山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2009SW002)
- 作品数：8 被引量：33H指数：4
- 相关作者：黄煜颜莉莉马营营刘萍萍赵淑萍更多>>
- 相关机构：青岛大学青岛大学医学院附属医院复旦大学更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的改良
- 2019年
- 目的探讨通过Matrigel与高浓度Ishikawa肿瘤细胞混合接种的方法优化改良人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的可行性。方法培养Ishikawa人子宫内膜癌细胞系,制备高浓度肿瘤细胞与Matrigel等体积悬液,裸鼠右侧肩胛部皮下注射。观察接种后裸鼠的存活状况及成瘤情况。石蜡包埋肿瘤组织切片,HE染色观察肿瘤组织病理学特征。结果 10只裸鼠均成功建立肿瘤模型,建模成功率100%。接种28 d内出现1例裸鼠瘤体破溃,9只裸鼠均存活,移植瘤瘤体表面皮肤完整。肿瘤最长径可达15. 1~17. 9 mm,瘤重0. 83~1. 59 g。所有移植瘤组织经病理学证实均符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将高浓度Ishikawa细胞与Matrigel混悬法可在短时间内成功构建人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征,适用于实验研究的开展。
- 郑晶朱博文黄煜颜莉莉颜莉莉
- 关键词：子宫内膜癌MATRIGEL裸鼠动物模型
- 人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立被引量：10
- 2016年
- 目的建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法培养人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,制成肿瘤细胞悬液,于裸鼠（10只）右侧肩胛背部皮下注射,每只裸鼠注射约1×107个细胞。接种后每日观察裸鼠精神、活动、饮食、排便等状况及是否有肿瘤生长、肿瘤生长速度等。以接种部位可见或触及肿瘤小结节为成瘤标准,若第一次移植失败则考虑行二次瘤细胞接种。发现肿瘤生长后每3 d计算肿瘤体积。当肿瘤最长径达15 mm或出现皮肤破溃时,立即处死荷瘤裸鼠;否则于接种第49天将荷瘤裸鼠处死、剥出肿瘤,测量瘤体长径,称取瘤体质量。取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤组织病理变化。结果有1只裸鼠第一次接种失败,在第二次接种后移植成功,一次成瘤率为9/10。在接种第40天和第46天各发现1只裸鼠瘤体表面皮肤破溃,发现后脱颈处死荷瘤裸鼠,测得肿瘤最长径分别为12.2、12.6 mm,肿瘤体积分别为505.14、510.30 mm3,肿瘤质量分别为0.88、0.86 g;至接种第49天,存活的7只裸鼠移植瘤瘤体表面皮肤完整,无破溃缺损,处死裸鼠后完整剥离肿瘤,测得肿瘤最长径为11.7~14.0 mm,瘤重0.86~1.23 g。取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现与镜下表现符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将Ishikawa细胞株接种于裸鼠右侧肩胛皮下的方式成功建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征。
- 叶园英黄煜颜莉莉赵淑萍张磊刘倩倩
- 关键词：子宫内膜癌动物模型
- 蜕膜CXCR6^(+/-)单核-巨噬细胞在人早孕期母胎界面的表型差异被引量：1
- 2018年
