北京市自然科学基金(5102014)
- 作品数：17 被引量：42H指数：3
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- 表没食子儿茶素没食子酸酯和牛磺酸联用对犬白内障模型晶状体上皮细胞凋亡的影响
- 2012年
- 为提供兽医临床用药治疗白内障的理论依据,选取健康成年犬15只(30眼),随机分为模型组、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)组、牛磺酸、EGCG联合牛磺酸组和对照组,每组6个重复。除对照组外其他组用fenton液造模。裂隙灯观察晶状体的混浊情况,并根据国际通用的晶状体混浊分类体系Ⅲ(LOCSⅢ)分类,当混浊达到II期时用药治疗。临床用药40d后,取出晶状体透射电镜观察形态结构的变化;免疫组织化学法测定晶状体上皮细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达水平;qRT-PCR测定其mRNA的表达水平。结果表明,与模型组相比联合组中Bax/Bcl-2的比值和Caspase-3的表达较模型组显著降低(P<0.05),证明联合用药可以通过上调凋亡基因Bcl-2的表达抑制细胞凋亡。
- 王霞张康夏楠李婧赵海焦吴国娟张中文
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牛磺酸晶状体上皮细胞凋亡
- 连翘酯苷在体外对鸡IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的影响(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。[方法]将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg/ml),采用荧光定量RT-PCR,检测IFN-α和JAK-STAT通路相关因子的mRNA表达变化;用western blotting检测IFN-α的蛋白表达情况。[结果]与正常组相比,连翘酯苷不仅显著提高了IFN-α的表达量(P<0.05);而且明显上调了STAT1、JAK1、IFNAR1、IFNAR2、IRF1、IRF7的表达。[结论]连翘酯苷能够在鸡胚肾细胞(chicken embryo kidney cells,CEKs)上诱导IFN-α的表达,且能够正向调节JAK-STAT信号通路传导。
- 李华伟张中文陆彦马元元张禹吴国娟
- 关键词：CHICKEMBRYOJAK-STAT
- 转TGEV-S基因玉米中目的基因的PCR检测及优化
- 2014年
- 为提高转基因玉米中目的基因的检出效率,以猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白（TGEV-S）转基因玉米为材料,利用PCR方法检测样品中的目的基因.通过对PCR反应体系中4种不同DNA聚合酶和8种退火温度进行比较,建立和优化了转基因玉米中TGEV-S基因的PCR检测方法.对450株转基因玉米叶片DNA和种子DNA中的TGEV-S基因片段进行检测,并设计33对引物检测插入转基因玉米基因组DNA中的质粒pBAC9020DNA片段.结果显示,LA Taq酶对叶片DNA和种子DNA中TGEV-S片段的PCR扩增敏感性和特异性均优于其他Taq聚合酶,且退火温度为53～55℃时扩增效果较好.分别对450份转基因玉米叶片DNA和种子DNA检测结果显示阳性率分别为82.5％和76.3％.利用33对引物进行的PCR扩增及测序结果显示质粒pBAC9020基因片段已全部插入该玉米基因组DNA中.本试验建立的转TGEV-S基因玉米PCR检测方法敏感性和特异性高,为转基因玉米阳性植株的检测奠定了坚实的基础.
