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山西省青年科技研究基金(2009021035-3)
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相关作者:
卢晓霞
潘薇薇
赵峰梅
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何永吉
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卢晓霞
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2012
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Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达
2012年
采用PT-PCR扩增Pyk2-kinase基因,定向克隆至转移载体pFastBac HTB,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH10Bac中,转座后利用抗性及蓝白斑筛选阳性克隆获得重组Bacmid/Pyk2-kinase;提取重组杆粒,PCR法鉴定后转染昆虫细胞Sf9包装重组杆状病毒;利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过间接免疫荧光(IFA)、SDS-PAGE和Western blot检测表达情况。最终获得了重组杆状病毒rBac-Pyk2-kinase,实现了Pyk2-kinase在Sf9细胞中的重组表达,其相对分子质量为32 ku,IFA、SDS-PAGE和Western blot检测结果与预期一致。
何永吉
卢晓霞
粱雅丽
潘薇薇
赵峰梅
赵邑
关键词:
PYK2
杆状病毒
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