应答之所以能如此迅速的做出反应，主要依赖细胞表面的模式识别受体。模式识别受体通过识别病毒的病原相关分子模式（如病毒蛋白、核酸），从而引起细胞内信号通路的激活，最终引起转录因子的活化，进而使I型干扰素和炎性因子表达增加，产生免疫和炎性反应。天然免疫是机体抵抗病原微生物入侵的第一道防线，病毒有效的复制首先要躲过天然免疫应答的清除，而病毒感染的最终结局取决于宿主与病毒之间的“力量”角逐。机体多种天然模式识别受体能够识别巨细胞病毒，从而启动机体的天然免疫应答，发挥抗病毒的效应。
- 刘玲玲方峰
- 关键词：巨细胞病毒天然免疫应答模式识别受体
- 脂氧素受体激动剂对巨细胞病毒复制增殖的影响
- 2014年
- 背景:脂氧素的抗炎及保护效应已经在多种免疫相关疾病模型中被验证,课题组前期研究结果亦显示,脂氧素受体激动剂BML-111对巨细胞病毒诱导的免疫损伤有负调节作用,那么,它对病毒的复制将产生怎样的影响呢?目的:观察脂氧素受体激动剂BML-111对人巨细胞病毒在THP-1源巨噬细胞及人胚肺成纤维细胞中复制增殖的影响。方法:用HCMV AD169毒株感染THP-1源巨噬细胞(MOI=0.5),设立模拟感染组、人巨细胞病毒感染组及人巨细胞病毒+BML-111组,BML-111的终浓度为100 nmol/L;于感染后0,1,2,4,12,24,36,48 h收集各组细胞,用RT-PCR法检测细胞中IE86和pp65 mRNA的水平;人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞(MOI=0.1),设立人巨细胞病毒感染组与人巨细胞病毒+BML-111组,逐日光镜观察人胚肺成纤维细胞病变并计数其比率;蚀斑法测定人胚肺成纤维细胞内感染性人巨细胞病毒滴度。结果与结论:人巨细胞病毒感染巨噬细胞后,与模拟感染组相比,人巨细胞病毒感染组和人巨细胞病毒+BML-111组IE86 mRNA及pp65 mRNA表达明显升高;与人巨细胞病毒感染组相比,人巨细胞病毒+BML-111组IE86 mRNA及pp65 mRNA在细胞感染早期(4 h内)表达明显升高,但在感染中晚期(24-72 h),pp65 mRNA的表达明显降低。人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞后,与人巨细胞病毒感染组相比,人巨细胞病毒+BML-111组细胞提前2 d达到100%细胞病变;感染性病毒滴度提前2 d达到峰值,但两组病毒滴度峰值差异无显著性意义。结果显示BML-111在感染早期加快人巨细胞病毒在细胞内的复制速度,在感染晚期抑制pp65基因表达;BML-111在体外对人巨细胞病毒的感染性病毒增殖量无影响。
- 陈晓红舒赛男刘兴楼王慧张菊杜小弋李革方峰
- 关键词：巨细胞病毒胚肺成纤维细胞脂氧素病毒复制
- Th17细胞在小鼠巨细胞病毒感染急性期的作用研究
- 2012年
- 目的整体水平观察Th17细胞在小鼠巨细胞病毒（MCMV）播散性感染急性期的作用。方法建立MCMV播散性感染模型，病毒接种后第3、7、14和28天各处死3只小鼠；同时设模拟感染鼠作为对照。应用real—timePCR法检测MCMV感染鼠脏器MCMVDNA载量；HE染色观察MCMV感染后脾组织病理损伤变化；流式细胞术检测脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率；ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-17A蛋白浓度。结果感染急性期唾液腺组织中MCMVDNA于感染后14d最高；脾组织病理损伤也于感染后14d最严重；与模拟感染对照鼠相比，MCMV感染鼠脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率呈升高趋势（均P〈0．01），且于感染后14d达峰值[（1．14±0．09）％VS（0．19±0．04）％，t=17．551，P=0．000]；病毒特异性IL-17A浓度也于感染后14d达峰值[（81．98±12．37）pg／mlVS（44．96±8．44）pg／ml，t=4．281，P=0．006]；脾细胞培养上清中病毒特异性IL-17A水平与唾液腺组织中MCMVDNA载量呈正相关（r=0．54，P〈0．05）；脾组织病理损伤越重，脾细胞培养上清中IL-17A浓度越高。结论Th17细胞主要通过IL-17A参与MCMV播散性感染急性期免疫应答，直接或间接的促进病毒复制或脾组织局部病理损伤，可能是MCMV持续性感染的重要原因之一。
- 李旭芳刘玲玲刘兴楼舒赛男李革方峰
- 关键词：小鼠巨细胞病毒TH17细胞
- IE72在人巨细胞病毒感染中的作用被引量：1
- 2011年
- 我国是HCMV感染高发地区，其中儿童血清抗HCMV抗体阳性率为83．2％～87．3％，而成人则高达95％。HCMV是一种弱的致病因子，但是先天感染、免疫力低下的婴幼儿可产生胎儿小头畸形、先天智力障碍及神经性耳聋等临床症状，器官移植、长期使用免疫抑制剂的个体及AIDS患者则可产生严重的临床综合症。明确IE72的作用机制则可在早期对HCMV感染进行干预，改善预后。