- 目的分析正常早孕期和不明原因自然流产妇女蜕膜组织中CXCR6^+单核-巨噬细胞比例及表型差异。方法收集上海复旦大学附属妇产科医院门诊手术室正常早孕期(40例)和不明原因自然流产(20例)妇女的蜕膜组织,分离蜕膜免疫细胞群,采用流式细胞术分析正常早孕组及不明原因自然流产组蜕膜免疫细胞中单核-巨噬细胞所占比例的差异;比较两组妇女蜕膜单核-巨噬细胞(dMΦ)表面CXCR6^+、CD80、CD206的表达差异。结果不明原因自然流产组CD14+dMΦ在蜕膜免疫细胞群(DIC)中所占比例为(9.9±1.63)%,正常早孕期组CD14+dMΦ在DIC中所占比例为(8.9±0.88)%,两组差异并无显著性(P>0.05);正常早孕组CXCR6^+在dMΦ的表达率为(40.0±1.90)%,而不明原因自然流产组表达率为(31.22±2.38)%,二者比较有显著差异(P<0.05);正常早孕组CD206、CD80在CXCR6^+dMΦ中的表达均显著高于CXCR6^-dMΦ(P<0.05),不明原因自然流产组CD206在CXCR6^+dMΦ的表达显著高于CXCR6^-dMΦ(P<0.01),CD80并无显著变化(P>0.05);与正常早孕组相比,不明原因自然流产组CD206在CXCR6^(+/-)dMΦ中的表达均显著降低(P<0.05),CD80在CXCR6^-dMΦ中表达则显著升高(P<0.05),在CXCR6^+dMΦ中的表达无显著差异(P>0.05)。结论不明原因自然流产妇女中,蜕膜单核巨噬细胞数量并无显著的变化,CXCR6^+dMΦ、表面分子CD206的表达明显降低及CD80的表达明显升高,提示CXCR6^+dMΦ可能参与了自然流产的发病机制。
- 刘倩倩黄煜颜莉莉张鹏张清宇杜美蓉
- 关键词：母胎界面单核-巨噬细胞自然流产CXCR6
- 趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义被引量：4
- 2013年
- 目的检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织中的表达水平,探讨其与子宫内膜癌患者的临床病理特征和预后的关系。方法采用组织芯片技术和免疫组化方法检测子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4表达水平,并分析它们与FIGO分期、细胞分化程度、淋巴结转移、病理类型及年龄等临床病理特征及总生存率的关系。结果子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4的表达水平均显著高于正常子宫内膜组,且二者在子宫内膜癌组的上调表达呈正相关。CXCR4的表达与子宫内膜癌细胞分化程度呈正相关(P<0.05)。CXCL12、CXCR4均不影响子宫内膜癌患者的生存率(P>0.05)。结论 CXCL12和CXCR4可能在子宫内膜癌的发生、发展中发挥生物学作用。
- 赵静张佳宋萌萌黄煜崔竹梅刘湘萍
- 关键词：子宫内膜肿瘤趋化因子CXCL12
- ERK信号转导通路在CXCL12促进子宫内膜癌细胞增殖和侵袭中的作用被引量：11
- 2016年
- 目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4(CXCL12/CXCR4)生物学轴通过细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号转导通路发挥促子宫内膜癌细胞增殖和侵袭的作用。方法:应用外源性CXCL12处理子宫内膜癌Ishikawa细胞株,通过Western blotting检测不同时间位点ERK1/2的磷酸化水平和Survivin蛋白的表达;通过ELISA检测细胞培养上清液中MMP-2的分泌水平。同时分析AMD3100和PD98059对细胞ERK1/2磷酸化水平、Survivin蛋白水平和MMP-2分泌水平的影响。结果:外源性CXCL12刺激后,可迅速上调ERK1/2的磷酸化水平(t=0.887,P<0.01),促进Survivin蛋白和MMP-2蛋白的表达(t=0.861,P<0.01;t=0.297,P<0.01),且三者均呈时间依赖性。PD98059和AMD3100均能明显抑制外源性CXCL12诱导后ERK1/2的磷酸化水平,而且在两者共同作用下,能完全抑制ERK1/2的磷酸化水平,阻断ERK通路的激活,下调Survivin蛋白和MMP-2蛋白的表达。结论:CXCL12/CXCR4生物学轴通过激活ERK通路上调Survivin蛋白和MMP-2蛋白表达,从而引发Ishikawa细胞一系列增殖和侵袭的生物学效应。
- 马营营黄煜颜莉莉叶元英刘萍萍
- 关键词：趋化因子CXCL12细胞外信号调节激酶1/2SURVIVIN蛋白MMP-2蛋白
