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国家自然科学基金(39970854)

作品数:32 被引量:99H指数:6
相关作者:章翔吴景文高大宽屈延费舟更多>>
相关机构:第四军医大学西京医院第四军医大学空军军医大学(第四军医大学)更多>>
发文基金:国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 32篇中文期刊文章

领域

  • 30篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 22篇胶质
  • 22篇胶质瘤
  • 19篇脑胶质瘤
  • 14篇基因
  • 11篇抑素
  • 11篇细胞
  • 10篇内皮
  • 9篇人脑
  • 9篇人脑胶质瘤
  • 8篇蛋白
  • 7篇内皮抑素
  • 6篇血管
  • 6篇ANGIOS...
  • 5篇肿瘤
  • 4篇血管抑素
  • 4篇增殖
  • 4篇神经胶质
  • 4篇神经胶质瘤
  • 4篇周期
  • 4篇细胞增殖

机构

  • 29篇第四军医大学...
  • 4篇第四军医大学
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇空军军医大学...
  • 1篇海南武警总医...

作者

  • 30篇章翔
  • 22篇高大宽
  • 22篇吴景文
  • 16篇屈延
  • 13篇费舟
  • 9篇梁景文
  • 7篇荆俊杰
  • 7篇刘先珍
  • 7篇郭衍
  • 6篇付洛安
  • 4篇王西玲
  • 4篇李侠
  • 3篇易林华
  • 3篇杨树茂
  • 3篇赵明
  • 2篇张剑宁
  • 2篇杨利孙
  • 2篇宋少军
  • 2篇陈义军
  • 2篇姬西团

传媒

  • 16篇第四军医大学...
  • 4篇中华医学杂志
  • 4篇解放军医学杂...
  • 2篇中华实验外科...
  • 2篇中华神经外科...
  • 1篇肿瘤防治杂志
  • 1篇中华神经外科...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇Chines...

