山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(01BS56)
- 作品数：11 被引量：39H指数：4
- 相关作者：刘鸣汤春生韦德英陈洁穆玉兰更多>>
- 相关机构：山东省立医院山东大学第二医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生哲学宗教生物学更多>>
- 人卵巢癌细胞系具有不同转移潜能亚系的分离及体内和体外鉴定被引量：8
- 2005年
- 目的:克隆具有不同转移潜能的癌细胞亚系,并对其侵袭转移能力进行体内外鉴定。方法:应用有限稀释法对卵巢癌细胞系SKOV3进行单细胞克隆,共分离出14个克隆亚系,根据细胞电泳率,流式细胞仪检测所得细胞周期,筛选出3个电泳率差异较大的克隆亚系(S1、S6和S14)。并应用体内外试验检测各亚系的生物学特性及其侵袭转移能力。结果:S1为高转移亚系,体外生长快,侵袭人工基底膜细胞数及软琼脂集落形成数显著多于其他二者,裸鼠体内100%成瘤,70%转移;而S14为不转移亚系,体外生长慢,侵袭人工基底膜细胞数及软琼脂集落形成数显著少于其他二者,裸鼠体内仅20%成瘤,无1例发生转移。结论:该系统为来自同一肿瘤母系,遗传背景完全相同,却具有不同转移潜能的异质性克隆,为肿瘤转移机制的研究和克隆肿瘤转移相关基因提供了良好模型。
- 陈洁刘鸣汤春生
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤浸润细胞系
- 人卵巢癌细胞系克隆化亚系的转移潜能研究被引量：3
- 2005年
- 目的:克隆具有不同转移潜能的癌细胞亚系,并对其侵袭转移能力进行探讨。方法:应用有限稀释法对卵巢癌细胞系SKOV3进行单细胞克隆,共分离出14个克隆亚系,根据细胞电泳率,筛选出3个电泳率差异较大的克隆亚系(S1、S6和S14)。并应用体内外试验包括生长曲线、人工基底膜侵袭试验、裸鼠异种接种及自发转移试验,检测各亚系的生物学特性及其侵袭转移能力。结果:经体内外多项实验检测证明:S1为高转移亚系,体外生长快,侵袭人工基底膜细胞数显著多于其他二者;而S14为不转移亚系,体外生长慢,侵袭人工基底膜细胞数显著少于其他二者。S1裸鼠体内100%成瘤,70.00%转移;而S14裸鼠体内仅20.00%成瘤,无一例发生转移。结论:该系统为来自同一肿瘤母系,遗传背景完全相同,却具有不同转移潜能的异质性克隆,为肿瘤转移机制的研究和克隆肿瘤转移相关基因提供了良好模型。
- 陈洁刘鸣汤春生
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移细胞系克隆
- 整合素及纤粘连蛋白在调控卵巢癌细胞失巢凋亡过程中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的研究整合素及纤粘连蛋白(fibronectin,FN)在卵巢癌细胞逃避失巢凋亡过程中的作用及其机制。方法2005年1月至2006年5月于山东省立医院采用间接免疫荧光染色检测人卵巢癌SKOV3细胞高转移亚克隆SKOV3-S1细胞中整合素蛋白αv、β1、α5β1的表达;建立细胞悬浮分离培养导致凋亡的模型,流式细胞仪检测细胞凋亡;抗体封闭法检测不同整合素蛋白在凋亡过程中的作用;逆转录PCR检测p53、bcl-2、bax基因表达的变化;比色法检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性改变。结果(1)S1细胞表面普遍表达整合素αv、β1、α5β1。