国家自然科学基金(30560082)
- 作品数：7 被引量：27H指数：4
- 相关作者：周鹏魏军亚蔡群芳刘德兵黎小瑛更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院华南热带农业大学海南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 花粉管通道法介导PRSV-CP基因dsRNA转化番木瓜被引量：8
- 2008年
- 以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因番木瓜进行了田间抗病性鉴定,结果表明,转基因番木瓜植株对番木瓜环斑病毒(PRSV)表现为不同程度的抗性,可以推迟发病。
- 魏军亚刘德兵陈业渊蔡群芳周鹏
- 关键词：花粉管通道DSRNA
- 7种番木瓜环斑病毒分离株外壳蛋白基因的克隆与序列比较被引量：4
- 2006年
- 采用RT-PCR技术对我国海南、云南、广西和广东等不同番木瓜生产区的7个番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)进行克隆和鉴定分析。PRSV-CP编码区在864～873核苷酸之间,编码288～291氨基酸。对分离的7个PRSV-CP的核苷酸及氨基酸序列的比较结果表明大部分序列差异都处于N端,而各产区番木瓜PRSV-CP基因的3′端586～864bp区段,即278bpDNA片断的同源率最高,达到98.5%。这一同源序列的获得为利用植物基因工程培育广谱抗病性的番木瓜新品系奠定了基础。
- 魏军亚刘德兵蔡群芳黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因克隆
- 植物病毒诱导的基因沉默在基因功能研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 传统的植物遗传转化方法周期长、工作量大、过程繁琐,不利于基因功能的快速高通量鉴定．近年来随着基因沉默机制研究的深入和不断发展,利用病毒诱导的基因沉默(Virus induced gene silencing,VIGS)进行植物功能基因组研究作为一种快速、高通量的反向遗传学工具已被广泛应用在烟草、马铃薯、番茄等植物中, 在大规模的植物基因组功能鉴定中展示了广阔的应用前景．综述了 VIGS 的作用机制、植物病毒栽体、转化方法以及在植物基因功能研究等方面的应用及前景．
- 蔡群芳唐清杰沈文涛周鹏
- 关键词：功能基因
- PRSV-CP正义、反义RNA植物表达载体的构建被引量：3
- 2008年
- 利用基因工程方法构建了RNA介导的正义、反义植物表达载体,并通过电激法导入农杆菌中.经PCR和酶切鉴定证实,成功构建了PRSV-CP正义、反义RNA植物表达载体及其相应的农杆菌工程菌株.这为后续转基因研究及番木瓜抗PRSV分子育种奠定了基础.
- 蔡群芳魏军亚周鹏
- 关键词：反义RNA
- dsRNA介导的PRSV-CP基因3′-端同源序列瞬时表达对番木瓜环斑病毒侵染的影响被引量：2
- 2007年
- 体外合成我国番木瓜主产区环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3'-端278bp同源区段,构建包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p2301-CPU,直接转化根癌农杆菌EHA105。通过根癌农杆菌介导的瞬时表达法,研究同源dsRNA对番木瓜环斑病毒(PRSV)侵染的干扰作用。结果表明,瞬时表达的dsRNA能够特异地干扰PRSV侵染。
- 魏军亚刘德兵周鹏
- 关键词：DSRNA番木瓜环斑病毒
- 番木瓜环斑病毒CP基因同源区段的克隆及植物表达载体的构建被引量：4
- 2007年
- 采用RT-PCR技术对番木瓜环斑病毒CP基因的同源区段进行了克隆和鉴定分析。序列分析结果表明,获得PRSV-CP基因3′端的278bp DNA片段同源率最高。构建了目的基因包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p2301-CPU,并通过电激法导入农杆菌中。经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入获得了农杆菌工程菌株。利用该植物表达载体对番木瓜的遗传转化工作目前正在进行中。
- 魏军亚刘德兵蔡群芳黎小瑛周鹏
- 烟草脆裂病毒诱导的基因沉默在植物基因功能研究中的应用被引量：4
- 2006年
- 烟草脆裂病毒(tobaccorattlevirus,TRV)是一类应用比较广泛而且效率和持久性较好的病毒载体,能够介导基因沉默同时不会带来病毒诱导的症状。改造后的病毒能够促进非病毒序列的插入以及对植物的后续感染,也可以鉴定宿主植物生长点的基因,因此TRV在植物基因功能鉴定中具有广泛的应用。该文介绍TRV沉默载体的构建、诱导基因沉默原理、在植物基因功能研究中的应用以及优缺点。
- 唐清杰沈文涛周鹏
- 关键词：烟草脆裂病毒基因功能
