吉林省科技厅科研基金(20030224-2)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：张林波吴红珍刘英嘉张丹丹刘香英更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 全细胞差减筛选法在噬菌体展示文库筛选中的应用被引量：3
- 2012年
- 全细胞差减筛选法是近年来在细胞筛选的基础上发展起来的一项筛选技术,其利用成对的细胞,即两种不同状态的细胞对噬菌体展示文库进行差减筛选,主要用于筛选新的抗原表位、受体、配体、新型疫苗、肿瘤细胞的靶向活性肽、靶向基因载体及受体或酶的激动剂或抑制剂等。本文就其筛选的原理、优缺点、优化及其在噬菌体展示文库筛选中的应用作一综述。
- 吴红珍张林波
- 关键词：全细胞
- 结核分枝杆菌抗原模拟表位肽的筛选及免疫活性鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:从噬菌体随机12肽库中筛选结核分枝杆菌模拟抗原表位,并初步研究其免疫活性。方法:以鹿结核阳性血清纯化多克隆抗体IgG作为固相配基筛选噬菌体随机12肽库,按吸附-洗脱-扩增过程进行3轮筛选,随机挑取20个单克隆进行特异性鉴定,将筛选后得到的阳性克隆扩增后免疫BALB/c小鼠作为实验组;以TBS为阴性对照组,BCG为阳性对照组,采用间接ELISA方法检测抗体效价,MTT法检测淋巴细胞增殖能力。每组小鼠免疫3周后再鼻腔接种BCG,3周后无菌取左全肺研磨计算肺脏荷菌量,取右全肺制备病理切片观察肺脏病理变化。结果:经三轮筛选后阳性克隆得到富集,ELISA鉴定20个单克隆中有15个阳性克隆,阳性率为75%。免疫后实验组小鼠抗体水平高于BCG组(P<0.01)。小鼠脾淋巴细胞增殖实验,经ConA、LPS、PPD刺激后实验组SI值均高于BCG组,但差异无显著性(P>0.05),与TBS组比较差异有显著性(P<0.01)。实验组、BCG组均观察到少量的淋巴细胞浸润,而TBS组肺泡结构消失,组织发生实变。肺脏荷菌量实验显示实验组肺脏荷菌量[(4.080±0.035)log CFU.mg-1)]低于TBS组[(4.360±0.110)log CFU.mg-1](P<0.01),但高于BCG组荷菌量[(3.980±0.023)log CFU.mg-1](P>0.05)。结论:成功筛选得到含有结核分枝杆菌抗原模拟表位的阳性克隆,这些阳性克隆能有效诱导小鼠产生比BCG更高的抗体效价和保护效应,对其进行进一步序列测定和功能分析将有助于结核病疫苗的开发。
- 张林波王海燕刘香英张丹丹刘英嘉温得中
- 关键词：结核分枝杆菌随机肽库模拟表位免疫分析
