石药集团医药联合研究基金
- 作品数：86 被引量：406H指数：11
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- 相关机构：河北联合大学河北医科大学河北大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 刺五加功能基因密码子偏好性的分析被引量：11
- 2013年
- 目的分析刺五加功能基因密码子的使用方式及其影响因素。方法以刺五加的17条功能基因为材料,利用CodonW和SPSS软件进行多元统计分析和对应性分析。结果刺五加功能基因密码子3个位置的GC量依次为51.03%、41.23%和40.04%,三者均与整个编码区的GC量显著相关(P<0.05),GC12与GC3的相关系数为0.262,未达到显著水平。同义密码子的相对使用频率大于1的密码子共27个,其中22个以A或T碱基结尾。对应性分析的结果表明,第1轴显示了22.78%的差异,与GC3、密码子适应指数和密码子偏好指数均极显著相关(P<0.01),相关系数分别为0.786、0.686和0.617,与有效密码子数的相关性未达显著水平。第2轴显示了19.28%的差异,且仅与有效密码子数极显著相关(r=0.635)。确定了刺五加功能基因的17个最优密码子。结论刺五加的功能基因偏好使用以A或T碱基结尾的密码子,其使用模式受选择和突变的共同影响。
- 邢朝斌吴鹏修乐山周秘
- 关键词：刺五加密码子用法功能基因
- 应用SEFA-PCR扩增刺五加内生青霉鲨烯合酶基因的旁邻序列
- 2012年
- ①目的克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的旁邻序列。②方法根据已经获得的P.minioluteum P116-1a SS DNA序列设计特异性性引物,采用SEFA-PCR(self-formed adaptor PCR)扩增其3'和5'末端未知序列。③结果 3'末端扩增获得长约5 000 bp的片段,5'末端扩增获得长约3 000bp的片段。④结论首次应用SEFA-PCR技术扩增获得P.minioluteum P116-1a SS基因的末端序列,为进一步研究该基因对刺五加皂苷含量的作用机制奠定了基础。
- 朱金丽何闪周秘修乐山邢朝斌
- 关键词：染色体步移
- 刺五加细胞色素P450基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2014年
- 根据已报道的人参、三七等植物的细胞色素P450(Cytochrome P450,P450)基因的cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法克隆刺五加P450基因的cDNA全长序列,并分析其在不同生长发育时期和器官中的表达情况。结果显示,克隆了全长为1 410 bp的刺五加P450基因的cDNA序列,该基因编码469个氨基酸残基组成的蛋白质。GenBank登录号为KF498590,与人参、三七的P450氨基酸序列一致性分别为91.5%和90.4%。刺五加的P450基因在不同生长发育时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P<0.05)。最大表达量出现在盛花期,为最低表达量(萌芽期)的1.26倍。各器官中,叶片的表达量最高,是最低量幼茎的1.49倍。
- 邢朝斌吴鹏李非非刘岩周秘修乐山
- 关键词：刺五加细胞色素P450克隆
- 乳糖酸修饰的黄芩苷自组装胶束载药系统的制备及体外评价被引量：4
- 2021年
- 目的制备乳糖酸(lactobionic acid,LA)修饰的O-羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,OCMC)偶联黄芩苷(baicalein,BC)的自组装胶束,并考察其作为载体共同递送阿霉素(doxorubicin,DOX)和黄芩苷的可行性。方法以OCMC为水溶性骨架,通过酰胺化反应依次将黄芩苷、乳糖酸偶联到骨架上,分别获得O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(CMBC)和靶向的乳糖酸-O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(LA-CMBC)。利用核磁、红外确证偶联物的结构;透析-超声法制备自组装胶束并表征;芘荧光探针法测定临界聚集浓度(critical micelle concentration,CMC);制备载药胶束DOX/LACMBC,紫外测定阿霉素的包封率和载药量;透析法考察载药胶束在不同pH值条件下的释放行为;MTT法考察体外抗肿瘤活性。结果为考察取代度对粒径的影响,制备了3种取代度的CMBC胶束,粒径在164-215 nm,LA-CMBC和DOX/LACMBC胶束的粒径分别约为156 nm和180 nm。LA-CMBC胶束的CMC值为(0.081±0.019)mg/mL。载药胶束中阿霉素的包封率为(69.67±3.87)%,载药量为(16.08±0.25)%。体外释放表明DOX/LA-CMBC具有缓释性和pH敏感性。细胞毒性实验表明,DOX/LA-CMBC胶束对HepG2肝癌细胞生长具有显著的抑制作用。结论制备的载药胶束DOX/LA-CMBC粒径均匀、载药量较好,提高了黄芩苷的水溶性,且具有良好的pH敏感性和抗癌活性。
- 邵艳寻郭切切张舒迪杨雅欣龚法伍刘占军
- 关键词：黄芩苷偶联物阿霉素
- UPLC-Q-TOF-MS法鉴定连翘脂素在人肝微粒体中的代谢产物被引量：6
- 2017年
