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国家科技重大专项(2008ZX10004-008): 作品数：35 被引量：274H指数：8; 相关作者：张慧娟魏建春张恩民崔志刚阚飙更多>>; 相关机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所中国疾病预防控制中心北京市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家科技重大专项北京市科技新星计划江苏省科技支撑计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术农业科学生物学更多>>

三种方法转染绿色荧光蛋白质粒的效果评价被引量：5: 2010年; 目的比较常见的真核细胞转染技术,评价采用绿色荧光蛋白为报告基因来观察细胞转染效率高低的方法。方法分别采用磷酸钙法、电穿孔法和脂质体法将pEGFP-C1质粒转染COS-7细胞,对每种方法的转染效率及对细胞的毒性进行评价。结果脂质体法的转染率为67%,电穿孔的转染率为43%,磷酸钙法的转染率为28%。脂质体法转染对细胞的毒性最小。结论采用绿色荧光蛋白为报告基因的真核细胞转染技术中,脂质体法是效率高、安全性大的方法。; 孙丽娜魏建春张慧娟张恩民俞东征海荣; 关键词：绿色荧光蛋白转染脂质体

三种核酸染料应用于细菌脉冲场凝胶电泳染色的比较研究被引量：2: 2011年; 目的比较Gelred、GoldView及溴化乙锭(EB)三种染料在病原菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)中的染色效果,选择更为安全和灵敏的核酸染料,并形成标准化操作应用于病原菌分子分型监测网络PulseNet China。方法选择霍乱弧菌作为评价菌株,按照病原菌分子分型监测网络(PulseNet)的PFGE标准操作方案进行电泳,采用Gelred、GoldView及EB三种染料分别染色,分析比较实验结果。结果 Gelred染色的胶块清晰度最好,EB次之,均高于GoldView;Gelred染色的图谱,相邻条带边缘清晰,更容易辨别区分。EB和GoldView染色后必须脱色,使用Gelred染色脱色时间较短,亦可以不经过脱色步骤,但脱色后的电泳条带边缘更加锐利。结论 Gelred是一种更安全、更灵敏的核酸染料,可以取代EB应用于PFGE。制定了使用Gelred进行PFGE染胶的标准方案,用于PulseNet China网络的PFGE分析。; 娄静刁保卫李伟崔志刚阚飙; 关键词：PFGE

2003—2010年山东省食源性沙门菌血清分型及药敏分析被引量：27: 2012年; 目的了解2003—2010年山东省食源性沙门菌的血清型分布及耐药情况,为制定政策提供科学依据。方法根据GB/T 4789—2008《食品卫生微生物学检验》方法进行沙门菌菌种鉴定和血清分型;采用临床实验室标准研究所(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验和结果判读,确定耐药表型。结果 120株确定血清型沙门菌分属5个群(8个亚群)24个血清型,肠炎和德比沙门菌为最常见血清型。胥瓦增格隆、维也纳、布里丹、明斯特、乌赫利等9种血清型为2010年首次检出血清型。126株沙门菌对14种抗生素均有不同程度的耐药,萘啶酮酸的耐药率最高(61.90%),其次为四环素(33.33%)、氨苄青霉素(31.75%)、磺胺嘧啶(26.19%);而敏感性以头孢吡肟最高(5.37%),其次是阿米卡星(9.52%)、环丙沙星(10.32%)。结论山东省食源性沙门菌耐药形势严峻,应加强畜牧养殖业中抗生素使用的管理,从食物链的源头和动物食品生产过程中采取合理的干预措施,保障食品安全。; 陈玉贞邵坤关冰侯配斌张华宁毕振旺; 关键词：食源性致病菌沙门菌血清型耐药性

霍乱弧菌活的非可培养状态研究进展被引量：3: 2013年; 霍乱弧菌是霍乱的病原体,广泛存在于海洋及江河入海口环境中。在不良环境中霍乱弧菌会进入活的非可培养状态(viable but non-culturable state,VBNC),常规分离方法检测不到,在条件合适时VBNC状态的霍乱弧菌会复苏为可培养状态。本文对近年霍乱弧菌VBNC相关研究做了回顾,以期能够为霍乱弧菌越冬机制以及霍乱的监测提供参考。; 陈保立阚飙; 关键词：霍乱弧菌