- 刘玲玲方峰
- 关键词：HCMV感染
- IL-17A参与巨细胞病毒感染后脾脏病理改变的机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的建立鼠巨细胞病毒（MCMV）播散性感染的小鼠模型，在整体水平观察脾脏病理损伤与促炎因子IL-17A表达的关系，初步探讨IL-17A参与巨细胞病毒感染后脾脏病理改变的机制。方法建立鼠巨细胞病毒全身播散性感染模型，MCMVSmith株腹腔接种后3、7、14、28d各处死小鼠3只，同时设正常小鼠作为模拟感染对照。标准空斑实验检测脾脏的病毒滴度，lit．PCR法测定脾脏中MCMVmRNA、IL-17AmRNA的表达，免疫组化法检测脾脏的IL-17A蛋白的表达，HE染色法评估脾脏的病理性损伤程度，分析IL-17A的表达与脾脏病理改变的关系。结果脾组织的病毒滴度在巨细胞病毒感染后3d升高，7d有所降低，在感染后第14天用标准空斑实验检测不到病毒。MCMVmRNA在病毒感染后3、7d可以检测的到；IL-17AmRNA的表达，与模拟感染对照组相比，MCMV感染组表达逐渐增加，并在14d达到高峰，28d显著下降。免疫组化法检测的脾脏IL-17A蛋白的表达也在14d达到高峰。脾组织的病理损伤逐渐加重，至感染后第14天病变达高峰后逐渐减轻。脾脏组织病理损伤最重与IL-17A高表达出现在同一时期。结论促炎因子IL-17A的高表达与脾脏组织的病理损伤程度呈现明显相关性。
- 刘玲玲李旭芳秦文卿刘兴楼李革舒赛男方峰
- 关键词：巨细胞病毒TH17
- AIM2炎性体识别胞浆鼠巨细胞病毒DNA的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察AIM2（absent in melanoma2）在感染早期识别胞浆小鼠巨细胞病毒（MCMV）DNA的变化状况。方法建立MCMV全身播散型感染模型，接种MCMVSmith株后第1、3、5和7天各处死3只小鼠；同时设模拟感染小鼠作为正常对照。Western blot检测脾脏巨噬细胞中AIM2、衔接子凋亡相关点样蛋白（ASC）和caspase-1蛋白的表达状况；同时应用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平；空斑法测定感染小鼠唾液腺感染性病毒滴度。结果MCMV感染后第3、5、7天，小鼠唾液腺组织中感染性病毒滴度逐渐增加；MCMV感染鼠脾脏巨噬细胞中AIM2、ASC和caspase-1蛋白的表达呈现一致的变化，与模拟感染对照鼠比较，AIM2、ASC和caspase-1蛋白相对吸光值在感染后第1天开始升高（P〉0．05），第3天明显升高并达峰值[分别为（1．121±0．243）vs（0．240±0．046），（1．318±0．333）VS（0．248±0．090），（1．085±0．243）VS（0．247±0．064）；P〈0．01]，其后接近正常；MCMV感染鼠血清IL-1β和IL-18水平在感染后第3天也明显高于模拟感染对照鼠[分别为（112．72±5．20）pg／ml VS（47．86±4．35）pg／ml，（42．74±4．23）pg／ml VS（22．60±2．82）pg／ml；P〈0．01]，其后均逐渐下降接近正常。结论MCMC感染早期巨噬细胞通过AIM2炎性体识别胞浆MCMVDNA，可能成为CMV感染及感染后所引起的疾病的治疗靶点。
- 李旭芳刘玲玲舒赛男刘兴楼李革方峰
- 关键词：鼠巨细胞病毒IL-1ΒIL-18
- 体外应用MCMV与PMA/Ionomycin联合诱导Th17细胞的研究被引量：3
- 2011年
- 探讨体外联合应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)和佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)诱导Th17细胞产生。分别使用MCMV、PMA/Ionomycin或联合MCMV、PMA/Ionomycin体外刺激BALB/c小鼠脾细胞,利用流式细胞仪检测脾细胞中CD4+IL-17+细胞的比例及平均荧光强度,同时应用ELISA技术检测培养液上清中IL-17蛋白浓度。结果显示:单独使用MCMV或PMA/Ionomycin均不能有效刺激Th17细胞增殖,CD4+IL-17+细胞比例较低;而联合应用MCMV和PMA/Ionomycin可以有效诱导脾细胞向Th17细胞分化,CD4+IL-17+细胞比例达到2.6%,且应用联合诱导方案后可见CD4+IL-17+细胞平均荧光强度(MFI)明显升高。此外,联合应用MCMV和PMA/Ionomycin刺激脾细胞后明显增加培养液上清中IL-17蛋白浓度。我们的研究结果可以为进一步探讨Th17细胞在CMV感染免疫中的作用奠定实验基础。
- 李旭芳舒赛男刘兴楼刘玲玲郭珊王慧李革方峰
- 关键词：CMVIL-17平均荧光强度
