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新疆地方病分子生物学实验室开放课题(XJDX0208-2009-02)
作品数:
1
被引量:1
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刘涛
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2011
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食管鳞癌中微小核糖核酸-21的作用及对靶蛋白的影响
被引量:1
2011年
目的探讨微小RNA(miRNA)-21对食管鳞癌细胞Ecal09和哈萨克族食管癌的促增殖作用及对程序性细胞死亡基因4(PDCD4)表达的影响。方法将食管鳞癌细胞系Ecal09分为miRNA-21Mimics组(转染序列5'-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’)、miRNA-21抑制剂组(转染序列5'-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3')、阴性对照组(转染随机序列)和正常对照组(不予转染等任何处理)。细胞按4.5×10^5个/孔接种于6孔板,基于RNA干扰(RNAi)技术、使用脂质体2000试剂进行细胞转染。采用细胞计数法检测转染后各组细胞的增殖情况。使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT—PCR)检测各组细胞的miRNA-21转录水平。采用Western印迹技术检测转染后各组PDCD4蛋白表达情况。检测18对哈萨克族食管癌及其对应的癌旁正常食管组织中miRNA-21转录和PDCD4蛋白表达情况。结果转染48h后,与正常对照组比较,miRNA-21Mimics组Ecal09细胞数增加36%(P=0.002),miRNA-21抑制剂组细胞数减少28%(P=0.002),阴性对照组细胞数变化不明显(P=0.515)。转染48h后,miRNA-21抑制剂组、miRNA-21Mimics组、阴性对照组、正常对照组miRNA-21的相对表达量分别为0.37±0.10、9.17±1.08、0.74±0.23和1.04±0.34,PDCD4蛋白相对表达量分别为1.47±0.11、0.61±0.09、0.89±0.12、0.79±0.02。与正常对照组比较,miRNA-21抑制剂组miRNA-21相对表达量下降(P=0.031)、PDCD4蛋白相对表达量上调(P=0.001),miRNA-21Mimics组miRNA-21相对表达量上升(P=0.001)、PDCD4相对表达量下调(P=0.030),阴性对照组则差异无统计学意义(P值分别=0.272和0.541)。18对哈萨克族食管癌组织中16对的miRNA-21相对表达量(0.11±0.09)高于其对应的癌旁正常食管组织(0.03±0.03,P=0.001),PDCD4蛋白相对表达量(0.92±0.39)低于其对应的癌旁正常食管组织(1.57±0.8
刘涛
刘清
马文静
阿孜古丽·吐尔逊
郑树涛
伊力亚尔·夏合丁
马正海
卢晓梅
关键词:
微小核糖核酸
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