- RNA干扰CXCR4和CXCR7对子宫内膜癌HEC-1-A细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨siRNA(small interference RNA)干扰趋化因子受体CXCR4和CXCR7对子宫内膜癌HEC-1-A细胞生物学行为的影响。方法:以LipofectamineTM2000脂质体为载体将siRNA转染至人子宫内膜癌HEC-1-A细胞株,以半定量RTPCR和Western blotting验证siRNA对CXCR4和CXCR7的干扰效果,以CCK-8法、流式细胞术和Transwell法分别检测CXCR4和CXCR7基因沉默对HEC-1-A细胞周期、增殖和侵袭能力的影响;结果:HEC-1-A细胞高表达CXCR4和CXCR7,合成的CXCR4-siRNA、CXCR7-siRNA、CXCR4/CXCR7-siRNA均可分别干扰HEC-1-A细胞内CXCR4、CXCR7、CXCR4/CXCR7基因或蛋白的表达;CXCR4和CXCR7基因的单独沉默或联合沉默均可导致HEC-1-A细胞增殖和侵袭能力的显著下降(P<0.05),同时引发HEC-1-A细胞周期出现S期阻滞。结论:趋化因子受体CXCR4和CXCR7在HEC-1-A细胞的增殖和侵袭行为中发挥重要作用,CXCR4和CXCR7途径的抑制有望成为子宫内膜癌治疗的新靶点。
- 龙萍刘萍萍孙凤仪马营营王箴言黄煜
- 关键词：CXCR4CXCR7趋化因子SIRNA
- 小干扰RNA沉默CXCR4和CXCR7对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨针对趋化因子受体基因CXCR4和CXCR7的小干扰RNA(siRNA)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:将子宫内膜癌Ishikawa细胞株注射于裸鼠肩胛背部皮下建立动物模型,待肿瘤最长径达5~7mm后,将所有荷瘤裸鼠随机分组,分别给予CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA单独或联合瘤体内注射,并以阴性对照siRNA和生理盐水作为对照组,每3 d治疗一次,共6个治疗周期。观察各组裸鼠移植瘤的生长,比较各组移植瘤的体积和质量的差异,并以实时荧光定量RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术验证CXCR4和CXCR7的基因沉默效果。结果:成功建立Ishikawa细胞裸鼠移植瘤模型,与阴性对照siRNA组和空白对照组相比,CXCR4 siRNA治疗组、CXCR-siRNA治疗组和CXCR4-siRNA+CXCR7-siRNA治疗组的肿瘤的生长均明显受到抑制(均P<0.05);CXCR4-siRNA和/或CXCR7-siRNA瘤体内直接注射能显著下调CXCR4、CXCR7 mRNA(均P<0.05)和蛋白(均P<0.01)的表达。结论:siRNA干扰CXCR4和CXCR7表达能够有效抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤的生长。
- 叶园英黄煜颜莉莉赵淑萍张磊
- 关键词：CXCR4CXCR7子宫内膜癌裸鼠
- 子宫内膜癌组织CXCL12及其受体CXCR4 mRNA表达及意义
- 2013年
- 目的了解趋化因子CXC配体-12(CXCL12)及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织表达及其意义。方法采用RT-PCR方法,检测12例正常子宫内膜组织和29例子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达,分析子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达显著高于正常子宫内膜组织(t=3.338、4.174,P<0.01),且二者表达呈显著正相关(r=0.796,P<0.01)。子宫内膜癌组织中CXCL12mRNA表达与FIGO分期、淋巴结转移、细胞分化程度、病理类型及年龄无关(P>0.05);不同病理分级的子宫内膜癌组织CXCR4mRNA表达差异有统计学意义(F=5.535,P<0.01),且其表达与子宫内膜癌病理分级呈负相关(r=-0.472,P<0.05);CXCR4mRNA表达与FIGO分期、淋巴结转移、病理类型及年龄无关(P>0.05)。结论子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4mRNA表达上调,提示CX-CL12和CXCR4可能在子宫内膜癌的发生、发展中发挥生物学作用。
- 赵静宋萌萌黄煜崔竹梅刘相萍
- 关键词：子宫内膜肿瘤趋化因子CXCL12受体CXCR4
