国家教育部博士点基金(20060533056)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：中南大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目湖南省自然科学基金更多>>
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- 氯沙坦通过ERK1/2 MAPK途径抑制高糖诱导小鼠系膜细胞CTGF表达被引量：7
- 2009年
- 目的:研究高糖环境下,氯沙坦对CTGF的影响以及其作用机制。方法:体外培养小鼠系膜细胞株(MMCs),用高糖(25mmol/L葡萄糖)刺激细胞分别作用24h、48h、72h,用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达。再将细胞分为低糖组(5.6mmol/L葡萄糖),山梨醇组(5.6mmol/L葡萄糖+19.4mmol/L山梨醇),高糖组(25mmol/L葡萄糖),氯沙坦组(25mmol/L葡萄糖+10-5mol/L氯沙坦)以及ERK抑制剂组(25mmol/L葡萄糖+25μmol/LPD98059),48h后采用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达,72h后采用Real-timePCR方法及Westernblot分别检测CTGFmRNA表达量以及蛋白的表达。结果:高糖刺激小鼠系膜细胞后,ERK1/2磷酸化的蛋白表达逐渐增高,呈现一定时间依赖性。与低糖组相比,高糖组磷酸化ERK1/2、CTGF的蛋白表达明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组磷酸化ERK1/2的蛋白表达以及CTGF的蛋白均明显下降有统计学意义(P<0.05)。与低糖组相比,高糖组CTGF mRNA表达量明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组CTGF mRNA表达量明显下降,且有统计学意义(P<0.01)。结论:氯沙坦可抑制高糖对CTGF的诱导作用,其机制可能与抑制ERK1/2MAPK途径有关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：氯沙坦CTGFERK1/2系膜细胞
- 氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应的作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨血管紧张素Ⅰ型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子B1（TGF-β1）产生的影响。方法以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，分别给予氯沙坦（10^-5mol／L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI，10^-5mol／L）预处理1h后再加入AngⅡ（10^-7mol／L）刺激24h，同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β mRNA水平。用2，7-二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针，采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果AngⅡ（10^-7mol／L）刺激细胞15min后开始产生大量的ROS，至60min达平台期。单纯AngⅡ刺激1h后，NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27．31μU／L比48．29μU／L，P〈0．01）；经氯沙坦预处理。1h后再加入AngⅡ刺激1h细胞上清液中SOD水平升高至36．37μU／L，与AngⅡ组差异有统计学意义（P〈0．01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平，其mRNA水平分别为对照组的5．57倍、5．55倍和9．41倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的4．53倍、4．17倍和6．50倍（均P〈0．01）。经氯沙坦干预后，p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2．71倍、2．18倍和5．23倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的3．20倍、2．30倍和4．30倍（均P〈0．01）。AngⅡ刺激细胞24h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多，为对照组的4．36倍（P〈0．01），氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1．57倍。结论氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生，并能通过减少ROS产生，�
- 彭张哲陶立坚王菱宁旺斌谢艳云王纳遂李冰心唐怡庭
- 关键词：洛沙坦NADPH氧化酶转化生长因子Β1
- 氯沙坦通过ERK1／2丝裂原活化蛋白激酶途径抑制高糖诱导的小鼠系膜细胞结缔组织生长因子表达被引量：1
- 2009年
- 糖尿病肾病（DN）是糖尿病严重的慢性并发症之一，其主要病理特征是由细胞外基质（ECM）增多引起的肾小球硬化。血管紧张素（Ang）受体拮抗剂氯沙坦可有效地延缓肾小球硬化，被用于DN的治疗。高糖可诱导肾脏系膜细胞结缔组织生长因子fCTGF）的表达，从而促进ECM积聚和组织器官的纤维化。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）作为真核细胞胞质内的信号转导终末通路，与DN的发病密切相关。本研究观察高糖是否通过ERK1／2MAPK途径调节小鼠系膜细胞CTGF的表达，以及氯沙坦对CTGF的作用是否也与ERK1／2MAPK通路相关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2肾脏系膜细胞高糖诱导氯沙坦小鼠
- 依那普利在大鼠单侧输尿管梗阻再通模型中的抗纤维化作用被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨依那普利对大鼠单侧输尿管梗阻再通模型肾脏纤维化的影响。方法:18只SD大鼠随机分为两组:假手术组(6只)以及单侧输尿管梗阻模型组(12只)。输尿管梗阻3天后,实施梗阻再通手术,再将大鼠随机分为模型组(6只)以及依那普利组(6只),术后,依那普利组给予依那普利灌胃10mg/kg/d,假手术组以及模型组给予等量0.5%CM-CNa溶液灌胃。用药2周后,取术侧肾组织做HE染色,并采用Raford评分系统对肾间质损伤程度进行评分;用Real-timePCR方法检测I、III型胶原以及CT-GFmRNA的表达;用Westernblot方法检测CTGF蛋白水平的表达。结果:模型组大鼠肾脏损伤程度,I、III型胶原mRNA表达水平,以及CTGFmRNA和蛋白表达水平均比假手术组明显上升(P<0.01)。经依那普利治疗后,与模型组相比,以上指标均显著下降(P<0.01)。结论:依那普利能有效阻止大鼠单侧输尿管梗阻再通后肾脏纤维化的进展。依那普利抗纤维化的作用机制可能与抑制CTGF的表达有关。
- 王菱彭张哲宁旺斌朱玉娴陶立坚
- 关键词：依那普利单侧输尿管梗阻纤维化