(2)FN使细胞凋亡率由63.7%降至29.0%,αv及β1抗体使凋亡率上升,α5β1抗体对凋亡没有影响。(3)FN使S1细胞中bcl-2基因表达上升,bax表达下降。αv封闭抗体能抑制FN的基因表达调节作用。(4)在悬浮生长状态下,caspase-3被激活;FN使caspase-3活性减弱;加入αv及β1封闭抗体后,酶活性增强。结论SKOV3-S1细胞表面整合素受体蛋白αv通过与FN结合,提高了细胞凋亡调节基因bcl-2/bax的比率,使caspase-3活性减弱,这是SKOV3-S1细胞避免失巢凋亡的重要原因之一。
- 韦德英刘鸣汤春生
- 关键词：失巢凋亡整合素纤粘连蛋白卵巢癌
- 上皮钙粘附素/连环素复合体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义被引量：11
- 2004年
- 目的 :探讨上皮钙粘附素 /连环素 (E cd/cat)复合体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义。方法 :应用免疫组化SABC法检测 87例上皮性卵巢肿瘤中E cd、α 、β 、γ cat蛋白的表达情况。结果 :上皮性卵巢癌 (EOC)中E cd、α 、β 、γ cat的表达较卵巢交界性肿瘤及良性肿瘤明显减少 ;17例转移灶中各指标的表达较原发灶降低 ,但无统计学差异 ;E cd和各连环素的表达缺失或减少均与EOC的病理分级显著相关 ,但与临床分期无关 ;γ cat表达缺失或减少与腹水形成、腹腔广泛转移显著相关 ;联合检测复合体 ,部分或全部指标表达异常与临床分期、组织分化、有无腹水及腹腔广泛转移显著相关。结论 :E cd/cat复合体的表达异常与EOC的发生发展及转移密切相关 ,联合检测较单纯检测E cd更有助于评价EOC的生物学行为。
- 刘鸣汤春生张水红穆玉兰马金龙
- 关键词：卵巢肿瘤上皮钙粘附素连环素免疫组织化学
- 整合素β1与卵巢癌侵袭性的相关研究被引量：6
- 2005年
- 陈洁刘鸣汤春生
- 关键词：整合素Β1侵袭性卵巢癌卵巢上皮性肿瘤组织细胞黏附
- 细胞间粘附分子1在卵巢肿瘤的表达及其对癌细胞粘附侵袭能力的影响被引量：3
- 2005年
- 目的探讨卵巢癌组织及细胞株细胞间粘附分子1(ICAM1)的表达及其意义,探讨ICAM1对卵巢癌细胞粘附侵袭能力的影响。方法分别用免疫组化方法及流式细胞术检测卵巢上皮性肿瘤组织及卵巢癌细胞ICAM1表达,通过MTT法细胞粘附实验和Boyden小室法体外侵袭实验检测ICAM1在卵巢癌细胞粘附侵袭过程中的作用。结果上皮性卵巢癌组织ICAM1阳性表达率71.8%(28/39)明显高于良性肿瘤组织40%(8/20)。SKOV3细胞高侵袭克隆SKOV3S1ICAM1荧光强度高于低侵袭细胞克隆SKOV3-S21。ICAM1抗体对SKOV3S1细胞粘附及侵袭人工基底膜能力的抑制率分别为41.9%和55.0%。结论ICAM1在上皮性卵巢癌侵袭转移过程中起重要作用。
- 刘鸣韦德英汤春生
- 关键词：卵巢肿瘤细胞间粘附分子1肿瘤侵袭
- 人卵巢癌3AO细胞不同转移潜能克隆株的建立被引量：2
- 2005年