- 目的建立体外人源肝微粒体孵育体系,应用UPLC-Q-TOF-MS法,首次对连翘脂素在人肝微粒体中的代谢产物进行鉴定。方法采用Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为400μL·min^(-1);进样量5μL。采用正离子模式进行检测,电喷雾离子源,源温度为550℃,质量数扫描范围m/z 100~1 000。结果对ESI-MS正离子模式下连翘脂素可能的裂解途径进行了推测,同时鉴定了连翘脂素在肝微粒体中的8个代谢产物。结论所建立的连翘脂素在人肝微粒体中的UPLC-Q-TOF-MS测定法方便快捷,可应用于连翘脂素在人肝微粒中的代谢研究,同时为连翘脂素的药物代谢动力学提供了依据。
- 张晓旭贾佩佩张智勇张兰桐
- 关键词：人肝微粒体体外代谢
- 多波长RP-HPLC法同时测定参芍口服液中5种成分的含量被引量：4
- 2015年
- 目的：建立同时测定参芍口服液中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Eclipse XDB C18,流动相为0.5%磷酸水溶液-甲醇-乙腈（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为280、230、320nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：在此色谱条件下,5种成分可完全分离,丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B的质量浓度分别在24~384、1.25~20、40.5~648、1.5~24、145~2 320μg/ml范围内与各自峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9、0.999 9、0.999 8、0.999 9、0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.2%;平均加样回收率分别为100.7%、100.0%、99.6%、100.3%、99.3%,RSD分别为1.23%、2.19%、0.87%、1.11%、2.46%（n=9）。结论：该方法专属性强,精密度、准确度好,可用于测定参芍口服液中5种成分的含量。
- 付连浩张熙洁王绍志刘晓红
- 关键词：丹参素原儿茶醛丹酚酸B
- HPLC-ESI-MS/MS法测定连翘心中的8种化学成分被引量：9
- 2017年
- 目的建立HPLC-ESI-MS/MS法同时测定连翘心中连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水,梯度洗脱,体积流量800μL/min,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),负离子模式监测,源喷射电压-4 500 V,离子源温度650℃,定量分析采用多反应监测模式(MRM)。结果连翘心中8种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为98.1%~101.8%,精密度RSD值小于0.84%。连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素和芦丁的量较高,平均质量分数分别为1 609.78、80.08、86.64和373.86μg/g,槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量较低。结论该法灵敏度高、专属性好、结果可靠,适用于连翘心中多组分的测定。
- 张巧月刘艳艳万昶宸付正良王丽芳张兰桐
- 关键词：液质联用连翘酯苷A连翘苷异槲皮苷橙皮苷
- 温度/pH双重敏感纳米水凝胶的制备及性能被引量：2
- 2016年
- 目的:探索温度/pH双重敏感聚N-异丙基丙烯酰胺/壳聚糖纳米水凝胶制备及性能。方法:采用大分子单体聚N-异丙基丙烯酰胺在壳聚糖溶液中,聚乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,以过硫酸胺为引发剂聚合。结果:所得产物为聚N-异丙基丙烯酰胺和壳聚糖的纳米半互穿网络水凝胶,并具有温度敏感性和pH敏感性。结论:该合成方法适用于制备双敏纳米水凝胶药用载体。
- 谢小勇彭琳薛慧敏赵占刘占军
- 关键词：布洛芬
- 刺五加与其愈伤组织中皂苷合成关键酶基因表达的差异分析被引量：2
- 2012年
- 目的:分析刺五加叶片、叶柄及其愈伤组织中SS、SE和bAS基因表达量的差异。方法:以刺五加叶片和叶柄为外植体,诱导获得愈伤组织。实时荧光定量PCR检测SS、SE和bAS基因的表达量。结果:刺五加SS、SE和bAS基因在刺五加叶片、叶柄及其愈伤组织中都有表达,SS、SE和bAS基因在叶片愈伤组织中的表达量分别为叶片中的89.3%、73.8%和83.4%,在叶柄愈伤组织中的表达量分别为叶柄中表达量的80.2%、87.7%和70.9%。结论:刺五加愈伤组织中SS、SE和bAS基因的表达量显著低于植株中的表达量。
- 邢朝斌吴鹏龙月红何闪梁能松
- 关键词：刺五加愈伤组织实时荧光定量PCR
- 补肾固齿丸中11种成分的LC-MS/MS-离子扫描切换法测定被引量：1
- 2013年
- 建立了液相色谱-串联质谱法同时测定补肾固齿丸中的11种成分。采用C18色谱柱,以甲醇-水为流动相,梯度洗脱。采用多反应离子检测,结合正负离子扫描切换,甜菜碱、芒柄花素、五味子醇甲和23-乙酰泽泻醇B采用正离子方式检测,梓醇、丹参素钠、丹酚酸B、肉桂酸、蒙花苷、柚皮素和丹皮酚采用负离子方式检测。所有被测物的线性关系良好;方法回收率为98.5%～107.0%,RSD为0.7%～3.1%。
- 张子建董立华孙冬晓郭盼盼王春英
- 关键词：补肾固齿丸液相色谱-串联质谱
