重庆市卫生局自然科学基金(99-1003)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：陈雅棠王昌源张洪花黄爱龙唐霓更多>>
- 相关机构：重庆医科大学青岛市疾病预防控制中心山东大学更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组泡球蚴主要表面抗原在棘球蚴病免疫诊断中的效果被引量：2
- 2006年
- 目的研究非融合表达重组抗原用于棘球蚴病免疫诊断的效果。方法将泡球蚴主要表面抗原基因编码序列克隆于原核非融合表达载体pQE30(+)并进行表达。以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹(WB)试验对重组抗原鉴定。亲和层析纯化重组抗原,用于酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清特异性抗体。结果SDS-PAGE及WB分析显示泡球蚴主要表面抗原基因在大肠埃希菌内得到了高效非融合表达。以此重组抗原进行ELISA试验,检测棘球蚴病68例,阳性率达97．1％,检测囊虫等其他感染性疾病80例及健康人血清20份,阴性符合率达98％。结论泡球蚴主要表面抗原基因在大肠埃希菌中获得了高效非融合表达,以该重组抗原建立的ELISA试验,对棘球蚴病诊断具有较高的敏感性和属特异性。
- 王昌源张洪花陈雅棠李文桂唐霓
- 关键词：免疫学试验
- 多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗诱生免疫应答的实验研究被引量：5
- 2006年
- 目的观察多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗免疫BALB/c小鼠引起的体液和细胞免疫应答。方法30只BALB/c小鼠随机分成3组:Ⅰ组,肌注空质粒(pcDNA3.1)100μg/鼠;Ⅱ组,肌注多房棘球绦虫elp基因真核表达重组质粒(pcD-ELP)100μg/鼠;NS组,肌注等体积生理盐水。每2周免疫1次,共3次。ELISA方法检测免疫后不同时间产生的特异性IgG1,IgG2a和IgG 2 b水平。双抗体夹心ELISA法检测免疫鼠脾脏单个核细胞(PMNC)在受到特异抗原刺激后,产生IL-4I、L-12和IFN-γ的能力,3H-TdR掺入法检测脾淋巴细胞的增值能力。结果首次免疫后4周,Ⅱ组小鼠血清可检测到特异性IgG1I、gG2a和IgG2b抗体,随免疫时间和免疫次数的增加3种特异性抗体的OD值逐渐增高,实验结束时(首次免疫后7周)3种特异性抗体OD值均最高。Ⅰ组和Ⅱ组小鼠脾PMNC培养上清中IFN-γ浓度分别为50 pg/ml和55 pg/ml,受特异抗原刺激后分别为44 pg/ml和101.5 pg/ml。NS组IFN-γ及各组IL-4和IL-12均未检出。Ⅰ组和Ⅱ组小鼠脾淋巴细胞增殖能力增高,其淋巴细胞CPM值分别为NS组的85倍和123倍,受到特异抗原或刀豆素刺激其淋巴细胞增殖更明显。结论多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗可刺激BALB/c小鼠同时产生很强的细胞免疫和体液免疫应答。
- 王昌源张洪花陈雅棠黄爱龙
- 关键词：核酸疫苗免疫应答