年份

  • 3篇2004
  • 4篇2003
  • 4篇2002
  • 5篇2001
  • 16篇2000
32 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
Angiostatin K(1-3)基因的原核表达和蛋白活性测定
2001年
目的 获得angiostatinK(1 3)基因的原核表达蛋白 ,检测其活性。方法 构建和鉴定pBV2 2 0 AK(1 3)载体并在大肠杆菌DH5α内表达 ,诱导后用SDS PAGE分析、经亲和层析纯化后行WesternBlot鉴定 ,以牛微血管内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜实验验证其生物学活性。结果 获得抑制牛微血管内皮细胞生长活性的angiostatinK(1 3)原核表达蛋白 ,其蛋白重量占菌体总蛋白的 7%。
吴景文章翔高大宽易声禹屈延荆俊杰柴玉波粱景文
关键词:ANGIOSTATIN抗血管生成蛋白活性原核表达血管抑素
人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究被引量:9
2001年
目的 克隆人内皮抑素基因 ,检测其表达蛋白的生物学活性 ,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法 从人肝组织提取mRNA ,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因 ,将其重组入pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH endo,使其在DH5α内经温度诱导表达 ,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果 成功获得 5 5 1bp的人内皮抑素基因 ,测序正确。该诱导表达蛋白分子量为 2 0 0 0 0 ,具有抑制血管生成活性。该蛋白每天 5、10或 2 0mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长 (抑瘤率分别为 34 5 % ,76 1%和80 2 % )。结论 人内皮抑素基因的表达和初步应用 。
章翔吴景文费舟傅洛安高大宽屈延
关键词:内皮抑素基因分子克隆抑瘤作用脑胶质瘤
Angiostatin K(1-3) gene for treatment of human gliomas: an experimental study被引量:1
2000年
To discuss the feasibility of gene therapy of human glioma by antiangiogenesis method Methods Angiostatin K(1 3) cDNA with secretive signal was inserted into the polylinker sites of eukaryotic expression vector pcDNA3 to construct pcDNA SAK(1 3) The vector was transfected into human SHG44 glioma cells by lipofectamine and the positive clone was screened by G418 The biological characteristics of glioma cells were examined by electronmicroscope and flow cytometry The activity of angiostatin K(1 3) protein expressed by SHG44 cells was examined by the bovine micrangium endotheliocyte inhibition assay and immunofluorescence assay When SHG44 cells were implanted into the strata subcutaneum of nude mice, tumor necrosis and micrangium were calculated immunohistochemically and electronmicroscopically for determining their charac^teristics and validity in gene therapy of human glioma by antiangiogenesis method Results The eukaryotic expression vector pcDNA SAK(1 3) was successfully constructed and transfected into glioma cells The cells expressed angiostatin K(1 3) protein, and their tumorigenesis and angiogenesis in nude mice were greatly reduced Conclusion Angiostatin K(1 3) gene is feasible to treat human glioma This experiment lays a foundation for gene therapy of the other solid tumors by antiangiogenesis
章翔吴景文费舟高大宽李侠刘先珍梁景文王煊
血管抑素K(1~3)基因片段的克隆与序列测定被引量:1
2000年
吴景文章翔柴玉波高大宽易林华张俊杰刘先珍
关键词:脑肿瘤实体瘤克隆
Cyclin D2在人脑胶质瘤的亚细胞表达及意义被引量:1
2004年
目的 研究细胞周期素D2 (cyclinD2 )在人脑胶质瘤中的亚细胞表达。方法 采用免疫组化方法检测 5 2例人脑胶质瘤及 8例正常人脑组织中cyclinD2蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。结果 正常人脑组织中无cyclinD2表达 ,而在胶质瘤细胞胞核和胞浆中均发现cyclinD2的阳性表达 ,并随肿瘤恶性程度增高而表达增强。其中 11例 ( 2 1.2 % )出现胞核染色 ,高恶性度胶质瘤 (Ⅲ~Ⅳ级 )与低度恶性胶质瘤 (Ⅰ~Ⅱ级 )标记指数与阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;胞浆染色阳性率为4 2 .3% ( 2 2 / 5 2 ) ,低、高恶性度组标记指数间差异显著 (P <0 .0 5 ) ,各相邻级别之间无显著差异 (P >0 .0 5 )。二元相关性检验显示cyclinD2胞浆染色标记指数与PCNA标记指数呈正性相关 (r =0 .4 78,P <0 .0 1)。结论 人脑胶质瘤细胞胞核和胞浆中均存在cyclinD2的表达 ,其中胞浆表达与肿瘤细胞的增殖活性密切相关 ,提示其可能在肿瘤细胞细胞质中发挥重要正性调控作用。