- 目的:建立不同转移潜能的卵巢癌克隆细胞株。方法:通过克隆技术和细胞电泳,从卵巢癌细胞系3AO中筛选出3个电泳率差异较大的克隆亚系(A1、A5和A11)。并通过生长曲线、软琼脂集落形成实验、移动实验、体外侵袭实验,比较它们的生物学特性及其侵袭转移能力。结果:A1的电泳速度最快, 为(15.30±0.67)μm/s,细胞群体倍增时间为20.55 h,软琼脂集落形成数及侵袭人工基底膜的细胞数多于其他两者,为高转移潜能克隆株。A11的电泳速度为(6.20±0.72)μm/s,群体倍增时间为38.48 h,软琼脂集落形成数及侵袭人工基底膜的细胞数少于其他两者,为低转移潜能克隆株。结论:此异质性克隆系统来自同一肿瘤母系,遗传背景相似,却具有不同的转移潜能,为研究肿瘤转移机制和克隆肿瘤转移相关基因提供了良好模型。
- 韦德英刘鸣汤春生
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤侵润细胞系克隆
- E-cd、cat的表达与上皮性卵巢癌预后的关系被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨上皮钙粘附素 (E- cd)、连环素 (cat)的表达在估测上皮性卵巢癌 (EOC)预后中的价值。方法 采用免疫组化 SABC法检测 44例 EOC组织中 E- cd、α- cat、β- cat、γ- cat蛋白的表达情况 ,分析其与患者预后的关系。结果 E- cd和 cat的异常表达均与 EOC的病理分级有显著相关性 ,E- cd、γ- cat的异常表达与患者的生存时间显著相关。结论 检测 EOC中 E- cd、cat的表达有助于了解 EOC的生物学行为 ,并可作为估测 EOC预后的重要指标。
- 刘鸣穆玉兰石敏汤春生
- 关键词：上皮钙粘附素连环素预后SABC法
- 上皮性钙粘附素及其mRNA在上皮性卵巢肿瘤中的表达
- 2003年
- 目的:检测E-钙粘附素(E-cd)蛋白及其mRNA在上皮性卵巢肿瘤中的表达,并研究它们与上皮性卵巢癌(EOC)临床分期、组织分化及转移、预后的关系。方法:以免疫组化SABC法及核酸原位杂交法检测44例EOC、8例交界性上皮性卵巢肿瘤及18例良性上皮性卵巢肿瘤石蜡切片中E-cd及其mRNA的表达,并用统计学方法分析它们在EOC不同临床病理参数组中表达水平的差异。结果:E-cd及E-cdmRNA在EOC中的表达明显低于它们在交界性及良性肿瘤中的表达,且与EOC的病理分级显著相关,E-cd与组织类型、有无腹水及预后显著相关。结论:检测E-cd的表达有助于了解上皮性卵巢肿瘤生物学行为,可作为评价EOC预后的重要指标。
- 刘鸣汤春生穆玉兰马金龙
- 关键词：卵巢肿瘤免疫组化原位杂交
- β_1-整合素与纤维粘连蛋白联合促进卵巢癌细胞侵袭转移被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨β1-整合素及纤维粘连蛋白对卵巢癌细胞粘附侵袭能力的影响和作用机制。方法:流式细胞仪间接免疫荧光染色检测人卵巢癌SKOV3-S1细胞β1-整合素表达。用人工基底膜粘附实验和体外侵袭实验观察经β1-整合素抗体处理的SKOV3-S1细胞粘附侵袭能力的变化。逆转录PCR检测β1-整合素处理及与纤维粘连蛋白结合后SKOV3-S1细胞基质金属蛋白酶基因表达的变化,同时用酶谱法分析细胞上清MMPs活性变化。结果:SKOV3细胞高侵袭克隆SKOV3-S1均表达β1-整合素,β1-整合素抗体对其粘附及侵袭人工基底膜能力的抑制率分别为69·8%和65·7%。纤维粘连蛋白能诱导癌细胞MMP2基因表达并分泌蛋白酶,β1-整合素抗体能减弱这种诱导作用。结论:β1-整合素与纤粘维连蛋白结合能诱导卵巢癌细胞粘附并表达MMP2基因,分泌蛋白酶降解ECM,从而促进肿瘤侵袭转移。
- 韦德英刘鸣汤春生
- 关键词：结合素类基质金属蛋白酶卵巢肿瘤
