国家重大科技成果转化项目(2009GB2C600213)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：王树迎韩小康刘晓东侯衍猛葛仕豪更多>>
- 相关机构：山东农业大学临朐县畜牧局菏泽学院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家重大科技成果转化项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 不同繁殖力山羊褪黑素分泌规律的比较研究被引量：4
- 2014年
- 比较高繁殖力的济宁青山羊和低繁殖力的沂蒙黑山羊不同季节血浆中褪黑素(melatonin,MT)的分泌变化规律,分析MT与山羊繁殖力之间的关系。采用放射免疫分析法(RIA)测定血浆MT浓度,结果表明:MT昼夜分泌峰值出现在00:00时,峰值以夏至为最高(P<0.05),济宁青山羊达到极显著水平(P<0.01);两羊种春分和秋分之间的峰值差异均不明显。除冬至外的其它三个季节济宁青山羊在各个采样点的激素浓度均高于沂蒙黑山羊,冬至结果与之相反。夜间褪黑素的平均含量济宁青山羊均极显著高于沂蒙黑山羊(P<0.01),但冬至时结果亦相反。
- 侯衍猛葛仕豪魏军强王树迎刘晓东韩小康
- 关键词：济宁青山羊沂蒙黑山羊褪黑素
- 山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。
- 刘海港李宏梅王树迎成子强刘法孝窦文文井维芳郭慧君
- 关键词：山羊雌激素受体Β多克隆抗体免疫组化
