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国家自然科学基金(30000138): 作品数：8 被引量：9H指数：3; 相关作者：蒋义国纪卫东宾晓农王敏傅娟更多>>; 相关机构：广州医学院华中科技大学广州医学院附属肿瘤医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

叶绿酸抗细胞恶变相关cDNA序列的克隆: 2003年; 目的:克隆叶绿酸抑制人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化的相关差异表达cDNA序列。方法:以叶绿酸及反式-BPDE共同处理的16HBE细胞为实验细胞,以反式-BPDE单独处理的16HBE细胞为对照细胞,采用cDNA代表性差异分析法,比较2种细胞基因表达的差异,分离叶绿酸抗反式-BP-DE作用的相关差异表达cDNA片段。分离的片段分别与pGEM-T载体连接并转化入JM109细菌中,对质粒DNA进行测序。以BLASTN程序进行GenBank的同源性检索。结果:克隆的5条cDNA序列中,有3条为新基因序列,另2条分别与类S18/S6人核糖体蛋白及alpha-烯醇酶等有同源性。结论:克隆的5条cDNA序列所在的基因可能与叶绿酸抗细胞恶性转化分子机制密切相关。; 朱丽瑾蒋义国; 关键词：细胞转化基因表达克隆

肿瘤抑制基因p53的结构与功能保守性的比较分析被引量：1: 2004年; 目的　比较分析不同物种来源的p5 3蛋白的系统发育规律及其结构与功能的保守性。方法　多序列比较、结构域比对和二级结构预测等生物信息学分析及系统发生树构建。结果　模式生物间p5 3蛋白有较高同源性 ,而且都具有p5 3蛋白的典型结构特征 ;各结构域中维持功能活性必需的氨基酸残基几乎不变 ,二级结构折叠元件的组成和分布也十分类似 ;最大似然法和邻接法两种方法推导出的分子系统进化树基本一致。结论　物种来源不同的p5 3蛋白同属于一个有相似功能作用的蛋白家族。从比较生物学新的角度 ,进一步说明了p5 3蛋白的结构和功能保守性。; 涂洪斌李冰陈耀勇邹东霆陈维洁蒋义国葛曰萍陈尊器; 关键词：肿瘤抑制基因 P53 细胞周期模式生物

E-cadherin、Cyclin D1和Cyclin E在叶绿酸抗细胞恶变中表达研究被引量：1: 2006年; 目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT-PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各组细胞E-cadherin基因mRNA表达差异;荧光细胞免疫化学技术检测E-cadherin、Cyclin D1及Cyclin E蛋白水平。结果反式-BPDE诱导恶变细胞组出现E-cadherin基因在mRNA和蛋白水平表达缺失,而经叶绿酸抗转化组该基因表达正常。Cyclin D1、Cyclin E蛋白在正常对照组中表达阴性,而在反式-BPDE恶性转化组中上述两种蛋白呈现高表达,通过叶绿酸干预抗转化组中其表达明显下调。结论叶绿酸抗反式-BPDE致细胞恶变作用与其避免抑癌基因E-cadherin的表达缺失有关。叶绿酸在拮抗反式-BPDE致癌中具有影响细胞周期素CyclinD1和CyclinE表达作用。; 傅娟蒋义国宾晓农陈学敏; 关键词：细胞周期素

叶绿酸抑制细胞恶性转化的基因表达分析被引量：3: 2003年; 目的　采用cDNA微阵列技术探索人支气管上皮细胞经叶绿酸抗转化处理后基因的差异表达。方法　人支气管上皮细胞株 1 6HBE分别经二羟环氧苯并芘 (BPDE)单独处理及叶绿酸与BPDE联合处理后 ,提取 2种细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA并以Cy3 -dCTP和Cy5 -dCTP荧光素分别标记制作探针。探针混合后与含 4 0 0 0个人类基因的芯片杂交。以ScanArray 40 0 0扫描仪扫描芯片 ,以GenPixPro 3 0软件分析荧光信号 ,然后对差异表达的基因进行生物学信息分析。结果　叶绿酸与BPDE联合处理的细胞样与BPDE单独处理的细胞样比较呈显差异表达的基因有 1 0 6个 ,其中 67个 (63 9% )下调 ,另 39个 (36 8% )上调。结论　叶绿酸的抗转化活性与应激反应基因 ,免疫相关基因 ,DNA合成和修复基因。; 蒋义国朱丽瑾纪卫东; 关键词：叶绿酸基因芯片