一起炭疽疫情中炭疽病原检测方法的应用与评价被引量：3: 2012年; 目的分析总结一起炭疽疫情中应急检测的经验与问题,为炭疽疾病预防控制提供参考依据。方法采集报告的疑似皮肤炭疽患者皮损渗出液和静脉血标本,与病例相关的病死动物和土壤标本,渗出液采集采用载玻片直接蘸取和无菌棉签擦取2种方法,用涂片镜检、直接分离培养和肉汤增菌后分离培养细菌以及炭疽芽胞杆菌毒力基因PCR扩增方法检测病原,分析检测结果。结果共采集标本57份,病例标本占91.23%,病死牛肉及剖牛处土壤标本占8.77%。病例标本采集时间距发病时间最短1d,最长23d,平均6.62d。29例疑似皮肤炭疽患者在采样时其中16例(占55.17%)已使用抗生素类药物治疗,4例(占13.79%)未曾使用抗生素。从2例未使用抗生素的患者皮损渗出液和1份病死牛肉中分离到炭疽芽胞杆菌,分离阳性率为5.26%;其中1例患者皮损渗出液涂片镜检阳性;全部标本PCR扩增结果均为阴性。结论标本炭疽芽胞杆菌阳性检出率较低,与采样方法和采样时机关系较大,应加强部门间的沟通协作和人群的健康教育,做到疫情早报告、早确诊、早控制。; 张慧娟梁旭东海岩李忠延袁海涛郭长山东晓晖魏建春; 关键词：炭疽疫情

2008-2010年北京市沙门菌血清型和药物敏感分析被引量：30: 2011年; 目的分析2008-2010年北京市沙门菌血清型及药物敏感性。方法对2008-2010年通过WHO全球沙门菌监测系统及北京市肠道门诊监测系统分离到的沙门菌进行生化试验和血清分型,药敏试验采用Kirby-Bauer法。结果北京市2008-2010年共分离沙门菌菌株220株,分布于39个血清型,其中肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为优势菌型,分别占35.00%(77/220)和15.45%(34/220)。191株沙门菌药敏结果显示三代头孢类、二代喹诺酮类抗生素高度敏感,但有耐药菌株出现。氯霉素、四环素、氨苄西林、磺胺异噁唑、链霉素、萘啶酸出现不同程度的耐药,其中萘啶酸耐药性最高,耐药率达51.83%。结论北京市沙门菌血清型以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主。耐药分析提示应加强沙门菌耐药性监测,对合理选择及使用抗生素提供指导。; 张新刘桂荣黄芳黄瑛李洁王全意曲梅; 关键词：沙门菌属血清型耐药性

山东省食品中单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳分型被引量：5: 2011年; 目的了解山东省2007～2009年不同食品来源的单核细胞增生李斯特茵（LM）各菌株之间的遗传相关性和流行病学意义，建立分子分型数据库。方法采用PulseNet标准方法对分离到的100株单核细胞增生李斯特菌进行脉冲场凝胶电泳（PFGE），不同菌株产生的电泳图谱经BioNumerics软件进行比对，分析菌株问的相关性。结果单核细胞增生李斯特菌DNA用AscI酶切后，经PFGE得到10—15个条带，可将100株茵分为31个PFGE型别，其中以4型为主。结论山东省食品中的LM来源于不同的克隆株，但部分LM有不同程度的相关性；PFGE是分析LM同源性的有效方法，对LM的流行趋势、分布特点和分子流行病学研究具有重要的意义。; 贾静毕振旺陈玉贞侯配斌张明邵坤毕振强; 关键词：单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳分子分型