- 覃湘婕周宏专杨兵徐福洲薛静张晓东王金洛
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒转基因玉米目的基因DNA聚合酶
- 4种方法建立大鼠糖性白内障模型的比较研究被引量：3
- 2013年
- 试验旨在研究D-半乳糖饲喂及D-半乳糖、葡萄糖和链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射4种方法能否成功建立大鼠糖性白内障模型,并在此基础上探讨各种方法的优缺点,以期找出一种快速、有效、安全性高、实用性及可重复性强的大鼠糖性白内障模型建立方法,并为犬糖性白内障模型建立提供理论依据。本试验采用D-半乳糖饲喂(日粮30%)及50%D-半乳糖(15g/kg)、50%葡萄糖(15g/kg)和STZ(70mg/kg)腹腔注射4种方法对同日龄大鼠进行模型建立,试验周期为30d,给药48h后尾静脉穿刺测定血糖,72h后用裂隙灯检查晶状体变化情况,每隔3d测定体重变化,同时每天测定饮水量及摄食量。试验结果显示,D-半乳糖饲喂组晶状体无异常变化;D-半乳糖腹腔注射组和葡萄糖腹腔注射组血糖始终未达到糖尿病血糖标准,但均在第3天可见白内障发生;STZ腹腔注射组在72h动物出现糖尿病症状,4～5周诱发白内障。结果表明,D-半乳糖饲喂不能使大鼠产生白内障;D-半乳糖腹腔注射及葡萄糖腹腔注射仅需3d即可诱发白内障,快速且成模率高,适合进行白内障药物延缓效应的研究;STZ腹腔注射需4～5周建立糖性白内障模型,因而更适用于研究糖性白内障的发病机制。
- 李婧张禹杨菲赵海焦田娅慧贾志华吴国娟张中文
- 关键词：D-半乳糖葡萄糖链脲佐菌素糖性白内障
- SnoN在马兜铃酸肾病小鼠模型肾中的表达
- 2013年
- 通过观察正常小鼠肾组织中和马兜铃酸组小鼠肾组织中转录共抑制因子SnoN表达水平的变化,探讨SnoN在马兜铃酸肾病小鼠肾中的作用及意义。对于构造的并采用病理学方法确证的马兜铃酸肾病小鼠模型,通过免疫组化技术、PCR技术和Western-blot技术,对肾中SnoN基因转录水平和SnoN蛋白的表达水平进行了检测。结果显示,马兜铃酸组肾组织结构破坏严重,虽然SnoN mRNA在试验组与对照组之间表达量无统计学差异(P>0.05),但SnoN在试验组的表达量明显增多。马兜铃酸Ⅰ对小鼠具有很强的肾毒性,转录共抑制因子SnoN在马兜铃酸肾病小鼠肾中的表达量升高。
- 吴金栋陆彦田娅慧高磊王惠川吴国娟
- 关键词：马兜铃酸肾病小鼠
- 三种药物对大鼠糖尿病性白内障延缓效应的比较被引量：5
- 2013年
- 目的验证腹腔注射葡萄糖能否成功建立大鼠糖性白内障模型,并且探讨黄芩苷点眼、牛磺酸点眼、牛磺酸腹腔注射以及Vc腹腔注射对大鼠糖性白内障的延缓效应及短期治疗作用。方法按照雄鼠每次2.5mL,雌鼠2 mL剂量注射30%葡萄糖生理盐水建立大鼠糖性白内障模型,给药同期进行,点眼每日2次,腹腔注射每日1次。从注射葡萄糖第3天开始对各组晶状体进行裂隙灯检查,并定期测定体重、饮食量等相关指标。结果实验结果表明葡萄糖腹腔注射第3天即可使大鼠晶状体出现空泡现象。各组药物的延缓效应与短期治疗效应相同,依次为牛磺酸注射、黄芩苷点眼、牛磺酸点眼以及Vc注射。结论 30%葡萄糖腹腔注射能快速建立大鼠糖性白内障模型,且比半乳糖注射建模成本低,成模率高。4%牛磺酸腹腔注射以及0.1%黄芩苷在预防和治疗大鼠糖性白内障方面效果显著。
- 李婧姚华贾志华吴国娟张中文
- 关键词：糖性白内障牛磺酸黄芩苷VC
- HPLC-超滤离心法测定连翘酯苷复方脂质体包封率被引量：13
- 2013年
