国家自然科学基金(39970348)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：郭刚张瑞张镜宇梁东春刘新宇更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津市内分泌研究所天津医科大学代谢病医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨质疏松性骨损伤愈合过程中细胞生长因子的动态表达被引量：4
- 2009年
- 目的:从分子水平上探讨细胞生长因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨质疏松大鼠骨损伤愈合过程中的表达水平及其相互作用。方法:3月龄雌性大鼠64只,以去卵巢方法建立骨质疏松大鼠模型,分为骨质疏松组(OVX组)32只和假手术组(SX组)32只。运用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、bFGF在OVX和SX组大鼠骨组织中的表达水平。结果:(1)OVX组和SX组组内骨损伤后不同时间点TGF-β1、bFGF表达水平的差别具有统计学意义(P<0.01)。5d开始逐渐升高,15d时达到高峰,30d时回落到低水平。(2)OVX组TGF-β1、bFGFmRNA的表达水平均低于同时期SX组的水平。结论:TGF-β1、bFGF在骨损伤后存在约4周的周期性表达,并且于骨质疏松性骨损伤处表达减少,这是其愈合质量下降的重要因素。TGF-β1、bFGF的表达趋势类似,提示它们之间可能存在某种协同作用。
- 李媛张瑞董茵郭刚
- 关键词：骨质疏松成纤维细胞生长因子2WISTAR
- 重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1-86对骨质疏松大鼠治疗作用的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1-86对骨质疏松大鼠的骨同化作用。方法用摘除大鼠双侧卵巢的方式制备骨质疏松模型(OVX),去势手术16周后,测定大鼠腰椎骨密度,确认动物模型造模成功。实验动物分为8个组,给药后测定骨密度、骨钙素、骨形态计量学、骨生物力学等指标,初步评价重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1-86对骨质疏松大鼠的骨同化作用。结果重组人甲状旁腺素相关蛋白PTHrP1-86可使骨转换加快,促进新骨生成,使骨的力学性能提高,抗弯曲强度提高,抗变形能力增强,韧性增高,脆性降低,不易发生断裂。结论PTHrP1-86能有效提高骨的抗骨折能力,对治疗和预防骨质疏松有一定疗效。同时证明该动物实验方法行之有效,可以很好地测定PTHrP对骨质疏松的治疗作用,并可以此为依据开始一期临床实验。
- 郭刚刘新宇梁东春张瑞张镜宇
- 关键词：骨形态计量学骨生物力学
- 重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141的表达和生物活性测定被引量：1
- 2007年
- 目的:建立表达及纯化重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(rhPTHrP1-141)的方法。方法:将已构建好的表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141重组质粒转化大肠杆菌M15[PREP4],IPTG诱导表达,WesternBlot鉴定表达产物。金属螯合亲和层析去除杂蛋白后,超滤离心进一步纯化目的蛋白。使用UMR106细胞测定所制备的rhPTHrP1-141对cAMP生成的刺激作用。结果:SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,WesternBlot证实该条带即为rhPTHrP1-141。目的蛋白经纯化后,能刺激UMR106细胞内cAMP浓度升高,有剂量依赖关系。结论:成功建立了rhPTHrP1-141的制备及纯化方法,PTHrP1-141的表达量可达到60mg/L培养基。表达产物经体外实验证实具有生物活性。
- 刘新宇梁东春左爱军张镜宇郭刚
- 关键词：重组蛋白质类大肠杆菌基因表达调控
- 骨形态发生蛋白2在骨损伤不同时期的表达
- 2008年
- 目的:检测骨形态发生蛋白2(BMP2)在骨损伤不同时期的表达,了解其高峰表达时间。方法:实验组18只大鼠胫骨损伤造模,对照组6只大鼠假手术后处死,实验组平均分为3组,分别于术后第5天、第15天和第30天处死,提取大鼠骨组织总RNA,RT-PCR后扩增BMP2开放读框中编码成熟肽的基因片段,与pGEM-TEasy载体连接纯化后建立实时荧光定量PCR的标准曲线,检测BMP2的表达水平。结果:BMP2的表达在骨损伤后第5天开始升高,第15天达到高峰,第30天稍高于正常水平。结论:高峰表达时间的确定为进一步研究提供了理论上的依据。
- 董茵张瑞舒剑波郭刚
- 关键词：骨形态发生蛋白质类聚合酶链反应动物
- 重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141序列的克隆和表达载体构建被引量：1
- 2006年
- 目的:构建人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(hPTHrP1-141)基因的表达载体。方法:提取人基因组DNA,PCR扩增PTHrP1-141基因,将其克隆入原核表达载体pQE-30Xa,构建重组表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141。结果:重组载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141经限制性核酸内切酶PvuⅡ酶切鉴定,得到符合预期大小的核酸片段。结论:表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141构建成功。
- 刘新宇梁东春左爱军张镜宇郭刚
- 关键词：分子克隆质粒
