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顺铂诱导Daudi细胞增殖抑制中分化抑制因子3的表达分析被引量：5: 2007年; 目的探讨Id3在顺铂诱导人Burkitt's B淋巴瘤细胞(Daudi)增殖抑制和凋亡中的作用。方法应用顺铂处理人Daudi细胞,台盼蓝染色法检测不同浓度的顺铂对Daudi细胞生长的抑制作用;流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率;用RT-PCR检测顺铂处理后Id3、Id2、钙调素(CaM)基因表达水平变化。结果Daudi细胞增殖抑制率随顺铂浓度的增加而增加;2μg/ml的顺铂作用24h后,Daudi细胞表现出G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例下降;AnnexinⅤ/PI双染法和FCM结果表明,顺铂可诱导Daudi细胞发生凋亡;RT-PCR结果表明,顺铂处理Daudi细胞可导致Id3 mRNA的表达增加,而Id2、CaM mR-NA无明显变化。结论Id3基因的上调表达可能在顺铂抑制Daudi细胞增殖、诱导细胞凋亡中发挥作用。; 贾丽李晓军夏欣一吴永明; 关键词：ID3 顺铂 DAUDI细胞

人分化抑制因子3基因原核表达载体的构建及融合蛋白的表达被引量：5: 2008年; 目的:在大肠埃希菌中表达和纯化人分化抑制因子3(Id3),为进一步研究Id3的生物学活性打下基础。方法:PCR扩增人Id3基因编码区的DNA片段,将PCR产物克隆至pGEM-TEsay载体中并测序鉴定。将Id3 cDNA片段重组入原核表达质粒pET-32a(+),转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,表达产物经Western blot鉴定,并通过镍亲和层析柱纯化His-Tag标记的融合蛋白。结果:成功地构建了Id3的原核表达载体。Western blot分析证实,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了His-Tag融合蛋白,亲和层析法纯化后获相对分子质量为34 000的Id3融合蛋白。结论:重组质粒pET32a(+)-Id3能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱可纯化获得融合蛋白。; 贾丽李晓军; 关键词：原核表达融合蛋白

分化抑制因子3的表达调控机理及其功能被引量：4: 2008年; 分化抑制因子3(inhibitor of differentiation 3,Id3)属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录因子家族成员之一,该分子参与细胞周期调控过程,在细胞生长与发育、机体的生理及病理过程中发挥重要调控作用。其表达和功能涉及许多复杂的调控机制。; 李晓军汪萍贾丽; 关键词：信号转导

分化抑制因子与肿瘤相关性研究进展被引量：11: 2008年; 分化抑制因子(inhibitor of differentiation,Id)是广泛表达的螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)家族成员中参与负性调节的转录因子,在真核生物中,Id蛋白在发育、调控细胞增殖和分化、肿瘤血管形成、侵袭性以及转移等方面有着重要的作用.最近的研究表明,Id表达不仅和肿瘤形成、进展以及预后相关,而且有望成为肿瘤治疗的新靶点.综述了Id在肿瘤发生发展过程中可能的机制、作用以及在肿瘤靶向治疗中的前景.; 朱传东李晓军; 关键词：分化抑制因子肿瘤靶向治疗

人Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达及其对细胞生长的抑制被引量：8: 2008年; 目的:研究外源性分化抑制因子3(Inhibitor of differentiation 3,Id3)基因表达对人肺腺癌细胞系A549细胞生长的抑制作用。方法:构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3,采用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞。FCM分析转染细胞EGFP表达效率,荧光显微镜观察EGFP表达情况;半定量RT-PCR、免疫细胞化学分析转染后A549细胞Id3 mRNA和蛋白的表达。MTT法检测转染后A549细胞生长抑制情况,FCM分析A549细胞周期进程,Annexin V/7-AAD和Hoechst33258染色检测转染后细胞的凋亡情况。结果:成功构建人Id3与EGFP融合基因表达载体pEGFP/Id3;荧光显微镜和FCM观察到EGFP的有效表达,转染48～72 h时EGFP表达率最高;Id3 mRNA及蛋白在转染后的A549细胞中能有效表达。转染后48 h和72 h,pEGFP/Id3转染组A549细胞生长受到明显抑制(P<0.01);细胞周期分析表明,pEGFP/Id3转染组G_0/G_1期细胞显著高于对照组(P<0.05);Annexin V/7-AAD双染结果显示,pEGFP/Id3转染组细胞的早期凋亡率[(10.67±2.60)%]显著高于pEGFP组[(3.39±2.21)%]和未转染组[(2.35±0.95)%](P<0.05);Hoechst33258染色结果也证实pEGFP/Id3组A549细胞出现明显凋亡形态特征。结论:外源性Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达能抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。; 朱传东李晓军汪萍贾丽仲爱芳陈龙邦; 关键词：肺癌细胞增殖抑制凋亡

分化抑制因子Id2和Id3在肿瘤细胞中的表达被引量：12: 2007年; 目的:研究分化抑制因子(Id)基因家族在不同肿瘤细胞及健康人外周单个核细胞(PBMC)中的表达情况,为探讨Id基因与肿瘤生长的关系提供实验依据。方法:提取血液病患者和健康人PBMC、人Burk itt’s B淋巴瘤细胞(Daud i)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)、人组织细胞性淋巴瘤细胞(U937)、人前列腺癌细胞(PC-3)、人胃癌细胞(SGC)、人肺癌细胞(SPC),人卵巢癌细胞(COC2)的细胞总RNA,根据Id2和Id3 cDNA全长序列合成两对引物,运用RT-PCR方法,对以上细胞中Id2和Id3 mRNA的表达进行半定量分析。结果:不同的Id基因在不同人肿瘤细胞中的表达具有一定差异性:Id2在健康人PBMC和各类肿瘤细胞中均呈普遍表达趋势;Id3在健康人淋巴细胞中未见表达或表达水平极弱,而在不同肿瘤细胞中的表达有差异,Id3在PC-3中的表达最高,K562中最低。不同的Id基因在同种细胞中的表达的差异性也较大,Id2 mRNA的表达水平显著高于Id3mRNA的表达水平。Id2、Id3mRNA在血液病患者PBMC中均有不同程度的的表达。结论:不同的Id基因在不同的肿瘤细胞中有不同的表达水平,Id3的异常表达在肿瘤细胞增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。; 汪萍李晓军贾丽马百坤黄宇烽; 关键词：分化抑制因子逆转录聚合酶链反应血液病肿瘤细胞

分化抑制因子基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达被引量：4: 2006年; 目的研究分化抑制因子(Id)基因在血液系统恶性肿瘤细胞中的表达。方法提取血液病患者及正常人外周血单个核细胞、人Burk itt s B淋巴瘤细胞(Daud i)、人T淋巴细胞性白血病细胞(Jurkat)、人慢性髓性白血病细胞(K562)和人组织细胞性淋巴瘤细胞(U937)的细胞总RNA,根据Id1、Id2和Id3 cDNA全长序列合成三对引物,用RT-PCR方法对以上细胞中Id1、Id2和Id3 mRNA的表达进行半定量分析。结果Id(Id1、Id2、Id3)mRNA在Daud i、U937、Jurkat、K562以及血液病患者的淋巴细胞中均有不同程度的的表达;Id2在正常人淋巴细胞中普遍表达;Id1和Id3几乎不表达或表达水平极弱。结论不同的Id基因在不同分化阶段的淋巴细胞中有不同的表达水平,Id1、Id3的异常表达在淋巴细胞的分化、增殖及肿瘤的发生中可能发挥一定的作用。; 汪萍李晓军黄宇烽贾丽马百坤杨家新; 关键词：RT-PCR 淋巴细胞肿瘤

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江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(050203D)

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