河北省卢龙地区2008—2009年5岁以下腹泻住院儿童中诺如病毒的检测和分型被引量：5: 2012年; 目的了解河北省卢龙地区2008—2009年5岁以下住院儿童中诺如病毒的分子流行病学特征。方法收集2008年10月至2009年8月325例5岁以下腹泻住院患儿粪便标本和流行病学资料，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测轮状病毒抗原，利用多重RT．PCR方法检测诺如病毒，并对部分诺如病毒阳性株进行序列测定和系统进化分析。结果诺如病毒的检出率为11．3％（37／325），仅次于轮状病毒的检出率（48．6％），高于腺病毒（6．5％）和星状病毒（4．3％），主要感染2岁以下儿童，季节高峰在11月，系统进化分析表明诺如病毒流行优势株为GII-4／2006b变异株，并发现一株未见报道的新型GII-4变异株。结论诺如病毒是引起2008—2009年卢龙地区的急性胃肠炎的重要病原之一，G114／2006b变异株仍是流行优势株，要进一步监测新型GII-4变异株的流行。; 林强靳淼李慧莹崔淑娴章青刘娜封少龙段招军; 关键词：诺如病毒胃肠炎基因型

狂犬病早期临床表现与实验室诊断研究被引量：5: 2012年; 目的对狂犬病的早期临床表现及实验室诊断进行分析,以提高临床早期诊断水平。方法对北京地坛医院2010年9月—2011年10月收治的经实验室检查确诊的9例狂犬病患者进行前瞻性研究,找出早期特异性表现,并对实验室特异性检测结果进行分析。结果所有患者在病程第1～2天均有低热、烦躁、完全失眠而不困倦等表现,这种状态可持续至病程的第3～4天。恐水、恐风、畏光等特征性症状多出现于病程的第3天及以后。所有患者外周血白细胞计数及中性粒细胞百分比明显升高,均值分别为(15.55±5.25)×109/L、(84.24±6.16)%。部分患者ALT、AST、BUN、CRE升高。所有患者CK明显升高,均值为(6931.9±1586.3)U/L。患者血液、脑脊液、唾液标本经反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测,狂犬病病毒核酸为阳性者分别为2例(2/9)、2例(2/5)、4例(4/6)。8例(8/9)血液中的狂犬病病毒中和抗体滴度升高。结论低热、烦躁、完全失眠而不困倦等症状较恐水、恐风、畏光等出现更早,为狂犬病的早期特征。RT-PCR检测血液、脑脊液、唾液标本的狂犬病病毒核酸与快速免疫荧光灶抑制试验检测血清相结合,可作为狂犬病实验室诊断的有效方法。; 冯亮田地陶晓燕李浩于鹏程申辛欣满姗姗宋蕊陈志海王力华唐青; 关键词：狂犬病逆转录聚合酶链反应

中国10个省级疾病预防控制中心无形体检测实验室质量控制分析被引量：2: 2011年; 目的对10个省、市级疾病预防控制中心(CDC)无形体及立克次体实验室检测质量控制进行评估。方法现场培训血清学及分子生物学标准化操作。其中血清学技术采用WHO立克次体协作中心推荐的标准方法——微量间接免疫荧光试验(mIFA),分子生物学技术使用2套巢式PCR分别扩增立克次体科(groEL基因)及无形体科(16S rRNA)大部分成员。标准化质控血清S1及S2、PCR模板P1、P2、P3、P4、P5及部分关键试剂,采用双盲法由中国CDC传染病预防控制所无形体室向参加单位发放,按统一实验操作程序,参加单位在各自本土化仪器、设备条件下进行操作。结果参加培训的10个省(市)CDC实验室,7个单位反馈血清学结果,S1及S2标准血清质控合格率均为71.4%(5/7)。反馈PCR结果的8个参加单位,其灵敏性存在较大差异,P2和P3模板合格率为62.5%(5/8),P4、P5、P6模板合格率为50%(4/8)。各单位血清学及PCR操作重复性评估均在允许误差范围内。结论参加单位均存在不同程度实验操作系统误差,应分析各自原因,加以改进并进一步优化条件,提高该类疾病诊断及鉴别诊断能力。强调室内质控日常化管理并定期参加外部质量控制活动。; 张丽娟汪鹏姜霞钱振宇刘桂艳雷露刘学升雷霞南晓伟吴建英岳永杰张铮李文涓邓红夏依旦禹惠兰王誓闻; 关键词：无形体

国家科技重大专项(2008ZX10004-008)

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