江苏省社会发展科技计划(BE2011786)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 相关作者：李晓军严孝岭高德玉虞伟刘阳更多>>
- 相关机构：南京军区南京总医院江苏大学更多>>
- 发文基金：江苏省社会发展科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 类风湿关节炎患者血清免疫复合物的提纯及对人脐静脉内皮细胞增殖能力的影响
- 2014年
- 目的提纯并鉴定类风湿关节炎（RA）患者血清中免疫复合物（s—IC），并研究其对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖功能的影响。方法用G蛋白亲和层析法分别从抗瓜氨酸化蛋白抗体（ACPA）阳性（ACPA＋）RA患者、SLE患者及健康人对照血清中提取IC，用SDS—PAGE对提取的s—IC进行纯度鉴定，用化学发光免疫分析法测定s—IC中ACPA含量，用westernblot法鉴定纯化Ic中的瓜氨酸化蛋白质。体外培养HUVEC，分别用RA患者血清IC（RA—IC）、SLE患者血清IC（SLE-IC）、健康人血清IC（C-IC）刺激HUVEC，培养24h后，用CCK-8细胞增殖法检测细胞的增殖水平。结果用G蛋白亲和层析法可自血清中提取出纯度较高的IC，ACPA’RA患者血清经G蛋白柱纯化后，IC中ACPA的回收率可达56．85％。westernblot结果显示，RA患者s—Ic中在相对分子质量（Mr）25000～55000间出现较多SLE—IC和c—Ic中未有的条带。用s—IC刺激体外培养的HUVEC，当s-IC浓度为50μg／mL时，RA—Ic与SLE-Ic组HUVEC的增殖水平均显著高于c-Ic组（P均〈0．01）；当IC浓度为100μg／mL时，RA—IC组的HUVEC增殖水平显著高于SLE-IC与C-IC组（P均〈0．01）。结论成功提取ACPA-RA患者s-IC，RA-IC能显著促进HUVEC增殖。
- 张萍徐敏严孝岭高德玉高文博虞伟李晓军
- 关键词：类风湿关节炎免疫复合物人脐静脉内皮细胞
- 抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的研究被引量：11
- 2013年
- 目的:研究类风湿关节炎(RA)患者血清抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物(ACPA-IC)对RA患者关节成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和分泌细胞因子功能的影响。方法:用PEG沉淀法提取RA患者血清免疫复合物(IC),ELISA法检测IC中ACPA-IC水平。用G蛋白免疫亲和层析法从6份ACPA-IC(+)RA血清、4份ACPA-IC(-)RA血清及10份正常人血清中提取IC。体外培养RA关节FLS;分别用RA ACPA-IC(+)提取物、ACPA-IC(-)提取物及健康人血清IC(C-IC)刺激FLS,用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测FLS增殖情况,液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果:RA患者ACPA-IC(+)提取物能够显著促进FLS增殖,与对照组IC比较,在培养24小时时间里,四种浓度(25、50、75和100μg/ml)的ACPA-IC都能显著促进FLS增殖。RA患者血清ACPA-IC(+)和ACPA-IC(-)提取物刺激FLS 24小时后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8量均显著高于ACPA-IC(-)组和C-IC组,ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌IL-6水平显著高于C-IC组,但与ACPA-IC(-)组无显著性差异。三组间刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论:RA患者血清ACPA-IC可促进FLS增殖,并诱导其分泌IL-6、IL-8和GM-CSF等炎性细胞因子,进而进一步诱发滑膜炎症反应及骨质破坏。
- 高德玉陈芳芳刘阳王凯虞伟严孝岭李晓军
- 自身抗体检测在临床诊断中的应用特点被引量：3
- 2014年
- 自身免疫疾病（autoimmune disease,AID）是机体因免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的疾病状态。AID发病受多重因素影响,目前公认,环境因素与遗传因素共同作用是导致AID的主要原因。AID最重要的特征之一是患者血液或其他体液中可检测出多种针对自身组织细胞成分的自身抗体。在患者血液中可以检测到多种针对自身组织细胞成分（核酸,蛋白,受体,或者功能细胞组件）的自身抗体（autoantibody,AAB）。
- 张萍李晓军
- 关键词：自身抗体检测自身免疫疾病AUTOIMMUNE组织细胞免疫应答DSDNA
- 抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物ELISA法的建立与临床初步应用被引量：2
- 2014年
- 目的建立检测血清抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物(ACPA-IC)的ELISA技术,探讨ACPA-IC对类风湿关节炎(RA)的临床意义。方法建立检测血清ACPA-IC的ELISA技术,并对方法的特异性、稳定性和重复性进行评估。采用PEG6000沉淀法自RA患者血清中提取IC。用建立的ACPA-IC ELISA法对92例RA患者包括46例ACPA阳性(ACPA+)患者和46例ACPA阴性(ACPA-)患者、46例SLE患者及47例健康献血员血清ACPA-IC水平进行检测。并分析RA患者血清ACPA-IC水平与ACPA和类风湿因子(RF)的相关性。结果经方法学评估,建立的ACPA-IC ELISA法在特异性、稳定性和可重复性方面均达到检测要求。ACPA+患者ACPA-IC水平高于ACPA-患者、SLE患者及健康对照组(P<0.01)。当cut off值设为0.9时,该法测得RA患者血清ACPA-IC的阳性率为45.65%(42/92),显著高于SLE(6/46,13.04%)及健康对照组(2/47,4.26%),χ2分别为14.376和24.632,P均<0.01。46例ACPA+RA患者ACPA-IC阳性者36例(78.26%),而ACPARA患者ACPA-IC阳性者仅6例(13.04%),差异有统计学意义(χ2=39.429,P<0.01)。ACPA-IC与ACPA和RF的Spearman相关分析结果表明,RA患者血清ACPA-IC水平分别与血清ACPA(r=0.708,P=0.000)、RF(r=0.571,P=0.000)呈正相关。结论成功建立检测血清ACPA-IC水平的ELISA技术。RA患者尤其是ACPA+患者血清ACPA-IC水平显著升高。ACPA-IC在RA患者血清中出现可能具有重要的致病意义。
- 李晓军王凯高德玉虞伟严孝岭陈芳芳刘阳
- 关键词：免疫复合物类风湿因子