基因芯片筛选BPDE转化16HBE相关基因的研究: 目的采用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE)的相关基因,探讨该技术在分子毒理学研究中的应用价值。方法将实验组(BPDE-16HBE)和对照组(16HBE)的mRNA逆转录合成cDN...; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞; 文献传递

叶绿酸对抗细胞恶变相关基因及蛋白调控: 目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT-PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各...; 傅娟蒋义国宾晓农陈学敏; 关键词：叶绿酸细胞周期素; 文献传递

ISOLATION OF HUMAN TRANSCRIPTS EXPRESSED IN 16HBE CELLS RELATED TO CHLOROPHYLLIN ANTITRANSFORMING ACTIVITY AGAINST ANTI-BPDE BY cDNA REPRESENTATIONAL DIFFERENCE ANALYSIS: 2005年; Objective: To analyze the differentially expressed cDNA sequences related to chlorophyllin (CHL) mediated inhibition of malignant transformation of human bronchia1 epithelial cell line (16HBE). Methods: 16HBE cells treated with chlorophyllin and anti-BPDE were conducted as tester, 16HBE cells treated only with anti-BPDE were conducted as driver, and cDNA representational difference analysis (cDNA RDA) was used to compare the differential gene expression between the two kinds of cells. The cDNA fragments were ligated to pGEM-T vector and transformed into JM109 bacteria. The plasmid DNA was sequenced and compared with database in GenBank by BLASTN. Results: Among the 5 cloned cDNA sequences, three were novel and were registered in dbEST database, two showed sequence homology to alpha-enolase and a newly found gene ribosomal protein S18/S6-like. Conclusion: These 5 cDNA sequences might play important roles in antitransforming effect of chlorophyllin.; 朱丽瑾蒋义国; 关键词：RDA GEM

基因芯片筛选二羟环氧苯并芘转化支气管上皮细胞相关基因的研究: 目的:应用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化细胞的相关基因,探讨基因芯片技术高通量筛查在细胞、分子毒理学研究中的应用价值。方法:按一步法抽提实验组BPDE转化支气管上皮细胞和对照组正常支气管上皮细胞的总RNA...; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘支气管上皮细胞; 文献传递

叶绿酸对恶性转化细胞周期及体外生长的影响被引量：3: 2005年; 目的　研究叶绿酸对反式 7,8二羟 9,10环氧苯并 (a)芘 (反式BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系(16HBE)体外生长及细胞周期影响。方法　采用噻唑蓝 (MTT)比色法和流式细胞术 (FCM) ,同时观察正常人支气管上皮细胞 (16HBE)、反式 -BPDE恶性转化细胞系、叶绿酸抗反式 -BPDE恶性转化细胞系生长曲线和生长周期的变化以及经叶绿酸处理后的影响。结果　BPDE恶性转化细胞系增殖活性明显大于正常细胞系 (16HBE) ,经 10 0 μmol/L叶绿酸抗BPDE恶性转化细胞组增殖活性较转化组有一定降低。经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组 ,未见降低细胞增殖活性作用。反式 -BPDE恶性转化细胞组G0 /G1期细胞周期比例明显少于正常组细胞。但经叶绿酸抗转化组G0 /G1期比例有所提高 ,而经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组G0 /G1期细胞周期比例无明显改变。结论　对正常细胞无影响的一定浓度叶绿酸有抑制反式 -BPDE恶性转化人支气管上皮细胞增殖活性的作用 ,并通过提高恶性转化细胞G0 /G1期细胞周期比例而影响细胞周期的进程 ,从而改变恶性细胞的增殖和分化。; 傅娟蒋义国宾晓农纪卫东王敏; 关键词：细胞周期恶性转化

叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白表达差异分析: 目的:采用蛋白质组学技术分析叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白差异表达,探讨叶绿酸抗细胞转化的分子机制。方法:一步法分别提取二羟环氧苯并芘(BPDE)诱导的转化细胞B-1和叶绿酸与BPDE共处理的抗转化细胞CB-1总蛋白,应用...; 纪卫东陈家堃蒋义国吕嘉春吴中亮冯苏妹; 关键词：叶绿酸蛋白质组; 文献传递

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