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陕西省科技攻关计划(2011K12-05-15)

作品数:1 被引量:3H指数:1
相关作者:徐丽娟更多>>
相关机构:解放军第307医院第四军医大学第一附属医院更多>>
发文基金:陕西省科技攻关计划更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇多能干细胞
  • 1篇诱导性多能干...
  • 1篇结构域
  • 1篇干细胞
  • 1篇OCT4
  • 1篇SOX2

机构

  • 1篇解放军第30...
  • 1篇第四军医大学...

作者

  • 1篇徐丽娟

传媒

  • 1篇生物技术通讯

年份

  • 1篇2012
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
带有穿膜结构域的转录因子蛋白Oct4和Sox2的融合表达被引量:3
2012年
目的:克隆、表达及纯化带有穿膜结构域的转录因子蛋白Oct4和Sox2。方法:根据GenBank中的Oct4和Sox2基因序列,在其3'端引入穿膜结构域11R,并在其两端引入NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点,进行全基因合成;将目的基因克隆至pET41a载体,进行酶切鉴定及测序;将所获阳性重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对表达产物进行Western印迹鉴定;最后用Ni-NTA亲和层析柱对所获目的蛋白进行纯化。结果:质粒酶切鉴定结果表明带有目的基因的重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果显示有相对分子质量约42×103和38×103的特异性蛋白表达条带,经Western印迹证实为目的蛋白;用Ni-NTA亲和层析柱纯化后,得到均一的Oct4和Sox2目的蛋白。结论:得到带有穿膜结构域的转录因子融合蛋白Oct4和Sox2,为今后安全开展诱导性多能干细胞研究奠定了基础。
徐丽娟安群星陈晓鹏
关键词:OCT4SOX2诱导性多能干细胞
共1页<1>
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