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北京市自然科学基金(6101001): 作品数：16 被引量：73H指数：6; 相关作者：刘伟成卢彩鸽董丹刘霆吴慧玲更多>>; 相关机构：北京市农林科学院植物保护环境保护研究所沈阳农业大学中国农业大学更多>>; 发文基金：北京市自然科学基金北京市科技计划项目公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>

小链霉菌Yn168发酵产物抗植物病毒活性的研究被引量：9: 2011年; 本文对1株小链霉菌Streptomyces parvus Yn168发酵滤液的抗植物病毒活性进行了研究。结果表明,该菌株的发酵滤液对烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)都有一定的预防和治疗效果。经枯斑试验测定,发酵滤液对TMV的钝化、预防和治疗效果分别为84.2%、68.7%和52.3%;酶标记免疫吸附测定法(ELISA)测定发现,发酵滤液对CMV和PVY的增殖抑制率分别为56.0%和46.4%;盆栽试验结果表明,发酵产物对TMV引起的青椒病毒病的预防和治疗效果分别为55.30%和41.49%。; 田兆丰刘伟成刘霆董丹; 关键词：发酵产物抗病毒活性

不同荧光蛋白基因标记利迪链霉菌被引量：1: 2014年; 利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)A01是一株分离自北京郊区对植物病原真菌具有广谱抑制作用的放线菌,在植物真菌病害防治中具有良好的应用前景。为了检测红霉素启动子在利迪链霉菌A01中的活性,为后期对菌株A01进行遗传改造提供技术支持,同时对生防菌A01进行遗传标记以研究和阐明其在生态环境中的生物学行为规律,本实验采用两亲本接合的方法,将增强绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RFP)基因片段克隆到携带红霉素启动子(ermE*)的链霉菌表达载体pIB139中,成功构建了以egfp和rfp为报告基因的重组载体pIB139-EGFP和pIB139-RFP,并转化利迪链霉菌A01,突变株在荧光显微镜下观察到较强的绿色荧光和红色荧光,同时PCR鉴定结果正确。这表明重组载体pIB139-EGFP和pIB139-RFP成功转入菌株A01,并且ermE*启动子成功启动egfp和rfp基因表达。; 刘慧吴慧玲刘伟成李锦锦陈宝桦王林嵩; 关键词：绿色荧光蛋白红色荧光蛋白

一种改进的PSO-MBCV算法的车底阴影分割: 2014年; 针对当前车底阴影分割算法在复杂环境下鲁棒性较差以及最大类间方差(maximum between-class variance,MBCV)多阈值分割算法不能自动确定阈值个数的问题,提出利用峰值自适应方法自动确定MBCV多阈值分割算法中阈值个数;然后,以阈值的个数为粒子群优化算法(particle swarm optimization,PSO)中粒子的维数,提出了一种改进的PSO-MBCV算法的车底阴影分割。实验结果表明,该算法能有较低的误分类误差,能有效地分割出车底阴影。; 付梦印靳璐王美玲杨毅; 关键词：最大类间方差粒子群优化算法

利迪链霉菌A02活性产物纳他霉素含量检测方法比较: 本研究室从森林土壤中分离筛选出一株高效拮抗菌A02,对多种植物病原真菌具有强烈的抑制作用,经鉴定为利迪链霉菌(Streptomyces.lydicus),化学结构解析确定了其代谢产物主要活性组分为纳他霉素(natamyc...; 卢彩鸽刘伟成花玉鹏卢向阳刘德文

拮抗菌A02代谢产物对几种果树病害的活性被引量：6: 2011年; 以北京市农林科学院植物保护保环境保护研究所自主分离筛选的利迪链霉菌A02为供试菌株,采用离体生物测定法评价了其对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)和枣青霉病菌(Penicilliumsp.)3种果树病原真菌的室内毒力,通过小区试验测定了其对葡萄霜霉病的田间防效。结果表明:A02活性产物对葡萄灰霉病菌、桃褐腐病菌和枣青霉病菌均具有强毒力,对其菌丝生长的抑制中浓度分别为1.3696、8.1115和7.4989mg/L,最低抑菌浓度均在30mg/L以下;对葡萄霜霉病的田间小区防效达95.7%,显著高于对照生物农药10%宝丽安可湿性粉剂和1%多抗霉素水剂。; 刘霆陶万强王合花玉鹏刘伟成; 关键词：纳他霉素果树病害室内毒力田间防效

产纳他霉素生防菌A01和A02与已知产生菌的RAPD比较被引量：3: 2010年; 为了明确自主分离的天然抗真菌活性产物——纳他霉素产生菌A01和A02与已知纳他霉素产生菌的遗传相似性,采用RAPD技术对这2株菌和3个产纳他霉素的标准菌株进行了比较分析。利用筛选出的7个随机引物对5个菌株的PCR扩增共得到154条清晰稳定的DNA条带,其中同源性条带86条,多态性条带68条,分别占总条带数的55.8%和44.2%,平均每个引物扩增出9.7个多态性条带,得到了丰富的DNA指纹图谱。所得数据经NTSYS pc 2.10e软件聚类分析,表明5个菌株间的遗传距离为0.0991~0.4738,其中A02与其它菌株间的遗传距离均较远。结合前期的分类研究结果,确证了菌株A02为新的纳他霉素产生菌。; 王振东亓芳卢彩鸽刘霆刘伟成; 关键词：纳他霉素生防链霉菌 RAPD

