国家自然科学基金(30000168)
- 作品数：12 被引量：129H指数：7
- 相关作者：瞿东滨金大地王非刘斌陆地更多>>
- 相关机构：中国人民解放军第一军医大学南方医科大学南方医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-AA以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达被引量：1
- 2003年
- 目的 从正常的人体成骨细胞中克隆IGF 1、PDGF AA和TGFβ1三因子的编码蛋白基因 ,构建上述因子基因的高效表达重组腺病毒 ,旨在为基因治疗研究提供有效的工具。方法 培养正常人体成骨细胞 ,提取细胞总RNA ,RT PCR方法获得IGF 1、PDGF AA和TGFβ1的编码基因。将这些片段克隆到高效表达腺病毒载体Adeno X ,并经过HEK2 93细胞的包装 ,获得成熟的重组腺病毒。Western印迹法检测上述三因子的表达。利用成熟重组腺病毒感染成骨细胞 ,检测细胞增殖和碱性磷酸酶 (ALP)活性的改变。结果 重组T载体、重组腺病毒DNA和成熟的重组腺病毒体中均可得到IGF 1、PDGF AA和TGFβ1基因的PCR片段。Western印迹检测到上述 3种因子蛋白质的表达。当携带上述 3种因子的重组腺病毒感染成骨细胞后 ,细胞增殖明显增强 ,ALP活性明显提高。结论 本实验构建的IGF 1、PDGF AA和TGFβ1因子的高效表达重组腺病毒可以在人体细胞中表达出具有生物活性的蛋白质 ,获得了较好的基因工具。
- 金大地瞿东滨杨德鸿陈建庭
- 关键词：胰岛素样生长因子-1基因克隆腺病毒载体
- 软骨终板细胞生物学特性及体外退行性变的机制研究被引量：7
- 2003年
- 目的:通过建立猪腰椎间盘软骨终板细胞的培养模型,观察其演变,探讨软骨终板细胞的生物学行为及其影响因素。方法:取长枫杂交猪腰椎间盘软骨终板细胞,于200mL/L胎牛血清的杜尔伯克改良基础培养基(Dulbecco'smodifiedEagle'smedium,DMEM)中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型。以光镜及苏木精-伊红染色观察其生物学表现;以甲苯胺蓝、番红O、Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定;观察冻存后软骨终板细胞的生物学特性。结果:原代细胞生物学性状最接近体内细胞,多次传代后细胞呈现衰老现象。经染色证实此细胞具有Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达。冻存细胞复苏后,细胞形态及其分化、增殖能力与冻存前基本相同。结论:猪腰椎软骨终板细胞的体外培养模型的建立,可为体外研究软骨终板的退行性变机制提供实验基础。
- 刘斌瞿东滨金大地王岩松
- 关键词：软骨终板细胞生物学细胞培养
- IL-1β、IL-6、TNF-α在兔腰椎软骨终板退变中的变化及作用被引量：20
- 2007年
- [目的]研究IL-1β、IL-6、TNF-α在软骨终板退变中的作用。[方法]新西兰白兔24只随机分为实验组与对照组。实验组通过腰椎失稳而诱导了腰椎软骨终板退变动物模型。分别于术后12、24、36周摄腰椎X线片及扫描电镜观察,检测不同时段软骨终板中IL-1β、IL-6、TNF-α含量。[结果]X线片示实验组较对照组钙化明显;B rad-ner指数示椎间隙高度随时间延长而逐渐降低;扫描电镜示实验组软骨终板随时间延长胶原纤维逐渐变细、排列紊乱、出现裂隙,蛋白多糖丢失加剧,上述变化较对照组显著;实验组IL-1β、IL-6、TNF-α含量较对照组增多(P<0.05)。[结论]IL-1β、IL-6、TNF-α在软骨终板退变过程中含量相应增加,提示炎性细胞因子可能在软骨终板退变的形成和发展中起重要作用。
- 刘斌金大地瞿东滨蔡道章
- 关键词：炎性细胞因子腰椎软骨终板退变
- NO含量和NOS活性在兔软骨终板退变过程中的变化被引量：22
- 2004年
- 目的研究一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶( NOS)在软骨终板退变中的作用。方法将24只新西兰白兔分为实验组(n=12)和对照组(n=12),实验组通过切除兔腰椎棘上、棘间韧带,咬除部分关节突关节,分离椎旁肌造成腰椎软骨终板退变模型,分别于术后12、24、36周对腰椎摄X线片,并检测不同时间段的软骨终板中NO含量和NOS活性。结果X线片示软骨终板随时间的延长而逐渐钙化,且实验组较对照组钙化明显;实验组各组的NO含量及NOS活性较对照组增多(P<0.05),而24周与36周实验组间NO含量及NOS活性差异不明显(P>0.05)。结论NO和NOS在软骨终板退变过程中,其含量相应增加,提示NO可能在软骨终板退变的形成和发展中起重要作用。
