国家自然科学基金(30670871)
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 相关作者：朱静田杰张晓萍杨舸赵莉莉更多>>
- 相关机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 染色质免疫沉淀技术的应用及进展被引量：1
- 2009年
- 杨舸朱静
- 关键词：启动子转录调控DNA微阵列
- TSA干预MSCs向心肌细胞特化体外实验
- 目的在体外以新生大鼠心肌细胞(cardiomyocytes,CM)与骨髓间充质干细胞 ((mesenchymal stem cells,MSCs))共同培养的方式模拟体外心肌微环境,研究间质干细胞在 HDAC 酶抑制剂曲...
- 杨舸朱静冯川赵莉莉张晓萍田杰陈沅
- 文献传递
- MSCs定向分化的乙酰化干预调控实验研究
- 目的探讨经HDAC酶抑制剂曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)干预后,间充质干细胞MSCs定向分化为心肌样细胞的乙酰化作用。方法两种诱导方式①与心肌细胞共培养,分为:MSCs;MSCs与心肌细胞共培养;MS...
- 杨舸朱静田杰陈沅冯川赵莉莉李艾莎张晓萍
- 关键词：诱导分化去乙酰化酶抑制剂5-氮杂胞苷
- 骨髓间充质干细胞与胶质瘤细胞非接触共培养后相关生物学特性分析被引量：8
- 2010年
- 目的在体外通过大鼠胶质瘤C6细胞与大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)非接触共培养,以探明BMSCs是否受到肿瘤微环境的作用获得肿瘤细胞的相关生物学特性。方法通过6孔板结合Transwell小室建立BMSCs和C6胶质瘤细胞的共培养体系,以共培养组为实验组,设单独培养的BMSCs为对照组;相差显微镜下观察培养后2组细胞形态学的改变;核干细胞因子(nucleostemin,NS)检测细胞增殖力的变化;荧光定量PCR和Western blot检测细胞中mdm2、p53mRNA水平及其蛋白的变化;免疫荧光法检测神经胶质细胞特异的胶质纤维酸蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)在细胞中的定位及表达。结果共培养后实验组细胞呈现类似胶质瘤细胞样的形态,表达神经胶质细胞特异的GFAP蛋白;NS蛋白反映的细胞增殖能力未发生改变;共培养后实验组p53mRNA水平明显低于对照组(P<0.01),而p53蛋白的表达水平显著高于对照组[(1.63±0.31)vs(0.85±0.12),P<0.05];实验组mdm2mRNA及其蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。结论肿瘤微环境可能会使大鼠骨髓间充质干细胞获得肿瘤细胞的相关生物学特性。
- 张亚兰朱静田杰刘官信张晓萍邓兵
- 关键词：骨髓间充质干细胞胶质瘤细胞
- 曲古抑菌素A促进大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化被引量：2
- 2009年
- 目的观察不同浓度曲古抑菌素A(TSA)对骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的作用,寻求适宜有效的干预条件。方法不同浓度TSA对MSCs进行不同时间干预,测定去乙酰化酶活性;相差显微镜下观察其形态;荧光免疫组化鉴定心肌特征性肌钙蛋白T(cTnT)的表达;RT-PCR检测Nkx-2.5、GATA-4的表达。结果在300 nmol/L干预24 h时去乙酰化酶活性最低;cTnT及Nkx-2.5、GATA-4基因表达随干预浓度增加而逐渐增强,在300 nmol/L干预24 h时表达均趋于稳定。结论TSA在体外适宜的浓度下可促进MSCs向心肌样细胞分化。
- 赵莉莉朱静冯川杨舸田杰
- 关键词：去乙酰化酶抑制剂骨髓间充质干细胞心肌样细胞
- 曲古抑菌素干预骨髓间充质干细胞向心肌细胞特化体外实验被引量：3
