国家科技支撑计划(2007BAI28B04)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
- 相关作者：樊明文张爱华闭兰许庆安杨亚萍更多>>
- 相关机构：武汉大学附属口腔医院武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学经济管理更多>>
- 中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX免疫小鼠的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的:评价中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX诱导小鼠体内特异性免疫应答的效果。方法:分别由武汉生物制品研究所中试制备和实验室采用德国Qiagen公司去内毒素质粒大量提取试剂盒手工提取防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX;两种方法制备的质粒分别于0周,2周经肌肉、鼻腔免疫小鼠,并以鞭毛蛋白作为黏膜佐剂与质粒同时经鼻腔免疫小鼠,PBS及空载体pVAX1作为对照。免疫前开始每两周收集小鼠血清和唾液样本,ELISA定量检测血清及唾液中特异性抗体含量。结果:中试质粒和手提质粒肌注时均能够诱导血清特异性IgG,但诱导唾液特异性sIgA的能力较为有限。在与黏膜佐剂鞭毛蛋白同时滴鼻时,中试质粒可诱导较为明显的血清特异性IgG和唾液特异性sIgA。在相同的免疫条件下,中试质粒诱导的特异性抗体水平低于手提质粒组,但二者无显著性差异。结论:中试防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX能够诱导小鼠体内特异性体液免疫应答。
- 杨亚萍闵志鹏樊明文张爱华闭兰黄丽苑艺芳
- 关键词：防龋DNA疫苗中试特异性抗体
- 靶向防龋DNA疫苗在小鼠体内的存留时间分析被引量：9
- 2009年
- 目的:观察靶向防龋DNA疫苗pG JA-P/VAX免疫小鼠后在免疫原位和引流淋巴结的存留时间。方法:靶向防龋DNA疫苗pG JA-P/VAX分别经肌肉注射和鼻黏膜滴注途径免疫BALB/c小鼠。免疫后1、3、6个月,取肌肉注射组注射局部的肌肉组织和腹股沟引流淋巴结,鼻黏膜滴注组鼻相关淋巴组织和颈部引流淋巴结,提取基因组DNA,以其为模板采用PCR方法扩增pG JA-P/VAX中的GLU序列。结果:免疫后1、3、6个月,在免疫局部组织和引流淋巴结的基因组DNA中均扩增得到870 bp的片段,测序证实该片段序列与GLU序列一致。结论:防龋DNA疫苗pG JA-P/VAX免疫小鼠后,可在免疫原位和引流淋巴结较长期存在。
- 许庆安樊明文
- 关键词：龋齿DNA疫苗免疫记忆
- 防龋DNA疫苗免疫效能评价中间接ELISA检测的建立和验证被引量：1
- 2011年
- 目的:建立血清样本特异性抗体检测的间接ELISA方法,应用于龋齿DNA疫苗特异性抗体效力检测。方法:通过棋盘滴定确定样本检测条件建立血清特异性抗PAc抗体间接ELISA方法,并对所建立的方法进行特异性和精密度验证。结果:确定包被PAc蛋白浓度为10mg/L,酶标抗体工作浓度1∶5000,样本稀释倍数1∶200。方法的重复性检测表明,板间和板内误差小于15%;中间精密度高、中、低3个浓度的CV值小于15%。结论:该方法特异性强,具有良好的重复性和中间精密度,可用于防龋DNA疫苗免疫效能评价中血清样本特异性抗PAc抗体的检测。
- 李宇红吴小丽闭兰郭长福张爱华
- 关键词：防龋DNA疫苗间接ELISA免疫
