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PDGF对人神经干细胞分化和甲状腺激素受体表达的影响被引量：4: 2004年; 目的　探讨血小板衍生生长因子 (platelet-derived growth factor,PDGF)在神经干细胞 (neural stem cell,NSC)定向分化中的作用 ,以及 PDGF在 NSC分化过程中对甲状腺激素受体 (thyroid hormone receptors,TRs)表达的调控。方法　用免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型 ,分别用 RT-PCR半定量法、ELISA法检测不同诱导条件下 NSC分化前后 TR-α1 、TR-α2 、TR-β1 在转录与蛋白表达水平上的变化。结果　 PDGF诱导分化后神经丝蛋白 (neurofilament protein,NF)细胞约占 80 % ;TR-α1 、TR-α2 、TR-β1 m RNA表达水平分别比 1 0 % (体积分数 )胎牛血清诱导分化组上调约 40 %、3 0 %、1 0 % (P<0 .0 5 )。TR-α、TR-β蛋白质表达趋势为 NSC>PDGF诱导分化组 >血清诱导分化组 (P <0 .0 5 )。结论　 PDGF能引发 NSC向神经元分化 ,同时在转录与蛋白表达水平上调 NSC分化后 TR各亚型的表达 ,增强甲状腺激素对中枢神经系统发育的调控作用。; 刘春蓉李兰英刘奔臧晓怡苗军陈祖培; 关键词：血小板衍生生长因子神经干细胞甲状腺激素受体

人胎脑发育早期甲状腺激素受体mRNA的表达被引量：5: 2003年; 目的　动态观察甲状腺激素受体 (TRs)mRNA在人脑发育过程中的表达变化。　方法　用RT PCR半定量法检测 3、5月龄人胎各脑区TRsmRNA表达变化。　结果　 3、5月龄人胎大脑、小脑、海马、丘脑、脑干及脊髓均有TRsmRNA表达 ,其中 3月龄胎脑各脑区TRsmRNA表达以TRα1 、TRα2 为主 ,TRβ1 次之。 5月龄胎脑各脑区TRsmRNA表达中以TRβ1 、α2 为主 ,TRα1 次之。TRsmRNA在大脑、小脑、海马处表达相对丰富。实验中发现的与TRα2始终伴行的特异条带经测序证实 ,除在 371 4 12位氨基酸处比TRα2 少 4 2个氨基酸 ,余序列两者完全相同。　结论　在脑发育过程中 ,TRsmRNA呈时空性表达 ,参与调节CNS的分化、成熟。首次验证了人TRα3与TRα2 编码区的差异序列。; 刘春蓉李兰英刘奔臧晓怡苗军陈祖培; 关键词：胎儿脑发育甲状腺激素受体逆转录-聚合酶链反应

PDGF对人神经干细胞分化和甲状腺激素受体表达的影响(英文): 2006年; [目的]探讨血小板衍生生长因子(Platelet-derived Growth Factor,PDGF)在人神经干细胞(Human Neural Stem Cells,hNSCs)定向分化中的作用,以及在hNSCs分化过程中PDGF对甲状腺激素受体(Thyroid Hormonereceptors,TRs)的表达调控。[方法]用免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型,分别用半定量RTPCR法、 ELISA法检测不同诱导条件下hNSCs分化前后TRα1、TRα2、TRβ1在转录与翻译水平上的表达变化。 [结果]PDGF诱导hNSCs分化后NF阳性细胞约占80％;TRα1、α2、β1mRNA表达水平分别比10％胎牛血清诱导分化组上调约40％、30％、10％(P<0．05)。TRα、β蛋白质表达趋势为hNSCs>PDGF诱导分化组>血清诱导分化组(P<0．05)。[结论]PDGF能引发hNSCs向神经元分化,同时在转录与翻译水平上调hNSCs分化后TR各亚型的表达,增强甲状腺激素对中枢神经系统发育的重要调控作用。; 刘春蓉李兰英刘奔臧晓怡陈祖培; 关键词：血小板衍生生长因子神经干细胞甲状腺激素受体

干细胞因子及其受体在胎脑不同区域的表达: 2004年; 目的　检测干细胞因子 ( stem cell factor,SCF)及其受体 C-kit在胎脑中的表达 ,并探讨其生理意义。方法　利用 RT-PCR半定量法 ,检测人胎脑不同分区和体外培养的人神经干细胞 ( NSC)中 SCF/C-kit m RNA的表达。结果　在大脑、小脑、海马、脑干、延髓、纹状体和垂体均见 SCF/C-kit基因表达。除检测到脑中占主要部分的可溶性片段外 ,还见一约 75 0 bp的未知片段。在体外培养的 NSC中 ,不同因素作用组之间 SCF/C-kit的表达量极不相同。上皮生长因子 ( EGF)诱导的 NSC中 ,SCF/C-kit的表达量高于碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)单独或与 EGF联合诱导的 NSC。NSC分化后 ,各因素作用组之间差异无显著性。结论　SCF/C-kit可在体内和体外表达 ,提示这一配基 -受体信号系统在脑发育中具有一定生理功能。; 刘奔李兰英庞智玲; 关键词：干细胞因子神经干细胞脑发育

T_3对人神经干细胞分化过程中甲状腺激素受体表达的影响被引量：3: 2003年; 目的　探讨三碘甲状腺原氨酸 (T3)在神经干细胞 (NSC)分化中的作用以及甲状腺激素受体(TR)mRNA在NSC分化过程中的表达变化。方法　在体外成功诱导扩增NSC ,用T3 对NSC进行诱导分化 ,半定量RT PCR法检测NSC在分化前后TRsmRNA的表达变化 ,免疫细胞化学方法鉴定分化后的细胞类型。结果　T3 可诱导NSC分化为神经元、少突和星形胶质细胞 ,其中髓鞘碱性蛋白 (MBP)阳性细胞约占 80 %。当NSC分化时存在不同的TRsmRNA的时间顺序表达。结论　T3 能诱导NSC向胶质细胞分化 ,是少突胶质细胞分化的重要调控因子。; 李兰英刘春蓉刘奔臧晓怡陈祖培; 关键词：T3 神经干细胞甲状腺激素受体三碘甲状腺原氨酸

T_3对人神经干细胞分化为少突胶质细胞的影响被引量：11: 2003年; 目的　以体外诱导生成的人神经干细胞 (NSCs)为模型 ,研究甲状腺激素 (TH)对其分化的影响。　方法　无菌状态下取因治疗目的而终止妊娠的胎龄 10～ 2 2周的人胎大脑半球 ,机械法分散细胞后 ,以 10 5个 ml细胞密度接种于含N 2配方的DMEM/F12培养基中 ,同时添加表皮生长因子 (EGF ,2 0 μg L)和 /或碱性成纤维生长因子(bFGF ,2 0 μg L)。采用自然分化以及T3诱导的方法诱导分化 ,免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型 ,抗体分别为NF 2 0 0、GFAP、Gal C ,并采用抗MBP、O4、A2B5抗体鉴别少突胶质细胞发育的不同阶段。　结果　T3有助于向胶质细胞方向发展 ,包括少突与星形胶质细胞 ,MPB阳性细胞比例超过 80 % ,尤其在EGF +T3组 ,这种现象更为突出。　结论　NSCs的定时分化是内外源信号共同作用的结果。TH就是这样一种信号 ,激活“生物钟”机制的效应组件。; 刘奔李兰英刘春蓉庞智玲; 关键词：神经干细胞少突胶质细胞甲状腺激素表皮生长因子碱性成纤维生长因子

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天津市自然科学基金(013611711)