- 刘斌瞿东滨金大地陆地谭军
- 关键词：NOS活性软骨疾病酶学
- 椎间失稳致兔椎间盘退变磁共振影像计量分析被引量：8
- 2004年
- 目的 :探讨由于椎间失稳诱发的椎间盘退变在磁共振成像 (magneticresonanceimaging ,MRI)中的表现。方法 :选用新西兰兔 15只 ,随机分为手术组 9只、对照组 6只 ,手术组沿L3～ 6棘突作后正中切口 ,剥离骶棘肌和关节突附丽肌肉 ,切除棘上、棘间韧带和关节突关节外后 1/ 2 ;对照组作相同皮肤切口即缝合。所有动物在标准条件下饲养 ,分别于术后 2、 4、 8个月行腰椎MRI检查及髓核信号值测量。结果 :术后 2～ 8个月 ,对照组腰椎未见异常 ,而手术组L3～ 6椎间盘则相继出现T2 加权像低信号、腰椎后凸畸形、T1加权像低信号、椎间盘后突和硬膜囊受压等改变。对手术组手术节段及其邻近节段椎间盘髓核信号值的定量分析显示 ,T2 加权像信号值减低在术后 2、 4、8个月均具有统计学意义 ,而T1加权像信号值减低在术后 8个月具有统计学意义 ;T2 信号值减低主要发生于术后 2个月 ,T1信号值减低发生于术后 8个月。结论 :脊柱失稳可诱发椎间盘退变。髓核T2 加权像低信号是椎间盘退变的早期和先发征象 ,T1加权像显示形态改变较好 ,但T1信号值在退变早期变化不明显。
- 王非瞿东滨金大地
- 关键词：椎间盘退变磁共振成像
- 生长因子与椎间盘再生被引量：13
- 2003年
- 目的 追溯近阶段国内外有关生长因子与椎间盘修复研究的进展。方法 广泛查阅近期有关生长因子与椎间盘修复的文献 ,综述生长因子在椎间盘的表达、生长因子对椎间盘细胞的作用等研究。结果 多种生长因子在椎间盘生长发育和退变过程中表达 ,外源性生长因子能促进培养的椎间盘细胞分化增殖、合成蛋白多糖和胶原 ,运用腺病毒可将生长因子基因转染至椎间盘细胞。 结论 生长因子在椎间盘的生长发育和退变过程中起调节作用 。
- 王非瞿东滨金大地
- 关键词：椎间盘退变椎间盘组织转基因技术
- 兔软骨终板退变过程超微结构的观察被引量：5
- 2004年
- 目的:研究兔软骨终板退变过程中的超微结构变化。方法:将18只新西兰白兔随机均分为实验组和对照组,实验组通过切除兔腰椎棘上、棘间韧带,咬除部分关节突关节,分离椎旁肌造成腰椎软骨终板退变模型,分别于术后12、24、36周对腰椎摄X线片,并行扫描电镜观察软骨终板超微结构的变化。结果:X线片示软骨终板随时间的延长而逐渐钙化,且实验组较对照组钙化明显;扫捕电镜示实验组软骨终板随时间延长胶原纤维逐渐变细、排列紊乱、出现裂隙,蛋白多糖丢失加剧,且上述变化较对照组显著。结论:椎间失稳可造成软骨终板退变,导致软骨终板基质的破坏。
- 刘斌瞿东滨金大地陆地安连兵
- 关键词：腰椎退变软骨终板超微结构
- 侧方入路显露兔腰椎间盘及椎间盘内的注射方法被引量：26
- 2003年
- 王非瞿东滨金大地
- 关键词：侧方入路腰椎间盘椎间盘内注射方法
- 椎间盘软骨终板退变及其相关研究进展被引量：16
- 2003年
- 王非瞿东滨金大地
- 关键词：软骨终板下腰痛椎间盘退变中老年人群多发病
- 实验性腰椎失稳致椎间盘退变的放射影像学观察被引量：19
- 2003年
- 目的 :探讨腰椎失稳对椎间盘的影响及其X线表现。方法 :选用新西兰兔 2 7只 ,随机分为手术组 15只 ,对照组 12只 ,手术组沿L3 ～L6棘突作后正中切口 ,剥离骶棘肌 ,切除棘上、棘间韧带 ,咬除关节突关节外后 1/2 ;对照组作相同皮肤切口即缝合 ,分别于术后 4、8个月对腰椎行X线检查。结果 :除外手术组切口感染 1只 ,术后 2和 5个月各死亡 1只 ,其余兔存活完好至取材。术后 4个月 ,手术组均发生腰椎后凸畸形 ,出现软骨终板钙化的椎间盘超过半数 ,8个月时 ,所有椎间盘软骨终板均钙化 ,多数椎间隙狭窄。对椎间隙楔形样变、椎间隙狭窄、终板钙化和骨赘形成 4种退变征象发生频数的统计分析显示 ,手术组与对照组间的差异具有显著性意义。结论 :脊柱稳定对保持椎间盘生理功能意义重大 ,脊柱失稳可诱发椎间盘退变 。
- 王非瞿东滨金大地赵修义余磊
- 关键词：腰椎失稳椎间盘退变软骨终板放射影像学动物实验