- 2009年
- 目的:在体外以新生大鼠心肌细胞(Cardiomyocytes,CM)与骨髓间充质干细胞((Mesenchymalstemcells,MSCs)共同培养的方式模拟体外心肌微环境,研究间质干细胞在HDAC酶抑制剂曲古抑菌素(TrichostatinA,TSA)干预后乙酰化酶活性与MSCs向心肌细胞特化之间的联系。方法:分离大鼠MSCs将已标记的MSCs与心肌细胞、分别加入不同浓度TSA干预后的MSCs与心肌细胞混合培养。贴壁法分离大鼠MSCs在体外培养纯化后进行细胞标记,培养至第4代。根据实验需要分为3组:阳性对照组,实验组,阴性对照组。用4.6-二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)对核进行双标。分别在共培养1周后用免疫荧光染色检测MSCs细胞中的心肌结构功能蛋白:肌球蛋白重链(Myosinheavychain,MHC)、心肌组织缝隙连接的特异性组成蛋白质Connexin43(Cx43)的表达情况。结果:①MSCs与搏动的心肌细胞共培养1周,MSCs开始出现心肌样分化说明建立了心肌微环境;②阳性对照组中,MSCs经TSA干预48h后与心肌细胞混合培养,出现心肌样分化并表达心肌结构功能蛋白表达。③阴性对照组中的部分MSCs可少量表达心肌结构功能蛋白。在共培养的7d,经TSA诱导后经Brdu-DAPI双标MSCs的核,MHC和Cx43荧光显示分化率与阳性对照组的分化率有显著差别。结论:MSCs与经HDAC酶抑制剂干预后的MSCs在心肌微环境中,HDAC酶抑制剂对MSCs向心肌样细胞的特化有促进作用,提示乙酰化酶活性与细胞特化之间的存在联系。
- 杨舸朱静田杰陈沅冯川赵莉莉张晓萍
- 关键词：骨髓间充质干细胞去乙酰化酶抑制剂
- 肿瘤微环境中间充质干细胞的相关生物学特性分析被引量：8
- 2010年
- 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在肿瘤微环境中是否获得肿瘤细胞的相关生物学特性而导致恶性转化。方法通过6孔板结合Transwell小室建立间充质干细胞和大鼠C6胶质瘤细胞的共培养体系,以共培养组为实验组,另设单独培养的间充质干细胞作为对照组。于相差显微镜下观察培养后两组细胞的形态学改变;采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化;采用荧光定量PCR和免疫荧光法检测间充质干细胞mdm2、p53mRNA水平及共培养后两组细胞中p53突变蛋白和mdm2癌蛋白的表达。结果共培养后实验组细胞表现为胶质瘤细胞样形态。细胞周期检测结果显示共培养7d后,对照组G1期细胞占90.48%±6.62%,实验组占82.22%±2.74%,两组间差异无统计学意义(P>0.05);对照组S期细胞占4.66%±4.16%,实验组占7.35%±1.93%,两组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。定量PCR及免疫荧光检测显示,实验组p53mRNA水平明显降低,为对照组的0.24倍(P<0.05);部分实验组细胞(24.8%)中表达突变型p53蛋白,而对照组无突变p53蛋白表达(P<0.05)。实验组mdm2mRNA及其蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。结论肿瘤微环境使大鼠骨髓间充质干细胞获得了肿瘤细胞的相关生物学特性。
- 张亚兰朱静田杰周娜邓兵张晓萍刘官信
- 关键词：间质干细胞肿瘤微环境肿瘤转化
- MSCs定向分化的乙酰化干预调控实验研究
- 目的 探讨经HDAC酶抑制剂曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)干预后,间充质干细胞MSCs定向分化为心肌样细胞的乙酰化作用.方法 两种诱导方式①与心肌细胞共培养,分为：MSCs；MSCs与心肌细胞共培养；...
- 杨舸朱静田杰陈沅冯川赵莉莉李艾莎张晓萍
- 关键词：诱导分化去乙酰化酶抑制剂5-氮杂胞苷