- 目的 建立一种快速、准确测定连翘酯苷复方脂质体包封率的方法。方法采用逆向蒸发法制备连翘酯苷复方脂质体，建立检测连翘酯苷复方含量的高效液相色谱条件，用超滤离心法处理复方脂质体，测定连翘酯苷复方脂质体的包封率。结果用连翘酯苷和绿原酸对照品建立标准曲线，在0．78125-50μg-mL-1内线性关系良好，采用超滤离心法处理样品后连续3次测定包封率，平均包封率为92．38％和44．72％，其RSD分别为2．76％和2．35％。结论HPLC．超滤离心法可准确、方便的测定连翘酯苷复方脂质体的包封率。
- 祝文琪徐卫康侯晓林陆彦吴国娟
- 关键词：高效液相色谱法连翘酯苷脂质体包封率
- 膏芩口服液对内毒素诱导小型猪发热的影响被引量：3
- 2011年
- 本研究旨在探索膏芩口服液对内毒素发热小型猪的解热效果及机制。40头试验小型猪,随机分为4组:对照组、模型组、安乃近组、膏芩口服液组,每组10头。采用大肠杆菌内毒素(LPS)80μg.kg-1,连续2次,间隔12 h,腹腔注射攻毒复制试验猪发热模型,第1次攻毒6 h后,对照组和模型组灌服生理盐水;安乃近组注射安乃近;膏芩口服液组灌服膏芩口服液,1次.d-1,连续3 d。分别监测每组6头试验猪的基础体温和攻毒给药后1、3、5、24、30、42、54 h肛温,观察临床症状并评分,并在54 h时,各组试验猪前腔静脉采血,检测血清中TNFα-、IL-1、cAMP、PGE2的含量。结果表明,与模型组相比,膏芩口服液组能显著缓解内毒素所引起的小型猪发热临床症状,降低体温;与对照组相比,模型组中TNF-α、PGE2、cAMP、IL-1显著增加(P<0.05);与模型组相比,膏芩口服液组能显著降低血清TNF-α、PGE2、cAMP含量(P<0.05),但对于IL-1作用不显著(P>0.05)。由此可见,膏芩口服液能明显抑制内毒素所引起的小型猪发热,其解热作用的机制可能与抑制血清细胞因子TNFα-的生成,减少发热介质PGE2和cAMP的释放有关。
- 云水刘凤华许剑琴刘秋东武聚富吴国娟张中文
- 关键词：脂多糖发热
- 磺胺母核人工半抗原的合成与鉴定
- 2013年
- 合成磺胺母核人工半抗原,并对其产物进行鉴定。采用4-氨基苯甲酸甲酯(PBPA)和对乙酰氨基苯磺酰氯(ASC)为原料,经过亲和取代,酯的水解反应合成磺胺药物共有的母核结构苯甲酸对氨基苯磺酰胺(SH),应用质谱法(ESI-MS)与核磁共振氢谱法(1 H-NMR)鉴定SH。质谱结果显示[M-]=291.037 66,与理论值[M]=292相符,表明SH合成成功;核磁共振氢谱(1 H-NMR)的数据与SH化合物的结构相符。磺胺母核人工半抗原合成成功,为研制磺胺药多残留检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定基础。
- 杜玉玲陆彦祝文琪高磊岳城吴国娟
- 关键词：半抗原
- 不同剂量链脲佐菌素及不同性别大鼠糖性白内障模型的比较研究
- 2013年
- 本试验旨在研究不同剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)及不同性别在建立大鼠糖性白内障模型方面的差异。将65、70和75mg/kg 3个浓度STZ通过一次性腹腔注射建立雌、雄性大鼠糖性白内障模型,36h后尾静脉采血测血糖,3周后进行裂隙灯检查,每天测量动物饮食量及排粪尿量变化,每周测定体重。试验结果显示,70mg/kg STZ比65mg/kg STZ糖性白内障发生时间缩短约1周,且比75mg/kg STZ死亡率低。同浓度STZ腹腔注射后雌性大鼠糖尿病发生时间为72h,雄性大鼠为36h,白内障发生时间雌性比雄性大鼠慢约1周。试验结果表明,腹腔注射70mg/kg STZ在糖性白内障模型建立所需时间及模型稳定性等方面具有优势,雄性大鼠较雌性更易于建立糖性白内障模型。
- 李婧田海燕杨菲赵海焦田娅慧吴国娟张中文
- 关键词：链脲佐菌素糖性白内障不同性别
