河南省自然科学基金(0511032300)
- 作品数：15 被引量：47H指数：4
- 相关作者：程相朝张春杰李银聚吴庭才刘一尘更多>>
- 相关机构：河南科技大学河南农业职业学院河南省农作物新品种重点实验室更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 新城疫病毒HN蛋白表达条件的优化、纯化及其活性鉴定
- 为提高HN蛋白在毕赤酵母中的表达水平,本研究从不同诱导时间、培养基不同pH、不同甲醇诱导剂量等因素对HN基因在毕赤酵母中的表达条件进行优化。按最适条件大量诱导表达,对表达产物进行纯化,并通过血凝试验检测其生物学活性。结果...
- 刘一尘张春杰程安春程相朝李银聚吴庭才丁轲
- 关键词：新城疫病毒纯化活性检测
- 文献传递
- 卢氏鸡白细胞介素21的克隆与生物信息学分析被引量：2
- 2010年
- 设计并合成一对特异性引物,从ConA激活的卢氏鸡淋巴细胞中扩增IL-21全基因并进行序列测定,应用多种生物学软件对卢氏鸡IL-21基因及其编码蛋白进行分析和三维结构预测。从具有中国地方特色的卢氏鸡中克隆了IL-21全基因。该基因全长438bp,编码145个氨基酸,包括19个氨基酸长度的信号肽,基因位于鸡的4号染色体55218k～55224k之间;编码的蛋白质分子量约16.67kD,为碱性蛋白,具有亲水性,无二硫键。三维结构预测表明:卢氏鸡IL-21蛋白主要由四个α螺旋和不规则卷曲构成,与人IL-21蛋白三维结构相似。同源性分析表明:该序列与其他哺乳动物IL-21的氨基酸相似性低于35%。
- 张旭张春杰李银聚程相朝吴庭才郁川
- 关键词：卢氏鸡白细胞介素21克隆生物信息学
- 鸡IL-18原核表达工程菌遗传稳定性与表达产物的生物学活性检测被引量：1
- 2011年
- 通过对鸡白介素18(IL-18)原核表达工程菌BL21-ChIL-18遗传稳定性、表达产物的West-ern-blot及其经Sephadex G-100纯化后的ELISA和淋巴细胞转化试验分析,以检测其遗传稳定性及其表达产物的生物学活性。结果表明,该重组工程菌能稳定地表达鸡IL-18,表达产物不仅能够与抗鸡IL-18的多克隆抗体发生反应,而且具有刺激淋巴细胞增殖并诱导其分泌γ干扰素的作用,为研究鸡IL-18在鸡体内的生物学功能奠定了基础。
- 赵敏张春杰程相朝李银聚吴庭才杨涛
- 关键词：白细胞介素18原核表达生物活性
- 鸡IL-18在毕赤酵母中的表达与活性分析被引量：5
- 2009年
- 目的:在毕赤酵母中表达鸡白介素18,并鉴定其活性。方法:应用PCR技术从重组质粒pMD18-T-ChIL-18中扩增出鸡IL-18成熟肽基因,亚克隆于毕赤酵母表达载体pPICZαA上,构建重组质粒pPICZαA-ChIL-18。经酶切、PCR和测序鉴定正确后,电转化入毕赤酵母菌X-33,筛选多拷贝单克隆进行诱导表达。表达产物纯化后用Western blot、ELISA和淋巴细胞转化试验分析其生物学活性。结果:重组菌正确表达了具有免疫原性的鸡IL-18,经分析该rchIL-18具有诱导淋巴细胞分泌γ干扰素和刺激淋巴细胞增殖的活性。结论:成功的在毕赤酵母中表达了具有生物活性的鸡IL-18。
- 赵敏张春杰李银聚吴庭才程相朝刘一尘俞晓丽钱永华
- 关键词：鸡IL-18毕赤酵母活性检测
- 饲养方式对卢氏鸡绿壳蛋品质的影响
- 本研究选择笼养和放养条件下卢氏鸡所产绿壳蛋各60枚,对其蛋的品质进行研究。结果表明:放养在一定程度上能够改善和提高卢氏鸡的蛋品质,在粗灰分、粗蛋白、比重、粗脂肪、蛋壳强度、蛋壳颜色等方面分别比笼养卢氏鸡蛋高1%、2.24...
- 徐廷生雷雪芹李振红肖赞奇高灵照马彦博
- 关键词：饲养方式卢氏鸡绿壳蛋蛋品质
- 文献传递
- NDV HN融合蛋白体外对马立克肿瘤细胞MDCC-MSB1凋亡作用的研究
- 为研究新城疫病毒HN融合蛋白抗肿瘤细胞的作用机制,本研究以马立克氏病肿瘤细胞系MDCC-MSB1为体外研究对象,将HN融合蛋白与MDCC-MSB1细胞共培养后,应用CCK-8法检测HN融合蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制作用、琼...
