香港创新及科技基金(2001-2004)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
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- 苯扎氯铵对大鼠降结肠上皮离子转运的影响
- 2005年
- 目的探讨苯扎氯铵对大鼠降结肠上皮离子转运的影响。方法8～9周龄SD大鼠40只,随机分为两组。氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵。分别于术后1,2,3,4,8周取处理段结肠,利用短路电流技术检测结肠上皮离子转运的变化。结果实验组大鼠结肠上皮各时间点跨膜电压、基础电流明显降低,钠离子吸收电流占基础电流的百分比升高。另外,由Forskolin所引起的氯离子分泌电流也明显高于对照组,但DPC阻断Forskolin所引起的短路电流的百分比下降且小于100%(对照组大于100%),而结肠跨膜电阻两组之间无差异。结论苯扎氯铵不影响大鼠结肠黏膜屏障功能,但可造成结肠上皮离子转运功能紊乱,提示与结肠失神经有关。
- 徐纪荣金先庆陈小章
- 关键词：短路电流离子转运
- 无神经节细胞症大鼠结肠上皮离子转运的变化被引量：3
- 2005年
- 目的建立一种适合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植的实验性无神经节细胞症大鼠模型,并探讨模型大鼠结肠上皮离子转运的变化.方法 8～9周龄SD大鼠80只,随机分为二组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(benzalkonium chloride,BAC)处理大鼠降结肠浆膜40 min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠X线检查,结肠测压、取处理段结肠行组织学检查,利用短路电流技术检测结肠上皮离子转运的变化.结果 BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,近端结肠扩张,且随着时间延长症状加重.组织学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.短路电流检测提示,与对照组比较,实验组大鼠结肠上皮各时间点跨膜电压、基础电流明显降低,而钠离子吸收电流占基础电流的百分比升高.另外,由Forskolin所引起的氯离子分泌电流也明显高于对照组,但二苯胺-2,2'-二羧酸阻断Forskolin所引起的Isc的百分比下降且小于1,而结肠跨膜电阻二组之间无差异.结论①采用0.1% BAC处理降结肠浆膜成功建立了实验性无神经节细胞症大鼠模型,为进一步结肠内MSCs移植分化为神经细胞的研究奠定了基础; ②实验性无神经节细胞症大鼠模型结肠黏膜屏障功能未受损伤, 结肠上皮离子转运功能紊乱, 提示巨结肠大便排空困难除与失神经之后的平滑肌和括约肌功能失调有关外,可能还与结肠离子转运的变化有关.
- 徐纪荣金先庆陈小章
- 关键词：结肠动物实验替代试验离子转运
- 骨髓间充质干细胞移植治疗巨结肠的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的在体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)的神经细胞分化基础上,探讨移植治疗实验性巨结肠的可能性。方法8～9周龄SD大鼠用1%苯扎氯铵(BAC)制作巨结肠模型。贴壁筛选法进行MSCs原代培养、扩增后用碱性全反式视黄酸(ATRA)和碱性成纤维生长因子(FGF2)诱导法收获Nestin、NF表达阳性的MSCs细胞,显微注射法将来源于雄性大鼠,Nestin、NF阳性表达的MSCs植入雌性实验性巨结肠模型鼠病变肠段。实验分对照组(PBS组)及实验组(MSCs组),分别于术后1、2、4周进行大体观察,钡灌肠X线检查,病理学检查、平滑肌收缩功能以及采用短路电流技术检测上皮离子转运的变化。结果BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,BAC处理段出现狭窄。MSCs被纯化并被诱导为神经细胞。MSCs组免疫组化结果显示移植后1、2、4周Nestin及NF呈阳性表达,但在PBS组未观察到阳性表达。MSCs组腹胀较轻,梗阻近端少量大便,MSCs移植组大鼠结肠上皮第一周跨膜电压升高,但第四周其基础电流下降,钠离子吸收减少;MSCs移植后第一、四周Forskolin所引起的氯离子分泌电流均较PBS组高。结论MSCs可在实验性巨结肠模型鼠结肠壁内分化为神经细胞,部分恢复结肠神经调节作用。
- 金先庆徐纪荣陈小章
- 关键词：间充质干细胞移植
- 实验性巨结肠大鼠模型的建立及其生物学特性被引量：5
- 2005年
- 目的:建立一种适合骨髓间充质干细胞移植的实验性巨结肠大鼠模型并观察其生物学特性.方法:8～9周龄SD大鼠90只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替BAC.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能变化,RT-PCR检测AchE、nestin、Chrm3的表达.结果:BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重.病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.结论:采用0.1%BAC处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,此模型与先天性巨结肠动物模型相似,为进一步结肠内骨髓间充质干细胞移植移植分化为神经细胞的研究奠定了基础.
- 徐纪荣金先庆陈小章
- 关键词：无神经节细胞症动物模型苯扎氯铵
- 苯扎氯铵对大鼠结肠神经及平滑肌的影响
- 2005年
- 目的研究苯扎氯铵对大鼠结肠神经及平滑肌的影响.方法 8～9周龄SD大鼠50只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵处理大鼠降结肠浆膜40 min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵.分别于术后1、2、3、4、8周取处理段结肠行组织学检查,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测乙酰胆碱酯酶(AchE)、巢蛋白(nestin)、乙酰胆碱M3受体(Chrm3)的表达,循环水浴药理学检测平滑肌收缩功能变化.结果苯扎氯铵处理后1周,大鼠结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失;结肠平滑肌对乙酰胆碱敏感性增强.结论采用0.1%苯扎氯铵可使大鼠结肠产生去神经作用,结肠平滑肌对乙酰胆碱敏感性增强.
- 徐纪荣金先庆陈小章
- 关键词：结肠平滑肌收缩苯扎氯铵反转录-聚合酶链反应结肠平滑肌