王西玲章翔黄安炀费舟程光姬西团梁景文
关键词:CYCLIND2胶质瘤
原核表达的血管抑素K(1-3)蛋白对脑胶质瘤的生长抑制作用被引量:1
2002年
目的 获得具有抗血管生成活性的angiostatinK(1 3) [AK(1 3) ]基因的原核表达蛋白 ,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤 .方法 构建和鉴定pDH AK(1 3)载体并在大肠杆菌DH5α内表达 ,诱导后用SDS PAGE分析、经亲和层析纯化后行WesternBlot鉴定 ,以人脐带静脉血管内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜实验验证其生物学活性 ,应用AK (1 3)蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤 .结果 获得抑制人脐带静脉血管内皮细胞生长活性的AK(1 3)原核表达蛋白 (Mr 为 35× 10 3) ,其蛋白总量占菌体总蛋白的 12 % ,该纯化表达蛋白 5mg·kg- 1 ·次 - 1 和 10mg·kg- 1 ·次- 1 组均可抑制裸鼠皮下人脑胶质瘤生长 ,抑瘤率分别为 34 5 %和 6 4 6 % .结论 该实验为应用抗血管生成药物治疗人脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了初步基础 .
吴景文章翔付洛安高大宽白红民梁景文
关键词:原核表达脑胶质瘤
局部分泌的血管抑素K(1~3)蛋白抑制人脑胶质瘤生长的实验研究被引量:2
2000年
目的 探讨局部分泌血管抑素K(1~ 3)蛋白 [angiostatinK (1~ 3) ,AK(1~ 3) ]治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建AK(1~ 3)基因的真核表达载体pcDNA -SAK(1~ 3) ,经脂质体法将该载体转染入人脑胶质瘤细胞SHG44 ,行G418筛选。用电镜和流式细胞仪测定转染细胞的生物学性状 ,以内皮细胞抑制实验和免疫荧光实验检测该细胞表达的AK(1~ 3)蛋白。应用裸鼠皮下致瘤性实验 ,结合免疫组织化学、电镜、微血管和瘤体坏死区计数 ,确定局部分泌AK(1~ 3)蛋白对裸鼠皮下人脑胶质瘤生长的影响。结果 成功构建pcDNA SAK(1~ 3)载体并在人脑胶质瘤细胞获得表达 ,该细胞在裸鼠皮下致瘤性和诱导血管生成能力显著下降 (肿瘤终体积实验组为 170mm3,对照组为 812 0mm3,P <0 .0 1;血管计数 ,实验组为 5 .4,对照组为 12 .2 ,P <0 .0 1)。结论 局部分泌的AK(1~ 3)蛋白能抑制裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长 ,可进一步用于实体瘤的治疗研究。
吴景文章翔高大宽荆俊杰屈延粱景文刘先珍王煊
关键词:脑肿瘤抑制蛋白类胶质瘤
人脑胶质瘤组织中cyclin D1和cyclin E表达的研究被引量:3
2004年
目的 :研究人脑胶质瘤中细胞周期素 (cyclin)D1和cyclinE的表达与肿瘤病理等级的关系。方法 :采用免疫组织化学法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常脑组织标本中cyclinD1和cyclinE的表达。结果 :人脑胶质瘤组中有 2 9例cyclinD1的表达。随着胶质瘤病理分级增高 ,高、低恶性度胶质瘤的阳性率和平均标记指数均显著升高 ,两者差异有统计学意义 ,P <0 0 5。cyclinD1与cyclinE的平均标记指数之间呈明显正相关 ,Pearson相关系数r =0 64 4,P <0 0 1。结论 :cyclinD1与cyclinE在胶质瘤中被异常表达 ,是肿瘤发生和恶性转化的重要促进因子。
杨树茂章翔费舟赵明宋少军王西玲
关键词:病理学病理学细胞周期蛋白D1细胞周期蛋白E
反义VEGF_(165)真核表达载体的构建和表达被引量:1
2000年
目的 进行抗血管生成治疗人脑胶质瘤实验 ,构建和鉴定携带人反义 VEGF1 6 5 基因的真核表达载体 .方法 将VEGF1 6 5 c DNA反向克隆入 pc DNA3,构建 CMV启动子控制的真核表达载体 pc DNA- AVEGF1 6 5 ,用酶切鉴定结果 ;应用该载体转染人脑胶质瘤细胞 SHG44 ,G418筛选阳性克隆 ;Western blot和免疫组化检测转染前、后瘤细胞的 VEGF表达 .检测转染前、后瘤细胞的生物学性状 .结果 获得反向构建的 pc DNA- AVEGF1 6 5 真核表达载体 ,VEGF1 6 5 反义 RNA阻断了 SHG44细胞的 VEGF表达 ,该细胞生物学性状不受外源基因的表达影响 .结论 成功构建的反义 VEGF1 6 5 真核表达载体 。
吴景文章翔费舟高大宽屈延粱景文刘先珍
关键词:VEGF165基因真核表达载体脑胶质瘤基因治疗
C6细胞表达的人Angiostatin Kringle(1-3)体外抑制血管内皮细胞生长的研究被引量:1
2000年
为研究人AngiostatinKringle( 1 3) [AK( 1 3) ]抑制血管内皮细胞生长的活性 ,利用脂质体法将带有大鼠血清白蛋白分泌信号的人AK( 1 3)基因导入大鼠C6胶质瘤细胞 ,并用G41 8筛选获得目的细胞株。采用电镜、流式细胞术、免疫组化和Westernblot等方法 ,检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及AK( 1 3)蛋白表达情况 ,并用人脐静脉内皮细胞增殖实验检测目的细胞株表达的AK( 1 3)蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性。结果表明 ,成功转染人AK( 1 3)基因的大鼠C6胶质瘤细胞可稳定表达AK( 1 3)蛋白 ,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用 ,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础。
高大宽章翔吴景文屈延荆俊杰梁景文李树合
关键词:ANGIOSTATINC6细胞
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