- 刘一尘张春杰程安春程相朝李银聚吴庭才丁轲
- 关键词：新城疫病毒凋亡
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌SL1344株cAMP受体蛋白基因缺失株的构建及其生物学特性被引量：8
- 2011年
- 通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,构建鼠伤寒沙门菌SL1344株的crp基因缺失疫苗候选菌株,并对其生物学特性进行初步研究。首先构建含缺失321bp crp基因的重组自杀性质粒pREΔcrp,然后利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选SL1344的Δcrp缺失株,用PCR鉴定结果表明该缺失株构建成功。生物学特性研究发现,缺失株ΔcrpSL1344保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12:i:1,2,且能够稳定遗传缺失321bp的crp基因;但是,与亲本株SL1344相比,其生化特性发生明显改变,生长速度明显减慢。缺失株ΔcrpSL1344口服感染1日龄雏鸡的LD50为7.40×109 CFU,毒力较亲本株SL1344降低32 456倍。以上研究结果表明,SL1344株crp基因缺失株构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,为进一步将其开发为鼠伤寒沙门菌弱毒疫苗候选菌株奠定基础。
- 廖成水程相朝赵战勤张春杰李银聚吴庭才郁川王晓利胡阿勇
- 关键词：鼠伤寒沙门菌CRP
- 鸡IL-18成熟蛋白基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及表达被引量：4
- 2009年
- 为使鸡IL-18成熟蛋白基因在真核系统中高效表达,对其进行定点突变,将酵母低频密码子突变为偏嗜性密码子,构建了鸡IL-18成熟蛋白变构基因真核重组表达载体pPICZαA-MChIL18*,并将其转化入P.pastorisX-33。重组菌株X-33/pPICZαA-MChIL18*经甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE检测,结果在约23 000处有目的条带,与预期的相对分子质量一致,占总蛋白的45%,对其进行Western-blot检测,结果与兔抗鸡IL-18多克隆抗体发生特异性免疫反应。结果表明,鸡IL-18成熟蛋白变构基因在毕赤酵母中成功的进行了表达。
- 刘一尘张春杰程安春程相朝汪铭书李银聚吴庭才易明林
- 关键词：鸡IL-18定点突变毕赤酵母表达系统SDS-PAGEWESTERN-BLOT
- 新城疫病毒HN基因在毕赤酵母中的表达及其表达产物的免疫原性被引量：1
- 2008年
- 应用RT-PCR获得新城疫病毒(NDV)La Sota株的血凝素-神经氨酸酶(HN)基因片段,将HN基因片段定向插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建了分泌型表达载体pPICZαA-HN,将其用SacⅠ线性化后电转化入P. pastorisX-33。经高抗性及阳性转化子筛选得到重组菌株X-33/pPICZαA-HN,甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE、Western-blot和血凝活性检测,结果约在97 ku处有目的条带,比预期分子质量大,占总蛋白的53%,与NDV阳性血清发生特异性免疫反应,并具有较高的血凝活性。表明,HN基因在毕赤酵母中成功地进行了表达且表达产物具有良好的免疫原性。
- 刘一尘张春杰程安春程相朝李银聚吴庭才易明林
- 关键词：新城疫病毒毕赤酵母SDSPAGE免疫原性
- 河南省鸡源沙门菌新近流行株的分离鉴定及其耐药性分析被引量：14
- 2010年
- 旨在了解河南省鸡沙门菌临床分离株血清型分布及药物敏感情况。从河南省各地区养鸡场共采集了沙门菌可疑病料617份,按常规方法进行分离,经生化、PCR及血清型鉴定,共分离出98株鸡源沙门菌,其中血清型定型82株,主要为肠炎沙门菌(62.24%)、鸡白痢沙门菌(18.37%)。进一步Kindy-Bauer(KB)法检测分离菌株对22种药物敏感性表明,所有分离菌株对多粘菌素B、阿米卡星、庆大霉素、萘啶酸较为敏感,对阿齐霉素和氨苄西林耐药率在60.00%～70.00%之间,对红霉素和青霉素表现为极高的耐药性,耐药率高达100.00%。三重以上耐药菌株高达96.94%,七耐以上的菌株为56.12%,耐药最多的菌株可耐18种抗生素。由此可见,河南省禽类沙门菌的感染流行主要以肠炎沙门菌和鸡白痢沙门菌为主,多重耐药十分严重,严重影响了禽类沙门菌病的诊治与预防。
- 廖成水程相朝吴庭才张春杰李银聚王晓利胡阿勇
- 关键词：沙门菌药敏试验