一株生防细菌的分离鉴定及其抑菌活性物质的分析被引量：6: 2012年; 随着人们对农产品品质和安全性要求的提高,高效生物防治资源的筛选显得尤其重要。本研究通过平板对峙实验、分子鉴定、刚果红染色、葡聚糖酶基因克隆与序列分析等方法获得一株抑制多种植物病原真菌的芽孢杆菌,编号为YW26。16S rDNA基因序列分析表明该菌株为解淀粉芽孢杆菌;刚果红染色显示该菌株具有很强的产纤维素酶能力;根据GenBank数据库中芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因(CP000560)序列设计引物,克隆得到1527bp的片段,经测序、BLAST分析显示该片段与Bacillus amyloliquefaciens FZB42内切β-1,4-葡聚糖酶基因序列同源性为99%。该解淀粉芽孢杆菌抑菌效果显著,具有较强产纤维素酶能力。因此,该菌株可作为一种生防资源,开发新的生防制剂。; 吴慧玲刘伟成董丹李锦锦张涛涛张殿鹏卢彩鸽; 关键词：解淀粉芽孢杆菌 RDNA

Collimonas sp.ZL261蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学特性被引量：5: 2014年; 分离自西藏色季拉山海拔4530 m高山草甸土壤的山冈单胞菌(Collimonas sp.)ZL261代谢产物具有很高的蛋白酶活性,为了明确其蛋白酶种类及其作用特点,本文采用限制性内切酶法构建了菌株ZL261的基因组文库,利用透明圈法筛选其胞外蛋白酶活性克隆,对其基因及蛋白结构进行了分析,进一步研究了该酶的表达和酶学特性。结果表明:该蛋白酶基因(命名为capro)包含一个长为1092 bp的完整开放阅读框(GenBank:KF992845),其编码蛋白由363个氨基酸组成;序列比对和同源性分析结果显示,该氨基酸序列与食真菌山冈单胞菌(Collimonas fungivorans)Ter331胞外蛋白酶序列(NC015856)相似性最高,为83%;一级、二级和三级结构分析均显示该蛋白含M35金属蛋白酶家族(EC 3.4.24.20)保守结构域。蛋白酶基因在大肠杆菌DH5α中异源表达获得了约38 kDa的目的蛋白。ZL261粗酶液对金属蛋白酶抑制剂EDTA敏感,最适作用pH值为7,最适温度30℃,在10℃时仍保持70%以上酶活力。综合分析可知,该蛋白酶为中性低温金属蛋白酶。具有较好的开发应用潜能。研究结果为微生物蛋白酶的开发提供了新型种质资源,也为探求不同生境微生物蛋白酶的系统进化关系提供了基础信息。; 李洁琼张殿朋卢彩鸽吴慧玲于莉刘伟成; 关键词：蛋白酶基因

生防枯草芽孢杆菌Kct99的GFP标记及其在甘蓝根部的定殖示踪被引量：12: 2012年; 将含有绿色荧光蛋白基因的质粒pGFP4412,电击转入生防菌株枯草芽孢杆菌Kct99,获得具有良好发光表型的荧光标记菌株gfp-Kct99。经稳定性测定表明,质粒pGFP4412在gfp-Kct99中的遗传稳定性为89%。平板对峙培养和温室盆栽接种试验显示,标记菌株gfp-Kct99对甘蓝枯萎病菌保持了原有的拮抗活性;以标记菌株和野生型菌株培养液对甘蓝盆栽苗灌根处理5 d后再接种病原菌,对甘蓝枯萎病的防治效果分别为87.7%,90.2%,二者无显著性差异,但均显著高于同时接种生防菌和病原菌、接种病原菌5 d后再接种生防菌2种处理,说明,绿色荧光标记菌株gfp-Kct99抗甘蓝枯萎病的活性未受标记基因的影响。借助荧光显微镜观察表明,标记菌株可以在甘蓝根部表皮内大量定殖,从而阻止病原菌的侵入。; 田兆丰刘伟成董丹李永丹张涛涛刘德文; 关键词：枯草芽孢杆菌绿色荧光蛋白标记甘蓝枯萎病

吸水链霉菌A03抗菌活性产物发酵条件的优化: 2011年; [目的]吸水链霉菌A03是自主分离的高效拮抗菌株,其活性代谢产物对多种植物病原真菌具有强烈抑制作用;为了建立其高产发酵工艺,并为过程放大提供技术参数,利用正交设计和单因素试验对其发酵培养基和培养条件进行优化。[结果]获得的最适发酵培养基配方(g/L):葡萄糖5,可溶性淀粉5,黄豆粉10,磷酸二氢钾0.5,碳酸钙1,七水硫酸镁0.1;最优培养条件:液体种子菌龄40 h,500 mL摇瓶装液量80 mL,接种量为体积分数12%,摇床转速180 r/min,培养温度28℃,发酵周期216 h;发酵液抑菌直径达3.04 cm。[结论]成功建立了该菌株的小试发酵工艺,发酵水平提高了52.0%,发酵周期缩短30.77%。研究结果为其发酵代谢调控和过程放大提供了基本参数。; 杨秀芳卢彩鸽刘霆刘伟成裘季燕王慧敏; 关键词：吸水链霉菌发酵培养基

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