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鹅细小病毒和番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒的构建及表达被引量：12: 2002年; 将鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MPV)主要结构蛋白(VP2-VP3)基因克隆到核酸疫苗质粒pIRES1neo载体上,构建了核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP,通过脂质体转染法分别将重组质粒转染到鹅胚成纤维细胞和番鸭胚成纤维细胞中,核酸疫苗重组质粒pIGVP1和pIMVP分别转染鹅胚成纤维细胞和番鸭成纤维细胞中,于转染后72h收取细胞,细胞裂解液裂解后,经Westernblot检测其表达产物可出现特异性反应带,证明表达产物具有很好的反应原性。; 李雪梅章金刚向华陈晓月金宁一费恩阁; 关键词：鹅细小病毒番鸭细小病毒核酸疫苗重组质粒

番鸭细小病毒国内分离株主要结构蛋白基因的克隆和序列分析被引量：2: 2006年; 根据国外已发表的番鸭细小病毒(MDPV)FM株基因组核苷酸序列设计1对引物,应用PCR技术扩增MDPV FS株的VP2-VP3蛋白基因片段。将扩增后的VP2-VP3结构蛋白基因克隆到T载体上,MDPV FS株基因大小为1764bp,编码528个氨基酸,对插入片段进行序列测定。结果表明,我国分离的MDPV FS株基因序列与国外发表序列的同源性为98.6%,与已发表的YZ株同源性为99.5%,可见番鸭细小病毒结构蛋白基因较保守。; 陈晓月赵承辉章金刚李雪梅金宁一向华赵玉军; 关键词：番鸭细小病毒主要结构蛋白基因克隆

番鸭细小病毒国内分离株主要结构蛋白基因的克隆和序列分析被引量：5: 2002年; 根据国外已发表的番鸭细小病毒 (MPV) FM株基因组核苷酸序列 ,设计了 1对引物 ,分别对国内 2株番鸭细小病毒分离株 MPV扬州 (YZ)株和 MPV佛山 (FS)株主要结构蛋白 (VP2和 VP3)基因进行 PCR扩增 ,并克隆到p CR3.1T载体 ,经酶切鉴定筛选出阳性克隆质粒并进行核苷酸序列分析比较。结果表明 ,MPV YZ和 MPV FS的VP2 - VP3基因大小均为 176 4bp,编码 5 88个氨基酸。 MPV YZ、MPV FS与 MPV FM核苷酸序列同源性分别为98.5 %和 98.6 % ,氨基酸序列同源性为 97.1%和 97.8% ;MPV YZ与 MPV FS核苷酸序列的同源性为 99.5 % ,氨基酸序列同源性为 98.8%。; 陈晓月李雪梅向华宣华赵玉军章金刚; 关键词：番鸭细小病毒分离株基因结构

番鸭细小病毒MDPV YZ株VP_2和VP_3蛋白基因的克隆和序列测定: 2001年; 根据国外已发表的番鸭细小病毒 (MDPV )FM株基因组核苷酸序列设计了 1对引物 ,应用PCR技术扩增了MDPVYZ株的VP2 和VP3 蛋白基因片段。将扩增后的VP2 和VP3 蛋白基因克隆到 pCR 3 .1T载体上 ,MDPVYZ株基因大小为 176 4bp ,编码 5 2 8个氨基酸 ,并对插入片段进行序列测定。测定结果表明 ,我国分离的MDPVYZ株蛋白基因序列与国外发表的序列的同源性为 98.5 %。; 陈晓月章金刚李雪梅向华宣华赵玉军; 关键词：番鸭细小病毒结构蛋白基因克隆

鹅细小病毒主要结构蛋白基因的扩增、克隆与原核表达载体的构建被引量：14: 2000年; 根据已发表的鹅细小病毒 ( GPV)核苷酸序列设计并合成了 1对引物 ,对 GPV主要结构蛋白 VP2和VP3基因进行扩增。所获得的 PCR产物与预期片段大小相符 ,约 1 .8kb。将该片段直接与真核表达 p CR3.1T载体连接 ,转化入感受态大肠杆菌 TOP1 0 F′中增殖。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增以及 Bam H 酶切线性化初步鉴定的基础上 ,经限制性内切酶 Sca 和 Eco R 分别酶切进行正反向鉴定 ,获得了 3个正向插入的克隆 ( PVPA)和 2个反向插入的克隆 ( PVPB)。将正向插入的克隆 PVPA1与原核表达载体 p ET-2 8b( + )分别用 Bam H 和 Xho 双酶切后 ,回收目的片段进行定向连接 ,并转化入感受态大肠杆菌 DH5α中。对所获得的重组质粒分别经 Sca 、Eco R 、Bam H / Xho 酶切 ,证实含有目的基因 ,且基因插入方向正确 ,成功地构建了含有 GPV主要结构蛋白基因的原核表达载体。; 马君章金钢李雪梅向华马凤龙赵玉军殷震; 关键词：鹅细小病毒结构蛋白基因原核表达载体扩增

鹅细小病毒长春分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的原核表达被引量：3: 2002年; 根据国外已发表的鹅细小病毒(GPV)A株基因组核苷酸序列,设计并合成了一对用于GPV主要结构蛋白(VP2-VP3)基因表达的引物。利用合成的引物,扩增并鉴定了GPV中国长春株(GPVCC株)的VP2-VP3基因。将扩增的目的基因插入到原核表达载体pET28(a)的多克隆位点,构建了表达GPVVP2-VP3基因的原核载体pEGVP1。重组表达载体质粒转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测到大小分别为75000和58000的表达蛋白带。Westernblot分析表明,表达产物具有很好的特异性。; 李雪梅章金刚向华陈晓月金宁一费恩阁; 关键词：鹅细小病毒结构蛋白原核表达

鹅细小病毒国内分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的克隆和序列分析被引量：14: 2001年; 根据国外已发表的鹅细小病毒 (GPV) A株基因组核苷酸序列设计了一对引物 ,对国内两株鹅细小病毒毒株 (GPV CC株 )和 (GPV FS株 )主要结构蛋白 (VP2 - VP3)基因进行 PCR扩增 ,并克隆到p CR3.1T载体 ,分别获得正向、反向连接重组质粒 p VPC1、p VPC2和 p VPF1、p VPF2 ,经酶切鉴定筛选出阳性克隆质粒并进行核苷酸序列分析比较 ,序列分析结果表明 :GPV CC株和 GPV FS株 VP2 - VP3的核苷酸大小分别为 176 4bp和 176 3 bp,其中 GPV CC株与 A株同源性达到 98.9% ;GPV FS株缺失一个碱基 ,与 A株同源性为 93.5 % ,与 GPV CC株同源性为 93%。; 李雪梅章金刚向华马君陈晓月; 关键词：鹅细小病毒结构蛋白基因

鹅细小病毒主要结构蛋白基因的克隆、测序及载体的构建: 根据Zadori等发表的鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)B株(GPV B株)基因组核苷酸序列设计并合成了一对引物(P1和P2),对鹅细小病毒长春强毒株(GPV CC株)主要结构蛋白VP2和VP3基因...; 马君章金刚向华李雪梅史秋梅宣华; 关键词：鹅细小病毒主要结构蛋白基因; 文献传递

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